[發(fā)明專利]含水溶性有機溶劑的脫蠟緩沖液及其使用方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201380015622.5
• 申請日: 2013-01-18
• 公開（公告）號: CN104334717B
• 公開（公告）日: 2017-03-15
• 發(fā)明（設(shè)計）人: J·H·弗里蘭德;M·A·哈維
• 申請（專利權(quán)）人: 理查艾倫科學(xué)公司
• 主分類號: C12N5/00
• 分類號: C12N5/00
• 代理公司: 上海專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司31100
• 代理人: 余穎

1.一種脫蠟緩沖液，所述脫蠟緩沖液包括：

緩沖劑；

沸點高于80℃且在水中的溶解度至少為20體積百分比(vol％)的有機溶劑；以及

水。

2.如權(quán)利要求1所述的脫蠟緩沖液，所述脫蠟緩沖液能夠降低包埋石蠟的熔點并能夠在水性溶液中至少部分溶解包埋石蠟。

3.如權(quán)利要求1所述的脫蠟緩沖液，所述有機溶劑的沸點高于100℃。

4.如權(quán)利要求1所述的脫蠟緩沖液，所述有機溶劑的沸點高于150℃。

5.如權(quán)利要求1所述的脫蠟緩沖液，所述有機溶劑在水中的溶解度為至少0.3vol％至1vol％。

6.如權(quán)利要求1所述的脫蠟緩沖液，所述有機溶劑與水互溶。

7.如權(quán)利要求1所述的脫蠟緩沖液，所述有機溶劑是氧雜環(huán)丁烷、呋喃、四氫呋喃、吡喃、四氫吡喃、噻丁環(huán)、噻吩、四氫噻吩、噻喃或四氫噻喃的脂族、醇、醛、酮、或酯衍生物中的至少一種。

8.如權(quán)利要求1所述的脫蠟緩沖液，所述有機溶劑是糠醛、糠醇、甲基四氫呋喃、四氫呋喃醇、二甘醇二甲醚、二甘醇、二甲基甲酰胺、二甲亞砜、二噁烷、二乙醇胺、丙二醇或其衍生物中的至少一種。

9.如權(quán)利要求1所述的脫蠟緩沖液，進一步包括約0.5vol％至約2vol％的多官能醇。

10.如權(quán)利要求9所述的脫蠟緩沖液，所述多官能醇是聚乙二醇(PEG)、聚丙二醇(PPG)或糖醇中的至少一種。

11.如權(quán)利要求9所述的脫蠟緩沖液，所述多官能醇是PEG?200、PEG?300、PEG?400或PEG?600中的至少一種。

12.如權(quán)利要求1所述的脫蠟緩沖液，所述脫蠟緩沖液進一步包括約0.2vol％至約4vol％的表面活性劑。

13.如權(quán)利要求12所述的脫蠟緩沖液，所述表面活性劑選自陰離子型表面活性劑、陽離子型表面活性劑、兩性離子型表面活性劑、非離子型表面活性劑及其組合。

14.如權(quán)利要求1所述的脫蠟緩沖液，所述水構(gòu)成所述脫蠟緩沖液的超過95vol％。

15.一種脫蠟方法，所述方法包括：

提供裝載在玻片上的組織切片，所述組織切片至少部分包埋于包埋石蠟中；

將所述裝載在玻片上的組織切片浸入脫蠟緩沖液中，所述脫蠟緩沖液包括：

緩沖劑；

沸點高于80℃且在水中的溶解度至少為20體積百分比(vol％)的有機溶劑；

約0.5vol％至約2vol％的多官能醇；以及

至少95vol％的水；

將所述裝載在玻片上的組織切片在脫蠟緩沖液中在選定溫度下孵育足夠?qū)λ鲅b載在玻片上的組織切片進行脫蠟的一段時間，所述脫蠟緩沖液能夠使所述包埋石蠟至少部分溶解于所述脫蠟緩沖液中；

冷卻所述脫蠟緩沖液；以及

將所述裝載在玻片上的組織切片從所述脫蠟緩沖液中移出。

16.如權(quán)利要求15所述的方法，所述脫蠟緩沖液能夠?qū)袷灥娜埸c降低至少5℃。

17.如權(quán)利要求15所述的方法，100ml的所述脫蠟緩沖液能夠溶解至少1g至5g石蠟。

18.如權(quán)利要求15所述的方法，所述脫蠟緩沖液在約58-62℃或以上溫度下能夠溶解所述裝載在玻片上的組織切片中基本全部的包埋石蠟。

19.如權(quán)利要求15所述的方法，所述脫蠟緩沖液能夠在約55℃的溫度下溶解所述裝載在玻片上的組織切片中約7-12％的包埋石蠟且在低于55℃的溫度下溶解所述裝載在玻片上的組織切片中約5％的包埋石蠟。

20.如權(quán)利要求15所述的方法，所述孵育包括：

在約室溫下將所述裝載在玻片上的組織切片浸入所述脫蠟緩沖液中；

在所述脫蠟緩沖液中將所述裝載在玻片上的組織切片預(yù)熱至約85℃；

將其中浸有所述裝載在玻片上的組織切片的所述脫蠟緩沖液的溫度提高至約97℃；

使所述裝載在玻片上的組織切片在約97℃下在所述脫蠟緩沖液中孵育10分鐘至24小時；

將其中浸有所述裝載在玻片上的組織切片的所述脫蠟緩沖液的溫度冷卻至約85℃。