[發明專利]編碼FASCIATED EAR4(FEA4)的核苷酸序列及其使用方法

無效

• 申請號: 201380014054.7
• 申請日: 2013-03-14
• 公開（公告）號: CN104519735A
• 公開（公告）日: 2015-04-15
• 發明（設計）人: S.M.艾倫;D.P.賈克森;M.科馬特蘇;M.保爾特勒;H.沙凱;E.沃爾布雷奇特;R.維克斯
• 申請（專利權）人: 納幕爾杜邦公司;冷泉港實驗室;衣阿華州立大學研究基金公司
• 主分類號: A01H5/10
• 分類號: A01H5/10;C12N15/82
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 李波;李炳愛

相關申請的交叉引用

本申請要求提交于2012年3月14日的美國臨時申請61/610730和提交于2013年1月31日的美國臨時申請61/759342的權益，每個申請全部內容以引用方式并入本文。

政府支持

本文所述發明受政府整體或部分支持，美國批準號為0604923，由國家科學基金會(National?Science?Foundation)以植物基因組研究項目贈款計劃(Plant?Genome?Research?Project?Grants?Program)資助。美國政府在本發明中享有某些權利。

技術領域

本發明涉及植物基因操縱領域，尤其是植物中基因活性和發育的操縱。

背景技術

葉和產生分枝與花的腋生分生組織以規則型式起始于莖端分生組織(SAM)。莖端分生組織頂端的細胞用作干細胞，其分裂以連續置換子細胞至周圍區域，其中它們進入分化的葉或花原基。分生組織從而能夠在發育期間通過平衡細胞增殖與細胞進入新的原基來調節它們的大小。SAM提供植物體的所有地上部分。干細胞調節的中心概念通過CLAVATA/WUSCHEL(CLV/WUS)基因的信號途徑是已知的。在擬南芥(Arabidopsis)中的CLV1、CLV2、或CLV3活性損失引起未分化細胞在莖頂端的積聚，指示CLV基因一起促進干細胞及時轉移到分化途徑中，或抑制干細胞分裂，或以上兩者(Fletcher等人，(1999)Science?283：1911-1914；Taguchi-Shiobare等人，(2001)Genes?and?Development?15：2755-5766；和Trotochaud等人，(1999)Plant?Cell?11：393-405；Merton等人，(1954)Am.J.Bot.41：726-32，以及Szymkowiak等人，(1992)Plant?Cell?4：1089-100；Yamamoto等人，(2000)Biochim.Biophys.Acta.1491：333-40)。CLV1/2的玉米直系同源物是TD1和FEA2，它們已經被報道了(Taguchi-Shiobara等人，(2001)Genes?Dev.6515：2755-66)。期望能夠控制苗和花分生組織的尺寸和外觀，從而提供提高的葉、花、和果實的產量。因此，本發明的目的是為了提供用于調節分生組織發育的新型方法和組合物。

發明內容

在一個實施例中，本發明提供產生具有下降的內源Fea4表達的轉基因植物的方法，該方法包括以下步驟：(a)將重組構建體引入到可再生的植物細胞中，所述重組構建體包含可操作地連接至啟動子的多核苷酸序列，其中多核苷酸序列的表達降低內源Fea4的表達；(b)在步驟(a)之后，由可再生的植物細胞再生出轉基因植物，其中轉基因植物在其基因組中包含重組DNA構建體；以及(c)選擇(b)的轉基因植物，其中該轉基因植物包含重組DNA構建體且在與不包含該重組DNA構建體的對照植物進行比較時表現出下降的Fea4。

在另一個實施例中，本發明提供產生具有下降的內源Fea4表達的轉基因植物的方法，該方法包括以下步驟：(a)將重組DNA構建體引入到可再生的植物細胞中，所述重組DNA構建體包含以有義或反義取向可操作地連接至在植物中有功能的啟動子的分離的多核苷酸，其中多核苷酸包含：(i)SEQ?ID?NO：1或2的核苷酸序列；(ii)基于Clustal?W比對方法，在與SEQ?ID?NO：1或2進行比較時具有至少90％的序列同一性的核苷酸序列；(iii)SEQ?ID?NO：1或2的至少100個連續的核苷酸的核苷酸序列；(iv)能夠在嚴格條件下與(i)的核苷酸序列雜交的核苷酸序列；或(v)經修飾的植物miRNA前體，其中該前體已經經修飾以用設計用于產生指向SEQ?ID?NO：1或2的miRNA的序列替換miRNA編碼區；(b)在步驟(a)之后，由所述可再生的植物細胞再生出轉基因植物，其中所述轉基因植物在其基因組中包含重組DNA構建體；以及(c)選擇(b)的轉基因植物，其中該轉基因植物包含重組DNA構建體且在與不包含該重組DNA構建體的對照植物進行比較時表現出下降的Fea4表達。