[發明專利]使用脂肪組織衍生的干細胞的神經發生篩選方法和系統有效
| 申請號： | 201380011780.3 | 申請日： | 2013-01-25 |
| 公開（公告）號： | CN104285147B | 公開（公告）日： | 2017-10-27 |
| 發明（設計）人： | C.鄺;Y.肖;Z.朱尼;E.K.佩爾斯;D.洪曼 | 申請（專利權）人： | MJN美國控股有限責任公司 |
| 主分類號： | G01N33/50 | 分類號： | G01N33/50 |
| 代理公司： | 中國專利代理(香港)有限公司72001 | 代理人： | 初明明,孟慧嵐 |
| 地址： | 美國伊*** | 國省代碼： | 暫無信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 使用 脂肪 組織 衍生 干細胞 神經 發生 篩選 方法 系統 | ||
1.用于鑒定神經發生-調節化合物的方法，包括：
在候選化合物存在時培養脂肪衍生的干細胞(ADSC)；
確定ADSC中的神經發生程度；
在二十二碳六烯酸(DHA)存在時培養ADSC，
確定在DHA存在時培養的ADSC的神經發生程度；和
將在所述候選化合物存在時培養的ADSC中的神經發生程度與在DHA存在時培養的ADSC中的神經發生程度進行比較，其中與在DHA存在時培養的ADSC中的神經發生程度相比，在所述候選化合物存在時培養的ADSC中的神經發生程度增加，表明所述候選化合物是神經發生-促進化合物。
2.權利要求1的方法，進一步包括：
在所述候選化合物不存在時培養ADSC，
確定在所述候選化合物不存在時培養的ADSC中的神經發生程度，和
將在所述候選化合物存在時培養的ADSC中的神經發生程度與在所述候選化合物不存在時培養的ADSC中的神經發生程度進行比較。
3.權利要求2的方法，其中與在所述候選化合物不存在時培養的ADSC中的神經發生程度相比，在所述候選化合物存在時培養的ADSC中的神經發生程度增加，表明所述候選化合物是神經發生-促進化合物。
4.權利要求2的方法，其中與在所述候選化合物不存在時培養的ADSC中的神經發生程度相比，在所述候選化合物存在時培養的ADSC中的神經發生程度減少，表明所述候選化合物是神經發生-抑制化合物。
5.權利要求1的方法，其中神經發生程度通過觀測ADSC的細胞形態學變化而確定。
6.權利要求5的方法，其中細胞形態學的變化是細胞質收縮、神經突形成、樹突樣突出的形成、軸突形成或其組合。
7.權利要求5的方法，其中細胞形態學的變化通過顯微鏡術觀測。
8.權利要求7的方法，其中細胞形態學的變化通過相差顯微術觀測。
9.權利要求1的方法，其中所述脂肪衍生的干細胞是人脂肪衍生的干細胞(hADSC)。
10.權利要求1的方法，其中所述ADSC在所述候選化合物存在時培養1至5天。
11.權利要求1的方法，其中所述ADSC在包含神經基礎培養基、EGF、b-FGF、N2補充物和L-谷氨酰胺的培養基中培養。
12.權利要求1的方法，進一步包括：在所述候選化合物存在時培養所述細胞之前，在啟動培養基中啟動ADSC1至5天。
13.權利要求12的方法，其中所述啟動培養基包含神經基礎培養基、EGF、b-FGF和N2補充物。
14.權利要求12的方法，其中所述ADSC在所述候選化合物存在時培養1至5天。
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