[實用新型]一種彎曲菌多重PCR檢測試劑盒

有效

• 申請號: 201320068824.3
• 申請日: 2013-02-05
• 公開（公告）號: CN203238265U
• 公開（公告）日: 2013-10-16
• 發明（設計）人: 劉鴻君;李力;王倩
• 申請（專利權）人: 匯智泰康生物技術（北京）有限公司
• 主分類號: C12M1/34
• 分類號: C12M1/34;C12Q1/68;C12Q1/04;C12R1/01
• 代理公司: 北京眾合誠成知識產權代理有限公司 11246
• 代理人: 龔燮英

技術領域

本實用新型涉及分子生物學檢測領域，具體地說，本實用新型涉及一種彎曲菌多重PCR檢測試劑盒。?

背景技術

彎曲菌(Campylobacter?spp)是一種重要的人獸共患病原菌，常引起動物腹瀉、流產、禽類肝炎和藍冠病，還可引起人類急性腸炎、格林巴利綜合征、反應性關節炎、Reiter’s綜合征等多種痰病，人類常因攝入被彎曲菌污染的食物和飲水而感染。研究表明，該菌少至500個也可致病，但很少發生死亡，死亡率為千分之一。最易感人群是5歲以下兒童和15-29歲的青年。該菌廣泛存在于鳥、禽、貓、狗等動物體內，已涉及生的和未煮熟的雞、生的和巴氏殺菌不徹底的牛奶、蛋制品、生火腿、未經氯處理的水。彎曲菌傳統的鑒定方法主要是生化鑒定和血清學方法，操作繁瑣，檢測周期長。因此，建立快速、準確的檢測方法對控制彎曲菌尤為重要且非常迫切。目前市售的彎曲菌檢測試劑盒，檢測致病菌種類少，并且多種PCR體系中無彎曲菌23S?rRNA通用引物，在判斷陰性菌時，無法推測是否為模版DNA加入量不夠。?

實用新型內容

本實用新型的目的是提供一種彎曲菌多重PCR檢測試劑盒。?

為了實現本實用新型的目的，本實用新型提供一種彎曲菌多重PCR檢測試劑盒，包括：盒蓋、盒體、能夠嵌入所述盒體的裝有酶反應混合物的容器、能夠嵌入所述盒體的裝有引物混合物的容器、能夠嵌入所述盒體的裝有陽性對照的容器、和能夠嵌入所述盒體的裝有水?的容器。?

如本文中使用的，術語“能夠嵌入盒體”是指根據需要容器可以自由地插入盒體和從盒體中取出。?

優選地，所述容器是1.5mL離心管。該規格的試管可以大規模便捷地應用于分子生物學檢測領域。?

優選地，所述水是無菌去離子水。?

優選地，本實用新型的試劑盒還包括設置在所述盒體上的兩個孔洞。根據需要，所述兩個孔洞可以不裝有容器，在需要時，兩個孔洞中也可以裝有需要使用的容器，該容器中裝有需要的試劑，這樣就極大地方便了用戶的使用。?

優選地，所述裝有引物混合物的容器裝有檢測空腸彎曲菌的引物、檢測結腸彎曲菌的引物、檢測海鷗彎曲菌的引物、檢測烏普薩拉彎曲菌的引物、檢測胎兒彎曲菌胚胎亞種的引物和彎曲菌屬23SrRNA通用引物。?

更優選地，檢測空腸彎曲菌（Campylobacter?jejuni）的引物（以下簡稱CJ）為：?

上游引物：5’-ACTTCTTTATTGCTTGCTGC-3’?

下游引物：5’-GCCACAACAAGTAAAGAAGC-3’。?

更優選地，檢測結腸彎曲菌（C.coli）的引物（以下簡稱CC）為：?

上游引物：5’-GTAAAACCAAAGCTTATCGTG-3’?

下游引物：5’-TCCAGCAATGTGTGCAATG-3’。?

更優選地，檢測海鷗彎曲菌（C.lari）的引物（以下簡稱CL）為：?

上游引物：5’-TAGAGAGATAGCAAAAGAGA-3’?

下游引物：5’-TACACATAATAATCCCACCC-3’。?

更優選地，檢測烏普薩拉彎曲菌（C.upsaliensis）的引物（以下簡稱CU）為：?

上游引物：5’-AATTGAAACTCTTGCTATCC-3’?

下游引物：5’-TCATACATTTTACCCGAGCT-3’。?

更優選地，檢測胎兒彎曲菌胚胎亞種（C.fetus?subsp.fetus）的引物（以下簡稱CF）為：?

上游引物：5’-GCAAATATAAATGTAAGCGGAGAG-3’?

下游引物：5’-TGCAGCGGCCCCACCTAT-3’。?

更優選地，彎曲菌屬23S?rRNA通用引物（以下簡稱23S?rRNA）為：?

上游引物：5’-TATACCGGTAAGGAGTGCTGGAG-3’?

上游引物：5’-ATCAATTAACCTTCGAGCACCG-3’。?

本實用新型所述的試劑盒優點在于：1、多重PCR方法操作簡單快速，能同時檢測5種常見致病彎曲菌；2、本試劑盒中的陽性對照包含待測五種菌的DNA模版，能監控多重體系中每對引物的工作情況；多重PCR體系中加入彎曲菌23S?rRNA通用引物，能直接反應每個PCR體系中是否加入了細菌DNA模版，防止出現由于模版加入量不夠出現的假陰性。?

附圖說明