[實(shí)用新型]一種固液分離核酸親和結(jié)合的復(fù)合裝置

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201320027264.7
• 申請(qǐng)日: 2013-01-18
• 公開（公告）號(hào): CN203200257U
• 公開（公告）日: 2013-09-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張姣英
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 張姣英
• 主分類號(hào): C12M1/00
• 分類號(hào): C12M1/00
• 代理公司: 杭州浙科專利事務(wù)所(普通合伙) 33213
• 代理人: 鄭文濤;嚴(yán)曉

技術(shù)領(lǐng)域

本實(shí)用新型屬于生物化學(xué)和分子生物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體是一種固液分離核酸親和結(jié)合的復(fù)合裝置。??????

背景技術(shù)

核酸制備是分子生物學(xué)最基本的實(shí)驗(yàn)技術(shù)之一，廣泛用于生命科學(xué)的各個(gè)研究領(lǐng)域。由于該實(shí)驗(yàn)使用的范圍廣、頻度高，因此在保證核酸制品的純度和得率的前提下，操作上要求盡量簡(jiǎn)單省時(shí)。以質(zhì)粒DNA為例，目前最廣泛使用的質(zhì)粒DNA制備技術(shù)是堿裂解親和吸附柱法。其基本原理是：當(dāng)菌體在NaOH和SDS溶液中裂解時(shí)，蛋白質(zhì)與DNA發(fā)生變性，加入中和液后溶液偏酸性，質(zhì)粒DNA分子復(fù)性并依然呈溶解狀態(tài)，染色體DNA則因?yàn)榉肿恿烤薮?，在偏酸性的溶液中不溶解而和變性的蛋白質(zhì)以及SDS共同析出。通過離心達(dá)到相分離后，含有質(zhì)粒DNA的上清液則被轉(zhuǎn)移到底部鋪有氧化硅纖維膜的親和吸附柱內(nèi)，通過離心，DNA被特異吸附在膜上，其它雜質(zhì)不被吸附而隨液體流出。將膜洗滌后，遂將質(zhì)粒DNA從膜上離心洗下。整個(gè)流程耗時(shí)約20—25分鐘，而其中離心分相，上清液轉(zhuǎn)移，和離心親和吸附占總耗時(shí)的70%左右，是整個(gè)流程中最為主要的耗時(shí)步驟，其原因是由于這些操作分步進(jìn)行，導(dǎo)致耗時(shí)較長(zhǎng)，不利于質(zhì)粒DNA制備的高效性。同時(shí)離心分相得到的上清液往往漂浮著些許脂類物質(zhì)，既給上清液的轉(zhuǎn)移帶來了干擾，也可能污染質(zhì)粒DNA產(chǎn)品。

實(shí)用新型內(nèi)容

為了解決上述技術(shù)問題，本實(shí)用新型提供了一種固液分離核酸親和結(jié)合的復(fù)合裝置。

一種固液分離核酸親和結(jié)合的復(fù)合裝置，其特征在于包括儲(chǔ)液皿，所述儲(chǔ)液皿內(nèi)部設(shè)置有一個(gè)親和吸附柱，所述親和吸附柱內(nèi)部設(shè)置有過濾柱。

所述的一種固液分離核酸親和結(jié)合的復(fù)合裝置，其特征在于所述過濾柱上端開口，過濾柱底部設(shè)置有網(wǎng)格多孔狀底A，網(wǎng)格多孔狀底A上設(shè)置有過濾膜，過濾膜上設(shè)置有過濾膜壓圈。

所述的一種固液分離核酸親和結(jié)合的復(fù)合裝置，其特征在于所述過濾柱上端開口處設(shè)置有外掛沿。

所述的一種固液分離核酸親和結(jié)合的復(fù)合裝置，其特征在于所述親和吸附柱上端開口，親和吸附柱底部設(shè)置有網(wǎng)格多孔狀底B，網(wǎng)格多孔狀底B上設(shè)置有親和吸附膜，親和吸附膜上設(shè)置有吸附膜壓圈。

所述的一種固液分離核酸親和結(jié)合的復(fù)合裝置，其特征在于所述網(wǎng)格多孔狀底B的下部設(shè)置有漏斗狀底。

所述的一種固液分離核酸親和結(jié)合的復(fù)合裝置，其特征在于所述親和吸附柱上端開口處設(shè)置有外掛沿。

所述的一種固液分離核酸親和結(jié)合的復(fù)合裝置，其特征在于所述過濾柱的外徑小于親和吸附柱的內(nèi)徑。

本實(shí)用新型的一種固液分離核酸親和結(jié)合的復(fù)合裝置，能快速將液體和沉淀物分離，并同時(shí)讓經(jīng)過過濾的液體通過親和吸附柱，完成DNA的親和吸附，替代了現(xiàn)有技術(shù)中離心分相、上清液轉(zhuǎn)移、離心結(jié)合三個(gè)繁瑣和耗時(shí)的步驟，大大提高了質(zhì)粒DNA的制備效率，同時(shí)還具有結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、制造成本低和使用方便等優(yōu)點(diǎn)。

附圖說明

圖1是本實(shí)用新型的一種固液分離核酸親和結(jié)合的復(fù)合裝置的整體結(jié)構(gòu)示意圖；

圖2是本實(shí)用新型的一種固液分離核酸親和結(jié)合的復(fù)合裝置的過濾柱的分解圖；

圖3是本實(shí)用新型的一種固液分離核酸親和結(jié)合的復(fù)合裝置的親和吸附柱的分解圖；

圖4是本實(shí)用新型的一種固液分離核酸親和結(jié)合的復(fù)合裝置的儲(chǔ)液皿的分解圖；

圖中，1—過濾柱；2—親和吸附柱；3—儲(chǔ)液皿；4—過濾膜壓圈；5—過濾膜；6—網(wǎng)格多孔狀底A；7—吸附膜壓圈；8—親和吸附膜；9—網(wǎng)格多孔狀底B；10—漏斗狀底。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合附圖對(duì)本實(shí)用新型進(jìn)行詳細(xì)說明。

如圖1至圖4所示，本實(shí)用新型包括一個(gè)親和吸附柱和設(shè)置在親和吸附柱內(nèi)部的過濾柱，過濾柱的外徑比親和吸附柱的內(nèi)徑略小，如果過濾柱的開口設(shè)置有外掛沿，則通過外掛沿懸掛在親和吸附柱體內(nèi)，如果沒有外掛沿，則可將過濾柱直接坐在親和吸附柱底部的吸附膜壓圈上。使用時(shí)，如果使用離心法，則將復(fù)合裝置置于接液管內(nèi)成為一體，如果使用負(fù)壓吸濾法，則將此裝置和負(fù)壓源相連。

以離心法為例，使用方法如下：首先將過濾柱穿設(shè)到親和吸附柱中，然后將這個(gè)復(fù)合裝置穿設(shè)到儲(chǔ)液皿中。先將中和后的含不溶物的混合液轉(zhuǎn)移到過濾柱中，然后將上述的三重復(fù)合體高速離心兩分鐘，沉淀物被過濾膜截留，液體則通過過濾膜，隨后流經(jīng)吸附膜，質(zhì)粒DNA被氧化硅纖維膜吸附，廢液被收集管收集。丟棄過濾柱和儲(chǔ)液皿中的廢液，將親和吸附柱重新插入儲(chǔ)液皿。對(duì)吸附膜離心洗滌后，將DNA從膜上洗脫下來。由于采用本復(fù)合裝置將現(xiàn)行技術(shù)中離心分相、上清液轉(zhuǎn)移和親和吸附三個(gè)步驟合并成了一個(gè)步驟完成，大大提高了質(zhì)粒DNA制備的效率。

以上所述僅為本實(shí)用新型的較佳實(shí)施例，并不用以限制本實(shí)用新型，凡在本實(shí)用新型的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換和改進(jìn)等，均包含在本實(shí)用新型的保護(hù)范圍之內(nèi)。