[發明專利]一種決明子多糖定量檢測方法

有效

• 申請號: 201310754301.9
• 申請日: 2013-12-31
• 公開（公告）號: CN103728263A
• 公開（公告）日: 2014-04-16
• 發明（設計）人: 姚松君;高新開;熊斌
• 申請（專利權）人: 無限極（中國）有限公司
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 裘暉;張燕玲

1.一種決明子多糖定量檢測方法，其特征在于包括以下步驟：

（1）粉碎：將待測決明子進行粉碎，過20～80目篩得決明子粉料，干燥后備用；

（2）脫脂去色：用丙酮浸泡決明子粉料，振搖30min后，靜置30min，倒去上層清液；重復該步驟至上層清液無色后，固液分離得脫脂粉料；

（3）熱水提取：用80～100℃熱水對脫脂粉料進行提取1～3小時，合并濾液獲得提取液；

（4）純化處理：

a.聚乙烯聚吡咯烷酮處理：按0.5～5g/100mL的濃度往步驟（3）的提取液中加入聚乙烯聚吡咯烷酮，慢速攪拌1～3小時后，過濾，合并濾液；將濾液加入去離子水，定容，得待測樣品液；或，

b.聚乙烯聚吡咯烷酮/醇沉處理：按0.5～5g/100mL的濃度往步驟（3）的提取液中加入聚乙烯聚吡咯烷酮，慢速攪拌1～3小時后，過濾，合并濾液；加入相當于濾液3倍體積的無水乙醇，室溫靜置4小時，離心后取沉淀物；往沉淀物加入去離子水復溶，定容，得待測樣品液；

（5）測定：以混合單糖標準樣品建立標準曲線，以苯酚-硫酸法測定待測樣品液的多糖濃度，即為待測決明子的多糖濃度；

所述混合單糖標準樣品是由混合單糖配制而成，所述混合單糖包括摩爾百分數90%以上的甘露糖、葡萄糖、半乳糖和木糖；甘露糖、葡萄糖、半乳糖和木糖的摩爾比例為43:8:21:19。

2.根據權利要求1所述的決明子多糖定量檢測方法，其特征在于：步驟（1）所述的干燥后備用是將決明子粉料在60℃下干燥6小時，然后置于干燥器中備用。

3.根據權利要求1所述的決明子多糖定量檢測方法，其特征在于：步驟（2）所述的決明子粉料與丙酮的料液重量比為1:（15～30）。

4.根據權利要求1所述的決明子多糖定量檢測方法，其特征在于：步驟（3）所述的脫脂粉料與熱水的料液比為1:（20～35）（g/mL）。

5.根據權利要求1所述的決明子多糖定量檢測方法，其特征在于：步驟（5）所述混合單糖在配成混合單糖標準樣品前先于102℃烘干至恒重后備用。

6.根據權利要求1所述的決明子多糖定量檢測方法，其特征在于：步驟（5）所述混合單糖還包括葡萄糖醛酸、氨基半乳糖和阿拉伯糖；所述甘露糖、葡萄糖醛酸、氨基半乳糖、葡萄糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖的摩爾比為43:4:1:8:21:19:5。

7.根據權利要求1所述的決明子多糖定量檢測方法，其特征在于：步驟（5）所述的苯酚-硫酸法包括如下步驟：取1mL待測樣品液加入具塞試管中，加入質量分數5%的苯酚溶液2mL，混勻，緩慢加入7mL濃硫酸，混勻，沸水浴15min，取出，冰水冷卻至室溫，在490nm處測定吸光值；根據吸光值及標準曲線確定樣品液濃度。