[發(fā)明專利]一種含飼用復(fù)合酶的生長(zhǎng)豬專用酶及其制備方法有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201310733013.5 | 申請(qǐng)日： | 2013-12-27 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN103667222A | 公開(kāi)（公告）日： | 2014-03-26 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 李海清;胡永明;胡波;樊淳紅;辜承蘭 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 湖南鴻鷹生物科技有限公司 |
| 主分類號(hào)： | C12N9/42 | 分類號(hào)： | C12N9/42;C12N9/16;C12N9/26;C12N9/50;C12N9/44;C12N9/02;C12N9/04;A23K1/165 |
| 代理公司： | 暫無(wú)信息 | 代理人： | 暫無(wú)信息 |
| 地址： | 415400 湖*** | 國(guó)省代碼： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 含飼用 復(fù)合 生長(zhǎng) 專用 及其 制備 方法 | ||
1.一種含飼用復(fù)合酶的生長(zhǎng)豬專用酶，由以下重量份數(shù)的原料組成：黑曲霉培養(yǎng)物30-50份，酸性木聚糖酶30-50份，植酸酶20-30份，β-葡聚糖酶15-20份，纖維素酶15-20份，淀粉酶10-15份，酸性蛋白酶10-15份，中草藥提取物10-15份，保護(hù)劑10-15份，激活劑10-15份；
所述黑曲霉培養(yǎng)物的制備方法如下：將保存完好的黑曲霉DM-18的斜面菌種經(jīng)菌種活化和一級(jí)、二級(jí)、三級(jí)及種子罐液體種子逐級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng)得到液體種子，以6%接種量接入發(fā)酵罐，培養(yǎng)溫度28-30℃，攪拌速度200-700r/m，通風(fēng)量（V/V）1:1-3,培養(yǎng)時(shí)間10-15h；然后以1-2℃/h降溫速率緩慢降溫至10-15℃，恒溫培養(yǎng)15-20h；繼續(xù)以1-2℃/h降溫速率緩慢降溫至2-5℃，此時(shí)，將液體種子以4%接種量追加接入發(fā)酵罐，恒溫培養(yǎng)20-30h；最后以1-2℃/h升溫速率緩慢升溫至10-15℃，恒溫培養(yǎng)15-20h；繼續(xù)以1-2℃/h升溫速率緩慢升溫至30-33℃，恒溫培養(yǎng)15-20h；發(fā)酵液經(jīng)離心分離得到黑曲霉?jié)窬w和離心液，離心液于10-20℃循環(huán)超濾濃縮去除水分得固形物含量20-40%濃縮液，濃縮液與黑曲霉?jié)窬w以質(zhì)量比1-10:1均勻混合，然后經(jīng)真空冷凍干燥、超微粉碎得黑曲霉培養(yǎng)物；
所述黑曲霉DM-18已于2013年11月3日保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏號(hào)為CCTCC?NO：M2013541；
所述保護(hù)劑由以下重量份數(shù)的原料組成:海藻糖20-30份，NaCl20-30份，(NH4)2SO410-15份，半胱氨酸10-15份；
所述激活劑是由如下質(zhì)量份數(shù)的無(wú)機(jī)鹽均勻混合而成：氯化鋅30-40份，氯化鈣10-20份，硫酸鈉10-20份，氯化鎂5-10份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種含飼用復(fù)合酶的生長(zhǎng)豬專用酶，其特征在于，所述中草藥提取物的制備方法為：分別將中草藥粉碎至粒徑為2毫米以下，然后于容器中均勻混合并添加3-6倍重量的水，控制溫度70℃～90℃保持2～4h，然后降溫至45-60℃，加入混合物料總重量5-10%的混合酶制劑進(jìn)行酶解，用乳酸調(diào)節(jié)pH值為5.5-6.8，酶解2-4h，最后添加混合物料0.5-3倍重量乙醇和丙醇的混合物，控制溫度至60℃～78℃保持3～4h，過(guò)濾；濾液減壓濃縮至固形物含量為20%以上，然后冷凍干燥獲得中草藥提取物；
所述中草藥的重量份數(shù)組成為：沙棘20-30份，決明子20-30份，枸杞10-15份，山藥10-15份，北沙參5-10份，黃荊子5-10份，玉竹3-5份，薏米3-5份，大麥芽3-5份，桂花3-5份，黃芪3-5份；
所述混合酶的重量份數(shù)組成為：內(nèi)β-葡聚糖酶10-20份，外β-葡聚糖酶10-20份，β-葡萄糖苷酶10-15份，木聚糖酶15-20份，戊聚糖酶15-20份，普魯蘭酶20-30份，β-淀粉酶10-15份，中性蛋白酶10-15份，酸性蛋白酶10-15份，超氧化物歧化酶5-10份，葡萄糖氧化酶5-10份，酸性磷酸酶5-10份。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種含飼用復(fù)合酶的生長(zhǎng)豬專用酶，其特征在于，制備黑曲霉培養(yǎng)物的斜面培養(yǎng)基組成為：干酪素4g，磷酸氫二鉀2g，氯化鎂0.6g，氯化鉀0.8g，硫酸亞鐵0.02g，葡萄糖20g，瓊脂20g，中草藥粉劑5-20g,蒸餾水l000mL，pH值5.8，121℃滅菌20min。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種含飼用復(fù)合酶的生長(zhǎng)豬專用酶，其特征在于，制備黑曲霉培養(yǎng)物的種子罐培養(yǎng)基組成為：玉米粉50-60g，豆粉15-25g，麩皮10-15g，魚(yú)粉10-15g，氯化鈣6-10g，氯化銨1-3g，磷酸氫二鈉1-2g，中草藥粉劑15-20g，海藻糖10-30g，純凈水l000mL，pH值5-7，121℃滅菌20min。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種含飼用復(fù)合酶的生長(zhǎng)豬專用酶，其特征在于，制備黑曲霉培養(yǎng)物時(shí)種子罐發(fā)酵液孢子濃度為7.0x108-8.0x108個(gè)/ml。
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