[發(fā)明專利]一種從雪松松針中制備食品褐變抑制劑的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310728872.5
• 申請(qǐng)日: 2013-12-25
• 公開（公告）號(hào): CN103739582A
• 公開（公告）日: 2014-04-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 高鴻;梁雪;吳艷萍;鐘凱;黃毅娜;山口五十磨
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 四川大學(xué)
• 主分類號(hào): C07D311/32
• 分類號(hào): C07D311/32;A23L1/272
• 代理公司: 成都科海專利事務(wù)有限責(zé)任公司 51202
• 代理人: 鄧?yán)^軒

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種從雪松松針中制備食品褐變抑制劑的方法，屬于食品褐變抑制劑及其制備領(lǐng)域。?

背景技術(shù)

食品在加工貯存過程中出現(xiàn)顏色變褐、紅、藍(lán)、黃、綠及其他顏色的現(xiàn)象稱為褐變。有些食品，例如果蔬中的多酚類物質(zhì)與空氣中的氧氣在多酚氧化酶(PPO)的催化下反應(yīng)生鄰醌類化合物，隨后，鄰醌繼續(xù)將多酚類物質(zhì)氧化成羥基醌，羥基醌最終聚合為黑褐色的黑色素物質(zhì)（Chang?TS.An?updated?review?of?tyrosinase?inhibitors[J].International?journal?of?molecular?sciences,2009,10（6）：2440-2475）。食品褐變包括蔬菜、水果和魚、蝦等甲殼類，如果合成了較多的黑色素，這就會(huì)嚴(yán)重地影響產(chǎn)品的質(zhì)量，從而導(dǎo)致其產(chǎn)品質(zhì)量的下降。同時(shí)，食品褐變也是當(dāng)前我國農(nóng)、水產(chǎn)品保鮮面臨的一個(gè)需迫切解決的課題。食品褐變包括多酚氧化酶，例如酪氨酸酶等導(dǎo)致的酶促褐變與非酶促褐變（孫芝楊,錢建亞.果蔬酶促褐變機(jī)理及酶促褐變抑制研究進(jìn)展[J].中國食物與營養(yǎng),2007,(3)：22～24）。因此，從天然產(chǎn)物中尋找具有酪氨酸酶抑制活性和抗氧化活性的食品褐變抑制劑成為人們的研究熱點(diǎn)。?

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足而提供一種從雪松松針中制備食品褐變抑制劑的方法，其特點(diǎn)是從雪松松針中制備食品褐變抑制劑的抑制效果好，褐變抑制劑的有效組分2R,3R-二氫楊梅素對(duì)酪氨酸酶顯示了較強(qiáng)的抑制活性，并顯示了較好的抗氧化活性，同時(shí)2R,3R-二氫楊梅素對(duì)鮮切蘋果的褐變有較強(qiáng)的延緩作用。?

本發(fā)明的目的由以下技術(shù)實(shí)施實(shí)現(xiàn)，其中所述原料份數(shù)除特殊說明外，均為重量份數(shù)。?

從雪松松針中制備食品褐變抑制劑的方法包括以下步驟：?

（1）將干燥雪松松針粉碎，平均粒度為300～500μm，按料液比1g∶10～20mL加入正己烷，在室溫下震蕩12～24h，過濾、分離正己烷萃取液；?

（2）將上述脫脂松針，按料液比1g∶10～30mL加入濃度為50～70wt%的甲醇作為提取劑，在室溫下震蕩24～48h，分離上清液，并將上清液濃縮干燥后獲得甲醇浸膏，得率?為18～22%；?

（3）將上述甲醇浸膏懸浮于濃度為50wt%的甲醇20～30mL，上大孔吸附樹脂Diaion?HP-20層析柱，用甲醇-水梯度洗脫，濃度為0wt%、15wt%、30wt%、40wt%、60wt%、100wt%甲醇，洗脫流速為3～5mL/min，優(yōu)選流速為3mL/min；?

（4）收集上述40wt%甲醇洗脫液，濃縮干燥后得到樣品，用制備高效液相色譜繼續(xù)分離純化；液相色譜的分離條件如下：ODS-3色譜柱（φ20×250mm，5μm）；流速，5mL/min；柱溫25℃；檢測波長，280nm；梯度洗脫液，甲醇和水的體積比為1∶1；收集16.5min的色譜峰，減壓除去溶劑，獲得褐變抑制劑。?

褐變抑制劑的有效組分為2R,3R-二氫楊梅素，其結(jié)構(gòu)式如下?

所述從雪松松針中制備的食品褐變抑制劑用于食品抗褐變。?

結(jié)構(gòu)表征與性能測試：?

1、采用質(zhì)譜對(duì)2R,3R-二氫楊梅素的結(jié)構(gòu)測試得到了證實(shí)，如圖1所示。ESI?HR-MS(negative),m/z319.0461[M-H]-。?

2、采用¹H-NMR對(duì)2R,3R-二氫楊梅素的結(jié)構(gòu)測試得到了證實(shí)，如圖2所示。?

3、采用¹³C-NMR對(duì)2R,3R-二氫楊梅素的結(jié)構(gòu)測試得到了證實(shí)，如圖3所示。?

4、2R,3R-二氫楊梅素對(duì)蘋果模型褐變現(xiàn)象的抑制測試方法及測試結(jié)果如下：?

待測溶液包括水（陰性對(duì)照）、0.5%抗壞血酸水溶液、0.05%2R,3R-二氫楊梅素水溶液和0.5%抗壞血酸+0.05%2R,3R-二氫楊梅素水溶液。測試結(jié)果見圖4-6所示。?

本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)：?

本發(fā)明提供了從雪松松針中制備食品褐變抑制劑的抑制效果好，2R,3R-二氫楊梅素對(duì)于酪氨酸酶顯示了較強(qiáng)的抑制活性以及較好的抗氧化活性，同時(shí)2R,3R-二氫楊梅素對(duì)鮮切蘋果的褐變有較強(qiáng)的延緩作用；并具有工藝簡單、操作方便等優(yōu)點(diǎn)。?

附圖說明

圖1：2R,3R-二氫楊梅素化合物的質(zhì)譜圖?

如圖1所示，結(jié)果表明該化合物的分子量為320。?

圖2：2R,3R-二氫楊梅素化合物的氫譜圖?