[發(fā)明專利]降低含油佐劑和含表面活性劑抗原之間的干擾

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310726997.4
• 申請(qǐng)日: 2006-08-02
• 公開（公告）號(hào): CN103690945A
• 公開（公告）日: 2014-04-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: M·肯托尼
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 諾華疫苗和診斷有限公司
• 主分類號(hào): A61K39/39
• 分類號(hào): A61K39/39;A61P31/12;A61P31/20;A61P33/06;A61K47/26;A61K39/29;A61K39/015
• 代理公司: 上海專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 31100
• 代理人: 余穎

本申請(qǐng)是國(guó)際申請(qǐng)PCT/IB2006/002581，國(guó)際申請(qǐng)日2006年8月2日，中國(guó)國(guó)家階段申請(qǐng)?zhí)?00680034084.4的發(fā)明專利申請(qǐng)的分案申請(qǐng)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生產(chǎn)含佐劑疫苗的領(lǐng)域。具體說，本發(fā)明涉及在生產(chǎn)基于含表面活性劑抗原的疫苗的過程中使用脂肪族佐劑。

背景技術(shù)

采用佐劑能提高對(duì)疫苗抗原的免疫應(yīng)答是眾所周知的(參見例如參考文獻(xiàn)1和2)。許多年以來，批準(zhǔn)人用的唯一佐劑是鋁鹽，但許多國(guó)家已經(jīng)批準(zhǔn)了含有MF59佐劑和RC-529佐劑的疫苗，包括意大利(在希龍公司(Chiron)的FLUAD^TM產(chǎn)品中)和阿根廷(在伯納生物科技公司(Berna?Biotech)的SUPERVAX^TM產(chǎn)品中)。處于后期人用實(shí)驗(yàn)階段的其它佐劑包括膽固醇和皂苷、ISCOM、MPL^TM、AS04、病毒顆粒、SBA4等的混合物。

一些鋁鹽替代物的共有特征是存在脂肪族組分。例如，MF59佐劑包含鯊烯(油)，MPL^TM包含帶有多個(gè)脂肪酸鏈連接于二葡糖胺主鏈的脫酰基化形式的單磷酰基脂質(zhì)A。

本發(fā)明涉及避免這些脂肪族佐劑和含有表面活性劑組分的抗原之間可能發(fā)生的干擾。

發(fā)明概述

本發(fā)明者發(fā)現(xiàn)，疫苗組合物中的脂肪族佐劑可能與含有表面活性劑組分的抗原不相容。然而，在許多情況下，仍然需要合并脂肪族佐劑和抗原/表面活性劑混合物，本發(fā)明的目的之一是提供避免這樣做的過程中可能產(chǎn)生的困難的方式。另一目的是提供合并佐劑和抗原的方法，該方法可以避免不相容。

為了避免使用一般采用表面活性劑純化的抗原時(shí)的這些不相容問題，本發(fā)明的第一個(gè)方面提供了一種制備免疫原性組合物的方法，其中：(a)該組合物含有抗原和脂肪族佐劑；和(b)在不存在表面活性劑的情況下基本純化該抗原。采用避免使用表面活性劑的替代方法來純化抗原，可解決對(duì)脂肪族佐劑的任何不相容性問題。

然而，出于臨床、歷史或法規(guī)原因，可能無法在不采用表面活性劑的情況下純化抗原，或者完全去除疫苗中的表面活性劑。在這種情況下，本發(fā)明通過降低組合物中油與表面活性劑的比例避免了干擾。典型MF59/HBsAg疫苗所含的油量遠(yuǎn)高于表面活性劑，油與表面活性劑的比例超過4000:1(重量比)。本發(fā)明的目標(biāo)是最大程度減少組合物中脂肪族佐劑的含量，在第二方面，本發(fā)明采用的油量為至多重量過量1000倍。因此，本發(fā)明提供了一種制備免疫原性組合物的方法，所述方法包括合并(i)含有表面活性劑的抗原組分和(ii)脂肪族佐劑組分的步驟，以得到所述脂肪族佐劑與所述表面活性劑的重量比小于1000:1的組合物。相似地，本發(fā)明提供了免疫原性組合物，其中：(a)所述組合物含有抗原組分和脂肪族佐劑組分；(b)所述抗原組分含有表面活性劑；和(c)所述脂肪族佐劑與所述表面活性劑的重量比小于1000:1。

脂肪族佐劑

本發(fā)明的第一和第二方面都使用了脂肪族佐劑，即含有脂肪族分子的佐劑組分。典型的脂肪族佐劑含有可代謝油、脂肪酸和/或含有脂肪酸部分的分子。

兩種優(yōu)選脂肪族佐劑是稱為'MF59'和'MPL'的佐劑。'MF59'是脂肪族佐劑，因?yàn)槠浜凶鳛榭纱x油的鯊烯。'MPL'是脂肪族佐劑，因?yàn)樗杏枚鄠€(gè)脂肪酸鏈取代的二糖。除MF59以外，還可采用其它水包油乳劑佐劑。

因此，本發(fā)明優(yōu)選組合物包含：(a)水包油乳劑，如含有鯊烯和聚氧乙烯山梨聚糖單油酸酯(任選為山梨聚糖三油酸酯)的亞微米水包油乳劑；和/或(b)3-O-脫酰基化的單磷酰基脂質(zhì)A。聚氧乙烯山梨聚糖單油酸酯也稱為聚山梨酯80。

除'MF59'和'MPL'以外，可用于本發(fā)明的其它脂肪族佐劑包括但不限于：氨基葡萄糖苷磷酸酯衍生物；N-酰基-假二肽；來源于大腸桿菌(Escherichia?coli)脂質(zhì)A的可溶性佐劑'OM-174'；含有連接于含磷酸無環(huán)主鏈的脂質(zhì)的化合物；和無環(huán)合成脂質(zhì)A類似物。