[發明專利]雞新城疫病毒抗體水平相關的分子標記及其鑒別方法和應用

有效

• 申請號: 201310714390.4
• 申請日: 2013-12-20
• 公開（公告）號: CN103725688A
• 公開（公告）日: 2014-04-16
• 發明（設計）人: 王艷;舒鼎銘;瞿浩;王劼;羅成龍;李寶紅
• 申請（專利權）人: 廣東智威農業科技股份有限公司;廣東省農業科學院動物科學研究所
• 主分類號: C12N15/12
• 分類號: C12N15/12;C12Q1/68
• 代理公司: 廣州新諾專利商標事務所有限公司 44100
• 代理人: 曹愛紅

1.雞新城疫病毒抗體水平相關的分子標記，其特征在于，所述分子標記包括分子標記一和分子標記二：

所述分子標記一為如SEQ?ID?NO：2所示序列中的第50位堿基處G/A堿基突變，

所述分子標記二為如SEQ?ID?NO：3所示序列中的第167位堿基處T/C堿基突變。

2.一種鑒別權利要求1所述的分子標記一的方法，其特征在于，包括以下步驟：以雞ROBO2基因的DNA序列為模板，選擇如下引物進行擴增及焦磷酸測序檢測：

RS-exon5-F：5'-AGGAGGAGGCCGTGGATTT-3'，其中該引物序列的5’末端標記有生物素，

RS-exon5-R：5'-TTGGCAGGTCTGCGTCAT-3'，

PS-exon5-SR：5'-CTTCTTCCAGCGGAC-3'；

若測序結果為TT基因型，則是發生突變的AA基因型；

若測序結果為CC基因型，則是沒有發生突變的GG野生型；

若測序結果為TC基因型，則是AG雜合型。

3.一種鑒別權利要求1所述的分子標記二的方法，其特征在于，包括以下步驟：以雞ROBO2基因的DNA序列為模板，選擇如下引物擴增：

RS-exon12-F：5'-TTTACTTCCTTGTTTTCTTG-3'，

RS-exon12-R：5'-ACCTTCAGTTTCTTTCTTTC-3'；

將所得擴增產物用限制性內切酶AluI酶切，

若只有一條帶，則該突變位點處均為C堿基；

若有二條帶，則突變位點處均為T堿基；

若有三條帶，則說明該突變位點處一條鏈為C堿基，另一條鏈為T堿基。

4.權利要求1所述的分子標記在雞新城疫病毒抗體水平性狀方面的分子標記輔助選擇中的應用。

5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，所述應用為在雞新城疫病毒抗體水平選擇育種中的應用。