[發(fā)明專利]一種紅麻雄性不育細(xì)胞質(zhì)的分子鑒定方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310710653.4
• 申請(qǐng)日: 2013-12-19
• 公開（公告）號(hào): CN103667495A
• 公開（公告）日: 2014-03-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 趙艷紅;廖小芳;陳鵬;周瑞陽;周瓊;周步進(jìn)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣西大學(xué)
• 主分類號(hào): C12Q1/68
• 分類號(hào): C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 北京路浩知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君

1.一種紅麻雄性不育細(xì)胞質(zhì)的分子鑒定方法，其特征在于，具體步驟如下：

用ALP分子標(biāo)記技術(shù)的特異性引物進(jìn)行PCR反應(yīng)，擴(kuò)增待測(cè)紅麻樣本的線粒體DNA，能擴(kuò)增出與細(xì)胞質(zhì)雄性不育系具有相同特異性條帶的即為含紅麻雄性不育細(xì)胞質(zhì)的材料；

所述特異性引物為atp6BQ引物對(duì)：

正向引物5’-TATGTTTGTAAATATCACGTCTGCG-3’（如SEQID?No.3所示）

反向引物5’-TTAGCAGCATAAACAAAGATGGATT-3’（如SEQID?No.4所示）。

2.如權(quán)利要求1所述的紅麻雄性不育細(xì)胞質(zhì)的分子鑒定方法，其特征在于，其PCR反應(yīng)體系如下：

反應(yīng)體系用雙蒸水補(bǔ)足到總體積20μl。

3.如權(quán)利要求1所述的紅麻雄性不育細(xì)胞質(zhì)的分子鑒定方法，其特征在于，PCR反應(yīng)條件為：95℃預(yù)變性3min；94℃40s，58℃40s，72℃40s，擴(kuò)增35個(gè)循環(huán)，72℃延伸10min。

4.用于權(quán)利要求1所述紅麻雄性不育細(xì)胞質(zhì)分子鑒定方法的atp6BQ引物對(duì)，其特征在于，其為：

正向引物5’-TATGTTTGTAAATATCACGTCTGCG-3’（如SEQID?No.3所示）

反向引物5’-TTAGCAGCATAAACAAAGATGGATT-3’（如SEQID?No.4所示）。

5.用于權(quán)利要求1所述紅麻雄性不育細(xì)胞質(zhì)分子鑒定方法的分子標(biāo)記MM509，其為用如SEQ?ID?No.3和SEQ?ID?No.4所示的引物擴(kuò)增出長度為509bp的特異性條帶。

6.如權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的紅麻雄性不育細(xì)胞質(zhì)分子鑒定方法在紅麻細(xì)胞質(zhì)雄性不育系選育中的應(yīng)用。

7.如權(quán)利要求4所述的引物在鑒定紅麻細(xì)胞質(zhì)雄性不育系中的應(yīng)用。

8.如權(quán)利要求5所述的分子標(biāo)記在鑒定紅麻細(xì)胞質(zhì)雄性不育系中的應(yīng)用。