[發明專利]糖胺聚糖的分離和鑒定

有效

• 申請號: 201310690150.5
• 申請日: 2009-02-19
• 公開（公告）號: CN103739743B
• 公開（公告）日: 2018-08-03
• 發明（設計）人: 西蒙·麥肯齊·庫爾;維克托·努爾科姆比;克里斯蒂安·多姆布勞斯基
• 申請（專利權）人: 新加坡科技研究局
• 主分類號: C08B37/10
• 分類號: C08B37/10;C12Q1/02
• 代理公司: 北京康信知識產權代理有限責任公司 11240
• 代理人: 余剛;張英

1.一種分離能夠結合至具有肝素結合域的蛋白質的硫酸乙酰肝素的方法，所述方法包括：

(i)提供具有附著至支持物的肽分子的固體支持物，其中所述肽分子由肝素結合域組成；

(ii)將所述肽分子與富含硫酸乙酰肝素的糖胺聚糖混合物接觸，以使容許形成肽-硫酸乙酰肝素復合物；

(iii)將肽-硫酸乙酰肝素復合物從其余混合物分離出來；

(iv)從所述肽-硫酸乙酰肝素復合物解離硫酸乙酰肝素；

(v)收集解離的所述硫酸乙酰肝素。

2.一種鑒定能夠刺激或抑制細胞或組織的生長或分化的硫酸乙酰肝素的方法，所述方法包括：

(i)提供一種具有附著至支持物的肽分子的固體支持物，其中所述肽分子由肝素結合域組成；

(ii)將所述肽分子與富含硫酸乙酰肝素的糖胺聚糖混合物接觸，以使容許形成肽-硫酸乙酰肝素復合物；

(iii)將肽-硫酸乙酰肝素復合物從其余混合物分離出來；

(iv)從所述肽-硫酸乙酰肝素復合物解離硫酸乙酰肝素；

(v)收集解離的所述硫酸乙酰肝素；

(vi)將收集的所述硫酸乙酰肝素加入其中存在含所述肝素結合域的氨基酸序列的蛋白質的細胞或組織中；

(vii)測定以下一種或多種：細胞增殖、細胞分化、一種或多種蛋白質標記的表達。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其中所述方法包括通過改變所述固體支持物的表面上存在的鹽濃度，選擇出對所述肝素結合域具有最高親合性和/或特異性的硫酸乙酰肝素。

4.根據權利要求1或2所述的方法，其中所述方法包括獲得對所述肽的結合親和性小于1μM的硫酸乙酰肝素。

5.根據權利要求1或2所述的方法，其中所述方法進一步包括將收集的所述硫酸乙酰肝素進行進一步分析以便確定所述硫酸乙酰肝素的結構特性。

6.根據權利要求1或2所述的方法，其中所述肽-硫酸乙酰肝素復合物與裂解酶接觸。