[發明專利]一種體外擴增γδT細胞的方法

在審

• 申請號: 201310684682.8
• 申請日: 2013-12-13
• 公開（公告）號: CN103756962A
• 公開（公告）日: 2014-04-30
• 發明（設計）人: 解尚云;葉永清;譚令兵
• 申請（專利權）人: 上海柯萊遜生物技術有限公司
• 主分類號: C12N5/0783
• 分類號: C12N5/0783
• 代理公司: 上海三方專利事務所 31127
• 代理人: 吳干權;錢品興

1.一種體外擴增γδT細胞的方法，

用抗TCRγδ抗體和CD28McAb預先包被T75培養瓶以備用；

其特征在于該方法由以下步驟組成：

將外周血單個核細胞轉入包被的T75培養瓶中，加入含有濃度為1.00μg/ml～3.87μg/ml的唑來膦酸、10μg/ml～50μg/ml的HSP70、0.1μg/ml～10μg/ml的TLR7配體、0.1μg/ml～5.0μg/ml的左旋咪唑、10ng/ml的IL-7、50ng/ml的IL-15和1000IU/ml的IL-2的無血清培養基，放入二氧化碳培養箱培養12～16天后獲得大量較高純度的γδT細胞。

2.如權利要求1所述的體外擴增γδT細胞的方法，其特征在于所述唑來膦酸在無血清培養基中的濃度為1.29μg/ml。

3.如權利要求1所述的體外擴增γδT細胞的方法，其特征在于所述HSP70在無血清培養基中的濃度為20μg/ml。

4.如權利要求1所述的體外擴增γδT細胞的方法，其特征在于所述TLR7配體的濃度為1.0μg/ml。

5.如權利要求1所述的體外擴增γδT細胞的方法，其特征在于所述LMS的濃度為0.5μg/ml。