[發明專利]一種艾葉的乙酸乙酯提取物及其制備、檢測方法和用途

無效

• 申請號: 201310680696.2
• 申請日: 2013-12-12
• 公開（公告）號: CN103705559A
• 公開（公告）日: 2014-04-09
• 發明（設計）人: 陳士林;黃林芳;任偉光;林森森;徐宏喜;楊大堅;卞兆祥;陳新滋
• 申請（專利權）人: 中國醫學科學院藥用植物研究所;香港浸會大學
• 主分類號: A61K36/282
• 分類號: A61K36/282;A61K36/9066;G01N30/02;A61P35/00
• 代理公司: 上海三方專利事務所 31127
• 代理人: 吳干權

[技術領域]

本發明涉及艾葉提取物、方法和應用，具體涉及一種艾葉的乙酸乙酯提取物及其制備、檢測方法和用途。

[背景技術]

艾葉為菊科植物艾Artemisia?argyi?Lévl.et?Vant.的干燥葉。具有溫經止血，散寒止痛的功效，臨床用于吐血、衄血、少腹冷痛、經寒不調、宮冷不孕、外用治皮膚瘙癢。主要含揮發油、黃酮類、三萜類、鞣質等成分。具有止血、抗菌抗病毒、抗腫瘤、清除自由基、鎮痛等多種生理活性。

國內發明200810052604.5公開了用乙酸乙酯和乙醇混合物作為溶劑對艾葉進行提取；提取液經過色譜柱層析得洗脫液用制備液相色譜梯度洗脫得到的洗脫液，流動相為水和乙腈，收集40.0分鐘洗脫液得到有效組分。

國內發明201110131147.0公開了從艾葉中提取倍半萜內酯類化合物Chloroklotzchin的提取方法，首先用乙醇提取，經大孔吸附樹脂、聚酰胺樹脂和硅膠柱層析分離。最后利用乙醇重結晶，得到了高純度的化合物。

國內發明201210117611.5公開了一種艾葉提取物，將艾葉用乙酸乙酯浸泡，然后回流，回流結束后固液分離，所得液體濃縮后，經干燥即得。用于制備抗乙肝病毒藥物。

本方法較200810052604.5及201110131147.0制備時間短、方法操作簡單。其主要抗腫瘤成分為黃酮類和甾醇類，200810052604.5及201110131147.0抗腫瘤成分為揮發油類成分。201210117611.5為抗乙肝病毒藥物，此發明只做顏色反應并未確定其具體成分。

[發明內容]

為了提取一種能夠治療腫瘤的艾葉有效成分，本發明提供了一種艾葉的乙酸乙酯提取物及其制備、檢測方法和用途。

為實現上述目的，設計一種艾葉的乙酸乙酯提取方法，包括以下步驟：

a.艾葉用石油醚浸泡18～36h，每100g艾葉需要300～800ml的石油醚，然后滲濾回收殘渣；

b.所述的殘渣用70～90%的乙醇提取濃縮，濃縮后的濃縮液相對于于乙醇的密度為1.15～1.20，

c.將所述的濃縮液用乙酸乙酯進行萃取，收集乙酸乙酯層的萃取液。

上述提取方法還具有如下優化的方案：

所述的步驟（b）中，乙醇提取的次數為2次，每次提取時間為2小時，合并2次提取液進行所述的濃縮。

所述的步驟（b）中，乙醇的濃度為80%。

步驟（a）中，所述的艾葉先經過粉碎，粉碎后的粒徑為250～850μm。

步驟（a）中，所述的浸泡，需要的時間為24h。

一種用上述方法提取得到的艾葉乙酸乙酯提取物，主要成分為黃酮類和甾醇類。具體為芹菜素、棕矢車菊素、木犀草素、異澤蘭黃素、β-谷甾醇和槲皮素。

一種藥物制劑，由上述的姜黃的乙酸乙酯提取物和藥學上可接受的載體組成。

所述的制劑為片劑、散劑、片劑、膠囊或口服液。

一種檢測上述艾葉的乙酸乙酯提取物的方法，用超高效液相色譜-電噴霧串聯質儀對所述艾葉提取物進行分析，以獲得艾葉乙酸乙酯提取物的UPLC-Q-TOF-MS圖譜，

a.質譜條件為：ESI離子源，正離子模式檢測；霧化器N2壓力為50psi；干燥氣N2流速為15L/min；質量掃描范圍50～1200；自動3級質譜；

b.色譜分析條件為：色譜柱：Waters?ACQUITY?UPLC^TM?BEH?C18Column(50mm×2.1mm.i?d.,1.7μm)；二元梯度洗脫，A相為0.1%甲酸水溶液；B相為乙腈，流速為0.3mL/min，梯度洗脫的程序如下：90%A相，逐漸減少A相比例，至14min時A相比例為0，保持2min，流速：0.3mL/min；進樣量3μL。

本發明首次提供了艾葉提取物在制備腫瘤的藥物中的應用，并且提供了應用超高效液相色譜-質譜聯機分析技術及結果構建艾葉提取物指紋圖譜的方法。該方法包括艾葉提取物的UPLC-MS分析條件。色譜峰的特征、色譜組分的質譜提供的化合物結果信息等。本發明公開的指紋圖譜及其技術可用于艾葉的品種鑒別及艾葉提取物的質量監控。

[附圖說明]

圖1為艾葉UPLC-Q-TOF/MS正離子模式下總離子流圖。

[具體實施方式]