[發明專利]一種總黃酮和綠原酸含量的同時檢測方法

有效

• 申請號: 201310672040.6
• 申請日: 2013-12-11
• 公開（公告）號: CN103645149A
• 公開（公告）日: 2014-03-19
• 發明（設計）人: 朱康玲;陳晶;王定官;田乾位;葛志鵬;于飛
• 申請（專利權）人: 華中科技大學
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31;G01N21/33
• 代理公司: 華中科技大學專利中心 42201
• 代理人: 曹葆青

1.一種總黃酮和綠原酸含量的同時檢測方法，該方法包括下述步驟：

第1步采用與制作標準曲線相同的方式對待測樣品進行氯化鈷顯色處理；

第2步測定經氯化鈷顯色反應后的待測樣品溶液分別在256nm、330nm波長處的吸光度I₂₅₆、I₃₃₀；

第3步計算樣品溶液中綠原酸在330nm波長處已扣除黃酮干擾的吸光度以及黃酮在256nm波長處已扣除綠原酸干擾的吸光度即：

I330L=AA-BI330-A×BA-BI256,I256R=AA-BI256-1A-BI330]]>

其中，A為同一濃度的標準溶液在256nm和330nm波長處綠原酸吸光度的比值關系，B為同一濃度的標準溶液在256nm和330nm波長處蘆丁吸光度的比值關系；

第4步利用綠原酸和蘆丁對照品的標準曲線，分別計算得到綠原酸和黃酮的含量。

2.根據權利要求1所述的總黃酮和綠原酸含量的同時檢測方法，其特征在于，該方法用于金銀花及其提取液，綠原酸固體產品，或者其它類似植物草藥中的黃酮與綠原酸含量的測定。

3.根據權利要求1所述的總黃酮和綠原酸含量的同時檢測方法，其特征在于，制作綠原酸標準曲線和蘆丁的標準曲線的過程為：

綠原酸標準曲線：精密稱取一定量的綠原酸對照品，用蒸餾水溶解并定容，即得到綠原酸對照品溶液；分別精確量取一定量綠原酸對照品溶液和氯化鈷溶液，置于容量瓶中，用乙醇溶液定容至刻度，即得到一組不同濃度的綠原酸標準溶液；另外以相同體積的氯化鈷溶液經乙醇溶液定容的溶液為空白，依次取上述綠原酸標準溶液，分別測定綠原酸不同濃度的溶液在256nm波長和330nm波長處的吸光度；由所得數值確定在同一濃度的溶液中綠原酸在256nm波長和330nm波長處吸光度的比值關系為在330nm波長處，以溶液濃度(C_L)為橫坐標，吸光度為縱坐標，繪制綠原酸標準曲線；

蘆丁標準曲線：精密稱取一定量的蘆丁對照品，用蒸餾水溶解并定容，即得到蘆丁對照品溶液；分別精確量取一定量蘆丁對照品溶液和氯化鈷溶液，置于容量瓶中，用乙醇溶液定容至刻度，即得到一組不同濃度的蘆丁標準溶液；以相同體積的氯化鈷溶液經乙醇溶液定容后的溶液為空白，依次取上述蘆丁標準溶液，分別測定蘆丁不同濃度的溶液在256nm波長和330nm波長處的吸光度；由所得數值確定在同一濃度的溶液中蘆丁在256nm波長和330nm波長處吸光度的比值關系為在256nm波長處，以溶液濃度C_R為橫坐標，吸光度為縱坐標，繪制蘆丁的標準曲線。

4.根據權利要求1所述的總黃酮和綠原酸含量的同時檢測方法，其特征在于，所述采用的顯色體系是濃度為0.05～0.25mol/L的氯化鈷水溶液。

5.根據權利要求1所述的總黃酮和綠原酸含量的同時檢測方法，其特征在于，A＝3.008，B＝0.812。