[發(fā)明專利]一株淡紫擬青霉及其培養(yǎng)方法和在作物病蟲防治上的應(yīng)用有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201310669589.X | 申請(qǐng)日: | 2013-12-12 |
| 公開(公告)號(hào): | CN104212722A | 公開(公告)日: | 2014-12-17 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 謝明;張艷軍;張召榮 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 謝明 |
| 主分類號(hào): | C12N1/14 | 分類號(hào): | C12N1/14;A01N63/04;A01P7/04;A01P5/00;C12R1/79 |
| 代理公司: | 暫無(wú)信息 | 代理人: | 暫無(wú)信息 |
| 地址: | 100081 北京市中關(guān)村南大*** | 國(guó)省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 淡紫 青霉 及其 培養(yǎng) 方法 作物 病蟲 防治 應(yīng)用 | ||
1.一種淡紫擬青霉,其特征為淡紫擬青霉(Paecilomyces?lilacinus)CPLI0708,保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心,保藏號(hào)為CGMCC?No.8450。
2.權(quán)利要求1所述的一種淡紫擬青霉菌株,其特征在于:所述淡紫擬青霉菌株屬絲孢目、擬青霉屬:在PDA平板上菌落呈白色,產(chǎn)孢后逐漸變成淺粉紅色,培養(yǎng)7d后,菌落呈紫紅色、圓形、隆起、粉狀,表面沒有分泌物;淡紫擬青霉的分生孢子梗末端膨大;分生孢子為單細(xì)胞,橢圓形至紡錘形,呈鏈狀、平滑、無(wú)色至黃色,2.5μm~4μm寬,孢梗上具有瓶頸狀不規(guī)則的分枝或輪生分枝,瓶梗基部較寬;淡紫擬青霉(P.lilacinus)CPLI0708菌株生長(zhǎng)溫度范圍可以從12℃~36℃,生長(zhǎng)和產(chǎn)孢的最適溫度范圍是25℃~28℃,10℃和40℃時(shí)停止生長(zhǎng),36℃時(shí)停止產(chǎn)孢;該菌株在不同培養(yǎng)基上生長(zhǎng)和產(chǎn)孢差異較大,菌株7天在葡萄糖培養(yǎng)基上菌落直徑為1.845cm,麥芽糖培養(yǎng)基上為2.643cm,蔗糖培養(yǎng)基上為1.796cm,可溶性淀粉培養(yǎng)基上為1.982cm,乳糖培養(yǎng)基上為1.945cm,甘油培養(yǎng)基上為1.935cm;菌株13天在葡萄糖培養(yǎng)基上產(chǎn)孢量為3.264×109個(gè)孢子/ml,麥芽糖上為20.88×109個(gè)孢子/ml,蔗糖上為1.968×109個(gè)孢子/ml,可溶性淀粉上為5.088×109個(gè)孢子/ml,乳糖上為3.984×109個(gè)孢子/ml,甘油上為2.64×109個(gè)孢子/ml;菌株培養(yǎng)7天,在硝酸鉀培養(yǎng)基上的菌落直徑為2.072cm,在硫酸銨培養(yǎng)基上的菌落直徑為1.916cm,在蛋白胨培養(yǎng)基上的菌落直徑為2.431cm,在酵母浸粉培養(yǎng)基上的菌落直徑為2.621cm,在脲培養(yǎng)基上的菌落直徑為2.212cm,在硝酸鈉培養(yǎng)基上的菌落直徑為1.712cm;菌株培養(yǎng)13天,在硝酸鉀培養(yǎng)基上產(chǎn)孢為18.72×108個(gè)孢子/ml,在硫酸銨培養(yǎng)基上產(chǎn)孢為7.2×108個(gè)孢子/ml,在蛋白胨培養(yǎng)基上產(chǎn)孢為31.2×108個(gè)孢子/ml,在酵母浸粉培養(yǎng)基上產(chǎn)孢為11.04×108個(gè)孢子/ml,在脲培養(yǎng)基上產(chǎn)孢為19.68×108個(gè)孢子/ml,在硝酸鈉培養(yǎng)基上產(chǎn)孢為10.08×108個(gè)孢子/ml;菌株在改良的PDA培養(yǎng)基上,15℃下的菌落生長(zhǎng)直徑為0.632cm,19℃下的菌落生長(zhǎng)直徑為1.077cm,23℃下的菌落生長(zhǎng)直徑為1.389cm,27℃下的菌落生長(zhǎng)直徑為1.4cm,29℃下的菌落生長(zhǎng)直徑為2.202cm,31℃下的菌落生長(zhǎng)直徑為1.932cm;菌株在在改良的PDA培養(yǎng)基上,15℃下的產(chǎn)孢為11.79×106個(gè)孢子/ml,19℃下的產(chǎn)孢為8.73×106個(gè)孢子/ml,23℃下的產(chǎn)孢為56.16×106個(gè)孢子/ml,27℃下的產(chǎn)孢為35.46×106個(gè)孢子/ml,29℃下的產(chǎn)孢為116.888×106個(gè)孢子/ml,31℃下的產(chǎn)孢為107.46×106個(gè)孢子/ml。
3.權(quán)利要求1所述的一種淡紫擬青霉的培養(yǎng)方法,其步驟是:
A、淡紫擬青霉(P.lilacinus)CPLI0708的活化:將淡紫擬青霉(P.lilacinus)CPLI0708菌株劃線培養(yǎng)于PDA斜面上,于25℃條件下培養(yǎng)6d~8d;
B、淡紫擬青霉(P.lilacinus)CPLI0708的液體發(fā)酵培養(yǎng):將5ml無(wú)菌水倒入活化的淡紫擬青霉(P.lilacinus)CPLI0708菌株斜面上,用旋渦震蕩器將真菌孢子洗下獲得孢子懸浮液,將孢子懸浮液接種到裝有200ml液體培養(yǎng)基(葡萄糖25g,酵母浸粉20g,蒸餾水1000ml)的500ml三角瓶中,于180rmp/min,25℃條件下振蕩培養(yǎng)2d~3d;
C、淡紫擬青霉(P.lilacinus)CPLI0708的固體發(fā)酵培養(yǎng):將載體、營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)和水按體積比6:1:1混合均勻制的固體發(fā)酵培養(yǎng)基,按每袋200ml裝入聚乙烯保鮮袋,121℃滅菌0.5h~1h,冷卻后,將步驟2的淡紫擬青霉(P.lilacinus)CPLI0708液體發(fā)酵菌液按5%~10%的體積比接種到固體發(fā)酵培養(yǎng)基中,再次攪拌均勻,26℃~28℃培養(yǎng)6d~10d。
4.權(quán)利要求1所述的一種淡紫擬青霉菌株在防治保護(hù)地害蟲(蚜蟲、粉虱等)和大豆孢囊線蟲中的應(yīng)用。
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