[發(fā)明專利]豬支原體肺炎疫苗株的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310605986.0
• 申請日: 2013-11-25
• 公開（公告）號: CN103585622A
• 公開（公告）日: 2014-02-19
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉茂軍;邵國青;熊祺琰;馮志新;甘源;韋艷娜;白方方;吳敘蘇;王占偉;白昀;王海燕;王麗;劉冬霞;馬慶紅
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院
• 主分類號: A61K39/02
• 分類號: A61K39/02;A61K39/39;A61P31/04
• 代理公司: 南京蘇高專利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙) 32204
• 代理人: 肖明芳

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種豬支原體肺炎疫苗株的應(yīng)用，屬于獸用生物制品領(lǐng)域。

技術(shù)背景

豬肺炎支原體（Mycoplasma?hyopneumoniae，Mhp）是引起豬支原體肺炎（Mycoplasmal?pneumoniae?of?swine，Mps又稱豬氣喘病）的主要病原，也是豬呼吸道疾病綜合癥的一種重要的原發(fā)性病原。Mhp主要感染豬呼吸道，本身致病力不強(qiáng)，臨床癥狀主要以咳嗽和氣喘為主，病變特征主要是肺的尖葉、心葉、中間葉和隔葉前緣呈“肉樣”或“蝦肉樣”實變。Mhp感染機(jī)體后主要與呼吸道內(nèi)壁的纖毛黏附，引起纖毛細(xì)胞病變和凋亡，導(dǎo)致纖毛斷裂和脫落，引起機(jī)體發(fā)病，并且會嚴(yán)重影響豬的生長發(fā)育和飼料轉(zhuǎn)化率，或者破壞粘膜-纖毛屏障，容易繼發(fā)其他致病菌的感染（特別是對青年豬），提高致死率，因而給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。目前豬支原體肺炎的主要防治措施是疫苗和藥物，但有效的藥物較缺乏，因此，進(jìn)行該病的疫苗研制將為本病的預(yù)防和控制具有重要的意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供豬支原體肺炎疫苗株的應(yīng)用，該疫苗株對豬有一定的致病性且具有良好的免疫原性。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：

一種豬支原體肺炎疫苗株在制備治療豬支原體肺炎藥物中的應(yīng)用；

其中，所述的豬支原體肺炎疫苗株，其分類命名為豬肺炎支原體（Mycoplasma?hyopneumoniae），菌株號為NJ，已保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，地址：中國.武漢.武漢大學(xué)，郵編430072，保藏編號：CCTCC?NO:M2012286，保藏日期：2012年7月16日。該菌株是發(fā)明人于2004年8月于南京某豬場自行采集篩選鑒定獲得一株豬支原體肺炎疫苗株。

其中，所述的藥物為疫苗。

其中，所述疫苗每頭份1～2ml包含如下組分：

其中，所述的免疫佐劑為注射用白油、ISA206VG（SEPPIC）、ISA201VG（SEPPIC）、Gel01ST（SEPPIC）或ISA11R?VG（SEPPIC）等。

其中，所述疫苗按如下步驟制備得到：

1）生產(chǎn)菌種的制備：取凍干豬支原體肺炎疫苗株CCTCC?NO:M2012286，用液體培養(yǎng)基稀釋后培養(yǎng)3～10日，純粹檢驗合格后，作為一級種子。在37℃下培養(yǎng)3～7日后pH值降為6.6～7.0收獲，經(jīng)純粹檢驗合格后，作為二級種子。

2）制苗用菌液的制備：將豬支原體肺炎疫苗株二級種子液接種于液體培養(yǎng)基中并培養(yǎng)3～10日，再以同樣的方式擴(kuò)大培養(yǎng)，一直到制苗所需的量，且保證繼代次不超過6代；

3）滅活及配苗：將步驟2）得到的制苗用菌液，加入配方量的硫柳汞，37℃滅活；加入配方量的無菌PBS緩沖液和免疫佐劑，混合乳化即得豬支原體肺炎滅活疫苗。

其中，所述的液體培養(yǎng)基配方為：Eagles氏液1000mL，水解乳蛋白10.0g，豬血清200～400mL，鮮酵母浸出汁10～20mL，磷酸鹽緩沖液600mL，青霉素200～1000萬單位，0.4%酚紅3.5mL，用10g/L?NaOH調(diào)pH值為7.4～7.6。

有益效果：本發(fā)明具有下列突出的優(yōu)點：

1）菌株免疫原性好：本發(fā)明的豬支原體肺炎疫苗株為地方分離菌株經(jīng)傳代篩選鑒定后獲得具有培養(yǎng)滴度高且免疫原性好的菌株，保證了疫苗的特異性和免疫效力。

2）疫苗生產(chǎn)簡便：本發(fā)明的豬支原體肺炎疫苗株為經(jīng)過培育的地方分離菌株，具有高滴度的培養(yǎng)特性，保證了制苗用抗原的高滴度，減少了濃縮步驟；本發(fā)明中應(yīng)用硫柳汞滅活，硫柳汞本身是一種防腐劑，用其來滅活兼顧了滅活和防腐，減少了用量，減少了對動物的不良反應(yīng)；本發(fā)明的滅活疫苗中使用的免疫佐劑成分簡單，制苗方法簡便，簡化了生產(chǎn)工藝，降低了生產(chǎn)污染的風(fēng)險。

3）疫苗安全高效：本發(fā)明的豬支原體肺炎疫苗株為經(jīng)培育的地方分離株，具有培養(yǎng)滴度高、免疫原性好的特點，使用的佐劑為經(jīng)過市場檢驗的成熟商品化佐劑，保證了疫苗的安全和高效。效力比較發(fā)現(xiàn)用該菌株制備的疫苗免疫保護(hù)效力顯著高于進(jìn)口疫苗。

總之，本發(fā)明的滅活疫苗生產(chǎn)簡便、疫苗安全高效，能較好的滿足目前豬場的迫切需要，易于大范圍推廣應(yīng)用，具有廣闊的市場前景和較大的經(jīng)濟(jì)、社會效益。

附圖說明

圖1豬支原體肺炎滅活疫苗（NJ株）制備流程圖。