[發明專利]液相色譜串聯質譜法測定香精香料中芝麻酚的方法

有效

• 申請號: 201310601418.3
• 申請日: 2013-11-22
• 公開（公告）號: CN103558328A
• 公開（公告）日: 2014-02-05
• 發明（設計）人: 鄧其馨;黃朝章;蘇明亮;劉江生;劉秀彩;黃惠貞;蔡國華;林艷;梁暉;謝衛;劉澤春
• 申請（專利權）人: 福建中煙工業有限責任公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所 11038
• 代理人: 蘇紅梅

技術領域

本發明屬于化學檢測技術領域，涉及芝麻酚的測定方法，具體地說是一種通過液相色譜-串聯質譜法快速測定香精香料中芝麻酚的方法。

背景技術

當今食品安全問題日益受到社會關注。煙用添加劑，尤其是香精香料的添加劑安全性問題也越來越受到關注。

芝麻酚，又名3,4-亞甲二氧基苯酚，具有非常強的抗氧化能力，是常用于食品、醫藥和香精香料領域的抗氧化劑。然而隨著科技的進步，芝麻酚的致癌活性逐步被認知，毒理學試驗發現，芝麻酚對動物腺胃有毒性，會引起腺胃刺瘤或癌變。2006年日本已將芝麻酚列為食品禁用添加劑。

目前，對芝麻酚的檢測方法主要有顯色法、紫外分光光度法、薄層色譜法(TLC)、氣質聯用法(GC-MS)及高效液相色譜法(HPLC)等。但這些方法均存在前處理步驟繁瑣，檢測時間較長等問題。例如，用氣質聯用法(GC-MS)存在檢測時間較長的問題，檢測一個樣品的時間要40分鐘以上，用高效液相色譜法(HPLC)靈敏度較差，檢出限（LOD）≥80ng/mL，且需要的樣品量較大（≥1g）。

近年來，隨著液相色譜串聯質譜法（LC-MS/MS）技術的發展，LC-MS/MS技術在化合物分析中得到廣泛的應用。液相色譜串聯質譜法（LC-MS/MS）分析技術無論在靈敏度上還是選擇性上都具有明顯的優勢，且分析時間較短。為了在工業生產中，對大量香精香料樣品的安全性指標進行有效的監控，急需一種能夠快速、簡單、靈敏、高效的液相色譜質譜方法檢測香精香料中的芝麻酚。

發明內容

本發明的目的在于提供一種煙用香精香料中芝麻酚含量的測定方法，以實現對煙用香精香料中芝麻酚含量的快速、準確測定。

本發明的目的是通過以下技術方案來實現的：

一種香精香料中芝麻酚的檢測方法，該方法采用液相色譜串聯質譜法測定，采用外標法定量。

在一個優選的實施方案中，發明所述的香精香料中芝麻酚的檢測方法包括以下步驟：

（1）標準溶液的配制；稱取芝麻酚標準品，用甲醇配制成具有濃度梯度的芝麻酚標準工作溶液；

（2）樣品溶液的制備：使用甲醇萃取樣品，然后過濾后制備樣品溶液；

（3）液相色譜-串聯質譜分析：利用液相色譜-串聯質譜儀分別對標準溶液和樣品溶液進行檢測分析；

（4）煙用香精香料中芝麻酚含量的計算。

在一個優選的實施方案中，發明所述的香精香料中芝麻酚的檢測方法，其中所述的香精香料為煙用香精香料，優選地，所述的香精香料樣品使用甲醇萃取樣品中的芝麻酚；優選地，萃取用的甲醇為濃度為8～12％（v/v）甲醇水溶液，更優選地，萃取用的甲醇為濃度為10％（v/v）甲醇水溶液。

在一個優選的實施方案中，發明所述的香精香料中芝麻酚的檢測方法，其中萃取的方式為超聲萃取。

在一個優選的實施方案中，發明所述的香精香料中芝麻酚的檢測方法，其中所述的香精香料樣品的制備過程如下：稱取適量待測香精香料樣品，加入適量甲醇水溶液,室溫下超聲萃取,過濾后，得到樣品溶液。優選的過濾方式采用微孔濾膜過濾，例如0.22μm有機濾膜或0.45μm有機濾膜。

在一個具體的實施方案中，所述香精香料樣品的制備方法具體為：稱取0.1g左右試樣,置于25mL錐形瓶中;加入10%甲醇水溶液10mL,室溫下超聲30min,用0.22μm有機濾膜過濾后直接進樣。

在一個優選的實施方案中，發明所述的香精香料中芝麻酚的檢測方法，其中色譜分析條件為以下（i）至（v）中的一項或多項：

（i）采用C18色譜柱，

優選地，所述的色譜柱的規格為50mm×2.1mm?i.d.,2.6μm粒徑。

（ii）色譜柱溫度為28～32℃，優選為30℃，

（iii）進樣量為8～12μL，優選為10μL，

（iv）流動相：乙腈-乙酸銨-乙酸-水溶液，

優選的流動相：A為乙腈，B為5mmoL/L乙酸銨溶液(含0.1%乙酸)，采用等度洗脫程序，體積比50：50，

（v）流速為0.1～0.3ml/min，優選為0.2ml/min，

（vi）洗脫時間約6min。

在一個優選的實施方案中，發明所述的香精香料中芝麻酚的檢測方法，其中質譜分析條件為以下（i）至（iii）中的一項或多項：

（i）用電噴霧離子阱串聯質譜測定芝麻酚，

（ii）離子源：電噴霧電離源（ESI）；