[發(fā)明專利]L-噻唑烷基-4-羧酸的分析檢測方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310576533.X
• 申請日: 2013-11-18
• 公開（公告）號: CN104655736A
• 公開（公告）日: 2015-05-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 趙志全;李洪偉;魏石磊
• 申請（專利權(quán)）人: 山東新時(shí)代藥業(yè)有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 無
• 代理人: 無

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種高效液相色譜分析方法，尤其是L-噻唑烷基-4-羧酸的分析檢測方法。

背景技術(shù)

匹多莫德是由意大利Poli化學(xué)工業(yè)公司開發(fā)的免疫功能促進(jìn)劑，既能促進(jìn)非特異性免疫反應(yīng)，又能促進(jìn)特異性免疫反應(yīng)；主要用于預(yù)防和治療兒童反復(fù)性呼吸道感染、泌尿系統(tǒng)感染、過敏性鼻炎和哮喘，還可用于多種病毒感染、惡性腫瘤和其它慢性疾病造成的有機(jī)體免疫功能低下。

L-噻唑烷基-4-羧酸是合成匹多莫德的重要中間體，其化學(xué)式為C₆H₁₂ClNO₂S，結(jié)構(gòu)式如下：

到目前為止，文獻(xiàn)中尚未記載L-噻唑烷基-4-羧酸的分析檢測方法，但L-噻唑烷基-4-羧酸的分析檢測對反應(yīng)控制和收率提高有著重要的作用，同時(shí)也直接影響著終產(chǎn)品匹多莫德的質(zhì)量，所以建立一種穩(wěn)定有效的分析檢測方法對L-噻唑烷基-4-羧酸進(jìn)行質(zhì)量控制是非常必要的。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種L-噻唑烷基-4-羧酸的高效液相色譜分析檢測方法，用于L-噻唑烷基-4-羧酸的質(zhì)量控制。

為解決上述技術(shù)問題，發(fā)明人通過大量試驗(yàn)，最終獲得如下技術(shù)方案：

L-噻唑烷基-4-羧酸的分析檢測方法，是以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料的色譜柱（C18，4.6×250mm，3μm），以緩沖鹽溶液與甲醇、異丙醇組成的三元溶液體系為流動相，以檢測波長為210nm，柱溫為25℃，進(jìn)行高效液相色譜法分析檢測。

所述流動相中緩沖鹽溶液用氨試液調(diào)pH值為6～7，緩沖鹽選自磷酸二氫銨或醋酸銨，優(yōu)選為磷酸二氫銨。

所述流動相中緩沖鹽溶液：甲醇：異丙醇的體積比為85～97:14～2:1。

本發(fā)明所述的分析檢測方法，可通過以下步驟實(shí)現(xiàn)：

A、取L-噻唑烷基-4-羧酸樣品適量，用流動相溶解，配制成每1mL含L-噻唑烷基-4-羧酸0.5mg的樣品溶液；

B、設(shè)置流動相流速為0.5～1.0mL/min，檢測波長210nm，柱溫為25℃；

C、取A的樣品溶液20μL注入液相色譜儀，完成L-噻唑烷基-4-羧酸的分析檢測；

其中：

高效液相色譜儀：Agilent1100液相色譜系統(tǒng)；

色譜柱：月旭XB-C18（4.6×250mm，3μm）；

流動相：0.02mol/L的pH值為6.75的磷酸二氫銨溶液：甲醇：異丙醇的體積比為97:2:1；

檢測波長：210nm；

柱溫：25℃；

流速：0.8mL/min。

本發(fā)明涉及的分析檢測方法，可以有效的將L-噻唑烷基-4-羧酸及其雜質(zhì)分開，而且該方法分離度高，分析時(shí)間短（約20min），操作簡單，結(jié)果穩(wěn)定可靠，從而可用于L-噻唑烷基-4-羧酸的質(zhì)量控制，為最終成品的質(zhì)量提供有效保障。

附圖說明

圖1實(shí)施例1的L-噻唑烷基-4-羧酸HPLC圖譜。

圖2實(shí)施例2的L-噻唑烷基-4-羧酸HPLC圖譜。

圖3實(shí)施例3的L-噻唑烷基-4-羧酸HPLC圖譜。

圖4實(shí)施例5的L-噻唑烷基-4-羧酸HPLC圖譜。

具體實(shí)施方式

以下是本發(fā)明的具體實(shí)施例，對本發(fā)明的技術(shù)方案做進(jìn)一步作描述，但是本發(fā)明的保護(hù)范圍并不限于這些實(shí)施例。凡是不背離本發(fā)明構(gòu)思的改變或等同替代均包括在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。

實(shí)施例1

儀器與條件：Agilent1100液相色譜系統(tǒng)，色譜柱：月旭XB-C18（4.6×250mm，3μm），檢測波長210nm，柱溫25℃，流速0.8mL/min，0.02mol/L的pH值為6.75的磷酸二氫銨溶液：甲醇：異丙醇的體積比為97:2:1。

實(shí)驗(yàn)步驟：將L-噻唑烷基-4-羧酸用流動相溶解并定量稀釋制成每1mL中含L-噻唑烷基-4-羧酸0.5mg的溶液，作為供試品溶液，精密量取供試品溶液20μL注入液相色譜儀，按上述條件進(jìn)行高效液相色譜分析，記錄色譜圖，結(jié)果見附圖1。

附圖1表明，在該色譜條件下，L-噻唑烷基-4-羧酸峰和雜質(zhì)峰可以完全分離，L-噻唑烷基-4-羧酸峰的分離度為2.37，保留時(shí)間在5.104min。

實(shí)施例2