[發明專利]一種茉莉花粉離體萌發液體培養基及用于測定茉莉花粉活力的方法

有效

• 申請號: 201310565165.9
• 申請日: 2013-11-13
• 公開（公告）號: CN103571789A
• 公開（公告）日: 2014-02-12
• 發明（設計）人: 鄧衍明;葉曉青;梁麗建;賈新平
• 申請（專利權）人: 江蘇省農業科學院
• 主分類號: C12N5/04
• 分類號: C12N5/04;C12Q1/02
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 張素卿

1.一種茉莉花粉離體萌發液體培養基，包括：以蒸餾水為溶劑，其成分含有H₃BO₃?100mg/L、KNO₃?100mg/L、MgSO₄·7H₂O?150mg/L、Ca(NO₃)₂·4H₂O?350mg/L、蔗糖80g/L以及PEG4000?120g/L，pH值為6.0。

2.權利要求1所述一種茉莉花粉離體萌發液體培養基用于測定茉莉花粉活力的方法，其特征在于：

1）花粉采集

選擇生長健壯、發育正常、無病蟲危害的木樨科素馨屬茉莉（Jasminum?sambac?Aiton）植株，盛花期于上午8:00?9:00選取含苞待放的花朵，連同一段長10～20cm枝條及葉片一同采下，置入盛有清水的三角瓶中，帶回實驗室后撥開花瓣，用鑷子取下花藥平攤于硫酸紙上，置35℃烘箱中1?2h，促花粉囊失水破裂散粉，將花粉收集起來待用；

2）花粉離體萌發

取權利要求1所述茉莉花粉離體萌發液體培養基，滴3?5滴在載玻片中間部位并攤薄，用毛筆蘸取茉莉花粉均勻撒在液體培養基表面，將載玻片置于底部墊有1層浸透水的濾紙的培養皿中，并在載玻片兩側各放置一個浸透水的脫脂棉球保濕，蓋上培養皿蓋子后放入恒溫培養箱內光照培養，培養溫度為25℃?30℃，光照強度為35?50?μmol·m^-2·s^-1；

3）花粉活力的測定

保持上述溫度、光照條件促使花粉管生長，離體培養3?4h后，將載玻片在顯微鏡下觀察，進行花粉萌發率統計和花粉管長度測量；以花粉管長度大于花粉直徑為花粉萌發標準，每處理重復3次以上，每重復隨機觀察3?5個視野，每視野觀察花粉數不少于40粒，統計花粉萌發率以反映有活力的花粉所占比例。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于：

所述步驟3）花粉活力的測定時，同時用顯微測微尺測量花粉管長度，每視野隨機測量10?20個花粉管，每處理共測量不少于100個花粉管，計算花粉管長度平均值，以反映花粉生理狀況的優劣。