[發明專利]一種羅非魚親子鑒定的方法

有效

• 申請號: 201310549480.2
• 申請日: 2013-11-07
• 公開（公告）號: CN103555847A
• 公開（公告）日: 2014-02-05
• 發明（設計）人: 李建林;俞菊華;唐永凱;李紅霞;徐跑
• 申請（專利權）人: 中國水產科學研究院淡水漁業研究中心
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 李紀昌

技術領域

本發明屬于魚類分子標記技術領域，涉及一種羅非魚親子鑒定的方法。

背景技術

羅非魚(Tilapia)原產于非洲，該魚上世紀50年代引入我國，得到了較快發展，現在我國已是世界上最大的羅非魚生產國和出口國。目前，家系選育是廣泛應用于水產育種中的一個方法。選一對親本配組繁殖，得到的后代就是一個家系，用這種方法構建多個家系，再通過養殖對比試驗，分析各家系的生長、性別比例、抗逆等性狀。由于羅非魚性腺發育不同步，一對一配組繁殖獲得家系成功率較低，因此常用多尾親本如1雄多雌或多雄1雌的方法來提高構建家系的成功率，這就需要對后代進行親子鑒定來確定它們的父本和母本。另外，在養殖對比試驗中，為減少環境的影響，常常將不同家系的魚放在同一池塘中養殖，這樣也需要進行親子鑒定來區別不同的家系。

發明內容

本發明的目的是提供一種羅非魚親子鑒定的方法，有助于快速、準確對羅非魚進行親子鑒定和家系區分。

為實現上述目的，本發明采用如下技術方案：

一種羅非魚親子鑒定的方法，包括以下步驟：

（1）采集待鑒別的羅非魚的血液、鰭條或其他組織樣品，采用DNA提取法提取基因組DNA；

（2）用步驟（1）獲得的基因組DNA為模板，選用9個微衛星引物進行PCR

擴增，這9對特異微衛星引物名稱和序列列表如下；

正向引物DNA序列(5'-3')反向引物DNA序列(5'-3')退火溫度GTTTTGCAGCACATCACCTGGCCACAGTGACTTGACCACA59℃AGCTGCTGGGTGCTCTGACTGCAACCTGCAGAGGAAAC59℃TGCTGGTTAAAAGAAAGAATGTTATGGGTGTTTAGTCTGGAA55℃TATAGAGGGGTGAGGGGAGATAGAATACAAGCGCCACACAT55℃TCGTGCAGCCAAACTTTCATCCGACGCAGCCGAGCAG55℃AAAGGCTGGCACTGGACTAAACTCGCCTATGATGGAA55℃CAGCTCGATAAAGGGAGACGGCTGCATTAGCATCGTGTGT55℃