[發(fā)明專利]一種制備高純度他克莫司的工藝

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310534184.5
• 申請(qǐng)日: 2013-10-31
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103554133A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-02-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 左成;曾琳洪;許日泉;彭熙琳;張?chǎng)?/a>;李英
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 國(guó)藥集團(tuán)川抗制藥有限公司
• 主分類號(hào): C07D498/18
• 分類號(hào): C07D498/18
• 代理公司: 北京三聚陽(yáng)光知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11250
• 代理人: 張韜

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種用高壓制備系統(tǒng)制備高純度的他克莫司的工藝。?

背景技術(shù)

他克莫司（Tacrolimus）也譯為他克雷姆，實(shí)驗(yàn)室命名為FK506，商品名為普樂(lè)可復(fù)，是從鏈霉菌屬（streptomyces?tsukubaensis）中分離出的發(fā)酵產(chǎn)物，其化學(xué)結(jié)構(gòu)屬23元大環(huán)內(nèi)酯類抗生素。為一種強(qiáng)力的新型免疫抑制劑，主要通過(guò)抑制白介素-2（L-2）的釋放，全面抑制T淋巴細(xì)胞的作用，較環(huán)孢素（CsA）強(qiáng)100倍。近年來(lái)，作為肝、腎移植的一線用藥，已在日本、美國(guó)等14個(gè)國(guó)家上市。臨床實(shí)驗(yàn)表明，其在心、肺、腸、骨髓等移植中作用應(yīng)用有很好的療效。同時(shí)FK506在治療特應(yīng)性皮炎（AD）、系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）、自身免疫性眼病等自身免疫性疾病中也發(fā)揮著積極的。?

目前，他克莫司主要是從發(fā)酵液中分離提取得到，如中國(guó)專利文獻(xiàn)CN101712686A中公開(kāi)的一種發(fā)酵液中他克莫司的分離純化方法，具體公開(kāi)了將鏈霉菌發(fā)酵液用板框壓濾得到菌體，用有機(jī)溶劑多次室溫浸提菌體，得到浸提液，將浸提液濃縮后進(jìn)行大孔樹脂和硅膠柱層析，柱層析所得他克莫司用混合溶劑進(jìn)行濃縮結(jié)晶，得到的他克莫司晶體純度達(dá)96.5%。由于在發(fā)酵過(guò)程中還產(chǎn)生了一些他克莫司異構(gòu)體和類似物，如二氫他克莫司和子囊霉素等，使得分離純化的他克莫司純度不高，滿足不了現(xiàn)有技術(shù)中對(duì)他克莫司純度的要求，因此在現(xiàn)有技術(shù)中為提高他克莫司晶體的純度，經(jīng)發(fā)酵分離純化后的他克莫司晶體還需要進(jìn)一步的進(jìn)行分離純化步驟。?

中國(guó)專利文獻(xiàn)CN101712685A公開(kāi)的一種他克莫司粗品精制方法，具體公開(kāi)了將經(jīng)發(fā)酵分離純化后獲得的他克莫司粗品加入有機(jī)溶劑中溶解，用C₁₈反相制備液相色譜法實(shí)現(xiàn)他克莫司和二氫他克莫司、子囊霉素的分離純化，最后獲得的他克莫司晶體經(jīng)HPLC檢測(cè)純度可達(dá)98.5%以上，提純純度大幅提高。但是，隨著醫(yī)藥領(lǐng)域產(chǎn)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的不斷提高，僅僅接近99%的純度已無(wú)法?滿足目前產(chǎn)業(yè)化要求，尤其是作為標(biāo)準(zhǔn)品的純度要求。然而，現(xiàn)有技術(shù)中還沒(méi)有更好的方法可以一次性僅僅通過(guò)制備步驟獲得99%以上甚至99.5%以上的他克莫司產(chǎn)品。而且，就目前分離純化工藝而言，不僅他克莫司的純度有待提高，同時(shí)該工藝的產(chǎn)品收率也并不理想。?

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是現(xiàn)有技術(shù)中的他克莫司的純度仍然存在的不足，進(jìn)而提供一種用高壓制備系統(tǒng)制備高純度他克莫司的工藝進(jìn)一步提高他克莫司的純度和收率。?

為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種用高壓制備系統(tǒng)制備高純度他克莫司的工藝，包括如下步驟：?

（1）取干燥的他克莫司粗品晶體1～2重量份加入7～9體積份的四氫呋喃中，加熱直至溶解，加水得到他克莫司濃度為45～55mg/ml的樣品溶液，精密過(guò)濾得到所需的進(jìn)樣溶液；?

（2）采用高壓液相色譜分離所述進(jìn)樣溶液的他克莫司，所述色譜條件為：?

色譜柱：C₁₈反相色譜柱，?

柱高為15～40cm，直徑為15～50cm；徑高比為1:0.8～1:4；?

流動(dòng)相組成體積比為四氫呋喃：乙腈：水：乙酸=3～5:0.5～1.5:6～8:0.01～0.05；?

運(yùn)行溫度為20℃～50℃；?

流速為1L/min～5L/min；?

檢測(cè)波長(zhǎng)為220nm；?

收集出峰時(shí)間為19～24min下的流出液，并合并HPLC檢測(cè)后單個(gè)雜質(zhì)含量低于0.1%部分的他克莫司流出液；?

（3）蒸發(fā)濃縮：將收集的所述流出液于60～70℃蒸發(fā)，析出他克莫司后過(guò)濾，將濾出的他克莫司加無(wú)水乙醇溶解，并精密過(guò)濾后濃縮至干品；?

（4）結(jié)晶：取濃縮后的他克莫司干品加入1～4體積份的無(wú)水乙醇中加?熱至溶解，滴加純水至微渾濁且靜置不澄清，返滴加無(wú)水乙醇至剛剛澄清即停止，加入他克莫司晶種，攪拌冷卻，靜置6～10h，3～5℃冷藏10～14h，至結(jié)晶完全；?

（5）干燥：取析出的所述他克莫司晶體加入55～65%的乙醇洗滌、抽濾，真空除去洗滌液，然后再將洗滌液與晶體混合，重復(fù)洗滌2～3次，抽干洗滌液，得到的晶體真空38～42℃干燥21～24h，即得；?

所述重量份與所述體積份的關(guān)系為g/ml的關(guān)系。?

上述述制備高純度他克莫司的工藝，包括如下步驟：?