[發(fā)明專(zhuān)利]杜鵑紅山茶的組織培養(yǎng)基及其繁殖方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310533932.8
• 申請(qǐng)日: 2013-11-01
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103535282A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-01-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳澤雄;婁娟
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 重慶文理學(xué)院
• 主分類(lèi)號(hào): A01H4/00
• 分類(lèi)號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 北京匯澤知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11228
• 代理人: 張瑾

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于植物組織培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種杜鵑紅山茶的組織培養(yǎng)基及其繁殖方法。

背景技術(shù)

杜鵑紅山茶（Camellia?azalea）因其外形極像杜鵑，實(shí)質(zhì)卻是山茶，故此得名。杜鵑紅山茶為山茶科，山茶屬，栽培名稱(chēng)為“四季杜鵑茶”或“杜鵑茶”。杜鵑紅山茶是一個(gè)極其珍稀的山茶品種，有著“植物界大熊貓”之稱(chēng)、一度曾瀕臨滅絕的杜鵑紅山茶。主要分布在云南、廣西、廣東、四川，野生數(shù)量稀少，茶花市場(chǎng)上也少見(jiàn)，目前處在研究開(kāi)發(fā)階段，是珍貴的四季開(kāi)花古茶花品種之一。近年來(lái)廣東、浙江等地已經(jīng)逐漸市場(chǎng)化，但是全都是通過(guò)傳統(tǒng)的嫁接和扦插獲得，其繁殖速度慢，繁殖率低，仍然滿(mǎn)足不了市場(chǎng)的需求。采用組織培養(yǎng)技術(shù)對(duì)杜鵑紅山茶進(jìn)行繁殖，可以有效解決市場(chǎng)供不應(yīng)求的問(wèn)題，但是通過(guò)組織培養(yǎng)技術(shù)對(duì)杜鵑紅山茶進(jìn)行繁殖的技術(shù)目前沒(méi)有相關(guān)的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種杜鵑紅山茶的組織培養(yǎng)基及其繁殖方法，可以對(duì)杜鵑紅山茶進(jìn)行繁殖，為市場(chǎng)解決供不應(yīng)求的問(wèn)題，并且成本低、性狀穩(wěn)定。

為達(dá)到上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：

本發(fā)明公開(kāi)了一種杜鵑紅山茶的組織培養(yǎng)基，包括誘導(dǎo)培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基；所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基是以SH培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，并添加有玉米素1.0mg/L、6-芐氨基嘌呤2.0mg/L和吲哚乙酸1.0mg/L；所述增殖培養(yǎng)基是以SH培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，并添加有玉米素1.0mg/L、6-芐氨基嘌呤1.0mg/L和吲哚乙酸0.5mg/L；所述生根培養(yǎng)基是以1/2SH培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，并添加有吲哚-3-丁酸2.0mg/L、吲哚乙酸0.1mg/L和活性炭100mg/L。

本發(fā)明公開(kāi)了一種使用上述杜鵑紅山茶的組織培養(yǎng)基進(jìn)行杜鵑紅山茶繁殖的方法，包括以下步驟：

1）芽的誘導(dǎo)：取杜鵑紅山茶當(dāng)年生幼嫩莖尖為外植體，經(jīng)清洗消毒滅菌后，接種于所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行芽的誘導(dǎo)；

2）芽的增殖培養(yǎng)：將誘導(dǎo)出來(lái)的芽從老組織上切割下來(lái)，接種到所述增殖培養(yǎng)基中進(jìn)行芽的增殖培養(yǎng)；

3）生根培養(yǎng)：從增殖的植株上切取健壯的單芽，接種到所述生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)。

進(jìn)一步，所述步驟1）中，進(jìn)行芽的誘導(dǎo)時(shí)，前7天為暗培養(yǎng)，然后進(jìn)行光照培養(yǎng)，光照時(shí)間為10～12h/d，光照強(qiáng)度為2000～3000lx，控制溫度25±2℃。

本發(fā)明中所述的SH培養(yǎng)基和1/2SH培養(yǎng)基為植物組織培養(yǎng)中常用的基本培養(yǎng)基，其具體配方如下表所示：

本發(fā)明的有益效果在于：本發(fā)明建立了通過(guò)組織培養(yǎng)技術(shù)對(duì)杜鵑紅山茶進(jìn)行繁殖的方法，并對(duì)方法中涉及的誘導(dǎo)培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基進(jìn)行了選擇優(yōu)化，具有芽誘導(dǎo)率高、增殖系數(shù)高、生根率高、植株抽高快、葉形葉色正常、根系發(fā)達(dá)等優(yōu)點(diǎn)，能夠滿(mǎn)足市場(chǎng)對(duì)杜鵑紅山茶的需要，并且成本低、性狀穩(wěn)定。

具體實(shí)施方式

下面將對(duì)本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例進(jìn)行詳細(xì)的描述。

本發(fā)明實(shí)施例所用的試驗(yàn)材料杜鵑紅山茶幼嫩莖尖由重慶市南山植物園提供，采取時(shí)間為2010年4月中旬。

1）芽的誘導(dǎo)：在4月中旬選取3～5cm長(zhǎng)的當(dāng)年生幼嫩莖尖為外植體，先用自來(lái)水沖洗干凈后剪去葉片，留莖尖2～3cm，加少許洗衣粉溶解后浸泡剪好的材料5～10min除去表面灰塵，然后用流水沖洗干凈，在超凈工作臺(tái)上開(kāi)紫外燈晾干，放入0.1%的升汞中滅菌5～6min，再用無(wú)菌水沖洗4～5次，切掉莖尖基部，使莖尖控制在1cm左右長(zhǎng)；將獲得的無(wú)菌材料莖尖接種到不同組合組成的誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，進(jìn)行芽的誘導(dǎo)：前7天為培養(yǎng)室內(nèi)暗培養(yǎng)，然后開(kāi)雙排燈進(jìn)行光照培養(yǎng)，光照時(shí)間為10～12h/d，光照強(qiáng)度為2000～3000lx，控制溫度25±2℃。

試驗(yàn)所用誘導(dǎo)培養(yǎng)基是以MS、SH或改良MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，并添加有玉米素（ZT）1.0mg/L、6-芐氨基嘌呤（6-BA）2.0mg/L和吲哚乙酸（IAA）1.0mg/L；每種處理接種30瓶，每瓶接種1個(gè)外植體，重復(fù)3次；培養(yǎng)30d后觀察并統(tǒng)計(jì)其生長(zhǎng)情況、誘導(dǎo)率、成活率，以篩選出芽誘導(dǎo)的最適培養(yǎng)基；誘導(dǎo)率=（誘導(dǎo)出的芽數(shù)/接種的外植體數(shù)）×100%，成活率=（成活數(shù)/誘導(dǎo)出的芽數(shù)）×100%。