[發明專利]一種檢測啤酒樣品中L-酪氨酸含量的方法

有效

• 申請號: 201310533339.3
• 申請日: 2013-11-03
• 公開（公告）號: CN103575795A
• 公開（公告）日: 2014-02-12
• 發明（設計）人: 劉崢;賴麗燕;李巍
• 申請（專利權）人: 桂林理工大學
• 主分類號: G01N27/48
• 分類號: G01N27/48
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種利用化學修飾電極快速檢測L-酪氨酸含量的方法，特別是檢測啤酒樣品中L-酪氨酸含量的方法。?

背景技術

L-酪氨酸屬于非必需氨基酸,是人體體內合成蛋白質所需的重要氨基酸之一,在自然界酪氨酸以L-酪氨酸存在。L-酪氨酸對于促進人體的新陳代謝有非常重要的作用,也能產生出神經傳導素。據研究表明,?L-酪氨酸具有防止人體衰老,預防癡呆癥的作用,精密準確的測定人體組織及體液中酪氨酸的含量在臨床醫學、營養學上都具有重大意義。據文獻報道目前對酪氨酸的測定方法主要有酶催化分光光度法、色譜法、化學發光法、熒光分析法、電化學分析法等方法，其中電化學分析法具有成本相對較低、分析過程較簡單、準確度高、快速等優點。電化學分析方法的靈敏度、精密度和準確度與新型的修飾電極的開發研究密切相關，席夫堿過渡金屬配合物是一種廣泛應用的電子媒介體，具有促進電子傳遞的作用，電子媒介體的應用提高了電化學法檢測的靈敏度、精密度和準確度,促進了電分析化學的迅速發展。?

發明內容

本發明的目的在于提供一種檢測啤酒樣品中L-酪氨酸含量的方法。?

檢測L-酪氨酸含量的研究方法：采用三電極體系,?在室溫下，分別以玻碳電極為工作電極,?飽和甘汞電極為參比電極,?鉑金電極為輔助電極，所有測量均在含有不同濃度的L-酪氨酸的PBS?緩沖溶液中(pH?=7.0)進行，采用循環伏安法掃描，掃描速度0.1V/s，掃描范圍為+0.2V～+1.4V。?

干擾實驗結果表明，在測定相對誤差不超過±5%時，10倍精氨酸、DL-丙氨酸、L?-谷氨酸、L-絲氨酸、甘氨酸；100倍硝酸鎂、硝酸鋁、硝酸銅、硝酸鋇；50倍硝酸鐵不干擾L-酪氨酸濃度的測試。?

具體步驟為：?

1.取10?mg納米氧化石墨烯與0.05mmol?（37.78mg）4,5-二氯鄰苯二胺縮3,5-二溴水楊醛席夫堿鎳配合物溶于二甲基甲酰胺(DMF)溶液中，超聲分散2?小時得到均一的席夫堿鎳配合物-納米氧化石墨烯懸浮液。

2.?將玻碳電極依次在放有Al₂O₃粉末的麂皮上拋光，二次水淋洗后，依次在無水乙醇、二次水中分別超聲清洗3?分鐘，紅外烘干；在玻碳電極上滴加3,5-二溴水楊醛席夫堿鎳配合物-納米氧化石墨烯懸浮液，紅外燈烘干，獲得4,5-二氯鄰苯二胺鎳配合物-氧化石墨烯修飾玻碳電極，置于4℃冰箱中保存待用。?

3.?采用三電極體系,?在室溫下，分別以步驟（2）所得4,5-二氯鄰苯二胺鎳配合物-氧化石墨烯修飾玻碳電極為工作電極,?飽和甘汞電極為參比電極,??鉑金電極為輔助電極，在含有不同濃度的L-酪氨酸的PBS?緩沖溶液中(pH?=7.0)進行循環伏安掃描，記錄不同濃度L-酪氨酸氧化峰電流值，結果表明L-酪氨酸濃度在1.0×10^-6～1.0×10^-3mol/L范圍內，其濃度與氧化峰電流值具有良好的線性關系，繪制工作曲線，線性回歸方程為Ip=0.319C+0.179，Ip的單位為A即安培，C的單位為mmol/L，相關系數為0.995（n=5），檢出限為2.3×10^-7mol/L（S/N=3)，其中n為樣品平行測定次數，S為相對標準偏差?，N為線性方程的斜率。?

4.?分別準確量取啤酒5.00mL，用pH=7.0?PBS緩沖溶液定容至50mL,用步驟（2）所得4,5-二氯鄰苯二胺鎳配合物-氧化石墨烯修飾玻碳電極測定50mL溶液的氧化峰電流值，代入線性回歸方程Ip=0.319C+?0.179，Ip的單位為A即安培，C的單位為mmol/L，計算L-酪氨酸的濃度和啤酒樣品中L-酪氨酸的含量。?

本發明以4,5-二氯鄰苯二胺席夫堿鎳配合物-納米氧化石墨烯為電極修飾劑，制備修飾玻碳電極，研究了L-酪氨酸在修飾電極上的電化學特性和測定方法，并應用于檢測啤酒樣品中的L-酪氨酸的含量，檢測靈敏、快速。?

附圖說明

圖1為本發明的實施例的工作曲線圖。?

具體實施方式

實施例：?

1.取10?mg納米氧化石墨烯與0.05mmol?（37.78mg）4,5-二氯鄰苯二胺縮3,5-二溴水楊醛席夫堿鎳配合物溶于二甲基甲酰胺(DMF)溶液中，超聲分散2?小時得到均一的3,5-二溴水楊醛席夫堿鎳配合物-納米氧化石墨烯懸浮液。