[發(fā)明專利]一株發(fā)酵甘蔗糖蜜生產(chǎn)D-乳酸菌株及其發(fā)酵方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310507255.2
• 申請(qǐng)日: 2013-10-24
• 公開（公告）號(hào): CN103589668A
• 公開（公告）日: 2014-02-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 聞建平;李勇
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 天津大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;C12P7/56;C12R1/225
• 代理公司: 天津市北洋有限責(zé)任專利代理事務(wù)所 12201
• 代理人: 王麗

1.一株發(fā)酵甘蔗糖蜜生產(chǎn)高光學(xué)純度D-乳酸的德式乳桿菌菌株，其特征在于所述菌株為德式乳桿菌Lactobacillus?delbrueckii?LACD01，保藏于中國(guó)普通微生物菌種保藏管理中心中科院微生物研究所，保藏編號(hào)為CGMCC?NO.8324。

2.利用德式乳桿菌Lactobacillus?delbrueckii?LACD01發(fā)酵甘蔗糖蜜生產(chǎn)D-乳酸的方法，其特征是步驟如下：

（1）平板培養(yǎng)：將德式乳桿菌Lactobacillus?delbrueckii?LACD01接種至平板培養(yǎng)基，將平板密封并至于恒溫培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)溫度35～45℃，培養(yǎng)時(shí)間為30～40h；

（2）種子培養(yǎng)：挑?。?）中平板培養(yǎng)的德式乳桿菌Lactobacillus?delbrueckii?LACD01單菌落，接種至裝有5～10mL種子培養(yǎng)基的試管中靜置培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度35～45℃，培養(yǎng)時(shí)間為20～30h，制成第一批種子液，將試管中第一批種子液按體積比1～3：100接入裝有相應(yīng)體積種子培養(yǎng)基的錐形瓶中靜置培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度35～45℃，培養(yǎng)時(shí)間為20～30h，制成第二批種子液；

（3）發(fā)酵甘蔗糖蜜產(chǎn)D-乳酸：將試管中第二批種子液按體積比10～15：100接入到裝有相應(yīng)體積發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中，于35～45℃下發(fā)酵50～70h，發(fā)酵開始時(shí)加入50～70g/L的碳酸鈣作為中和劑使發(fā)酵體系pH控制在5.3～5.8之間，發(fā)酵過程中不通氣，攪拌速度為100～150rpm。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述的平板培養(yǎng)基配方為：以蒸餾水為溶劑，其中含牛肉膏10～20g/L，酵母粉10～20g/L，葡萄糖10～20g/L，乙酸鈉5～10g/L，檸檬酸二胺1～3g/L，磷酸氫二鉀1～3g/L，硫酸鎂0.1～0.3g/L，硫酸錳0.05～0.2g/L，碳酸鈣10～20g/L，瓊脂15～20g/L，pH5.5～6.5，按上述配方配制好溶液后，110～115℃滅菌20～30min，冷卻至25～30℃后備用。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述的種子培養(yǎng)基配方為：以蒸餾水為溶劑，其中含牛肉膏10～20g/L，酵母粉10～20g/L，葡萄糖10～20g/L，糖蜜總糖濃度10～20g/L，乙酸鈉5～10g/L，檸檬酸二胺1～2g/L，磷酸氫二鉀1～2g/L，硫酸鎂0.1～0.2g/L，硫酸錳0.05～0.1g/L，pH5.5～6.5，按上述配方配制好溶液后，110～115℃滅菌20～30min，冷卻至25～30℃后備用。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述的發(fā)酵培養(yǎng)基配方為：以蒸餾水為溶劑，其中含牛肉膏30～60g/L，糖蜜總糖濃度70～120g/L，乙酸鈉5～10g/L，檸檬酸二胺1～2g/L，磷酸氫二鉀1～2g/L，pH5.5～6.5，按上述配方配制好溶液后，110～115℃滅菌20～30min，冷卻至35～45℃后備用。