[發(fā)明專利]一種隱形熱敏脂質(zhì)體的制備及其藥物轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)在腫瘤治療藥物中的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310494933.6
• 申請日: 2013-10-21
• 公開（公告）號: CN103520726A
• 公開（公告）日: 2014-01-22
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 祝俠麗;張振中;謝瑩霞;黃勝楠;侯琳;張慧娟;王蕾;史進(jìn)進(jìn);張英杰;黃河清
• 申請（專利權(quán)）人: 鄭州大學(xué)
• 主分類號: A61K45/06
• 分類號: A61K45/06;A61K41/00;A61K9/127;A61K47/48;A61P35/00;A61K31/704;A61K31/337
• 代理公司: 鄭州天陽專利事務(wù)所(普通合伙) 41113
• 代理人: 聶孟民

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及藥物領(lǐng)域，特別是一種隱形熱敏脂質(zhì)體的制備及其藥物轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)在腫瘤治療藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

隱形熱敏脂質(zhì)體是一種物理化學(xué)和主動靶向的藥物轉(zhuǎn)運(yùn)載體。在正常體溫下，親水性藥物很難透過脂質(zhì)體膜而擴(kuò)散出來，而當(dāng)脂質(zhì)體隨血液循環(huán)經(jīng)過被加熱的靶器官時，局部的高溫可促使藥物在靶部位釋放并形成較高的藥物濃度；隱形熱敏脂質(zhì)體具有良好的載藥性、靶向性以及生物相容性而成為生物醫(yī)藥領(lǐng)域中的研究熱點(diǎn)，目前已報道熱敏脂質(zhì)體局部加熱方法有水浴法、微波法、射頻法等。

單壁或多壁碳納米管，石墨烯，納米金具有巨大的比表面積(～2600m²/g)、較高的近紅外產(chǎn)熱能力、獨(dú)特的跨膜能力以及大離域π鍵等特性，已廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)藥領(lǐng)域。碳納米管可以有效攜帶蛋白質(zhì)、抗體、多肽、藥物和核酸等生物活性物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞，從而成為人們關(guān)注的載體。碳納米管對700～1100nm范圍的近紅外光具有高吸收特性，同時生物系統(tǒng)對此范圍的近紅外光具有高度透過性，因此可利用碳納米管的光熱轉(zhuǎn)換特性對腫瘤進(jìn)行激光熱療。碳納米管是藥物轉(zhuǎn)運(yùn)載體，同時也是發(fā)揮熱療效應(yīng)的主體，可作為化療藥物增敏劑和靶向熱敏劑。但碳納米管不溶于水和有機(jī)溶劑，且在溶液中易聚集成束，難以分散，嚴(yán)重影響其應(yīng)用。

DPPC(二棕櫚酰磷脂酰膽堿)，C₄₀H₈₀NO₈P,分子量734.04，相變溫度41-42℃，可作為熱敏脂質(zhì)體制備的主要材料，當(dāng)溫度達(dá)到其相變溫度時就可引起熱敏脂質(zhì)體迅速釋放內(nèi)含藥物，實(shí)現(xiàn)靶向治療；DSPE-PEG2000（二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000）具有良好的親水性和柔韌性，可延長藥物載體在體內(nèi)的循環(huán)時間。

目前，通過隱形熱敏脂質(zhì)體負(fù)載靶向熱敏劑（如碳納米管）和化療藥物形成藥物轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)，特別是在腫瘤治療藥物中的應(yīng)用尚未見有報道。

發(fā)明內(nèi)容

針對上述情況，克服現(xiàn)有技術(shù)之缺陷，本發(fā)明之目的就是提供一種隱形熱敏脂質(zhì)體藥物轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)的制備方法及其在腫瘤治療藥物中的應(yīng)用，可有效解決現(xiàn)有腫瘤治療藥物副作用大、治療效果不佳等問題。

本發(fā)明解決的技術(shù)方案是，由隱形熱敏脂質(zhì)體負(fù)載靶向熱敏劑和化療藥物構(gòu)成，其中，靶向熱敏劑和化療藥物的質(zhì)量比為1:3，所述的靶向熱敏劑為單壁碳納米管及其衍生物、多壁碳納米管及其衍生物、石墨烯及其衍生物、納米金及其衍生物、納米銀及其衍生物、有機(jī)聚合物的一種；所述的化療藥物為鹽酸阿霉素、鹽酸表阿霉素、柔紅霉素、鹽酸米托蒽醌、多西紫杉醇、紫杉醇、順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、5-氟尿嘧啶、長春瑞濱、洛莫司汀、卡莫司汀、地西他賓、甲氨蝶呤、羥基喜樹堿、小核酸類寡義反核苷酸和小干擾RNA的一種或兩種以上的組合物。

所述的隱形熱敏脂質(zhì)體的制備方法，由以下步驟實(shí)現(xiàn)：

（1）羧基化碳納米管的合成：取95～110mg碳納米管，放入250mL燒瓶中，加入120mL的混酸，11～13mL質(zhì)量濃度30%的過氧化氫溶液，于超聲波清洗器超聲1h后，加入1L超純水稀釋，用0.22μm微孔濾膜和布氏漏斗抽濾，用超純水沖洗至pH為中性，放入烘箱中80℃恒溫干燥，得羧基化的碳納米管(CNTs-COOH)；所述混酸為濃硫酸與濃硝酸以體積比3︰1所組成的混合酸；

（2）葉酸靶向的碳納米管-賴氨酸的合成：取羧基化的碳納米管45～55mg，加入25mL0.1～0.3M的賴氨酸溶液，再加入葉酸9～11mg，45～55mg1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽(EDC·HCl)，9～11mg?N-羥基琥珀酰亞胺（NHS），置于燒瓶中，超聲分散2h后，在冰浴下，以100r/min攪拌24h使其充分反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后于透析袋中透析48h，除去未反應(yīng)的EDC·HCl、NHS、葉酸和賴氨酸，在60℃下真空干燥24h，得葉酸靶向的碳納米管-賴氨酸（FA-Lys/CNTs）；

（3)隱形熱敏脂質(zhì)體的制備：稱取45～55mg二棕櫚酰磷脂酰膽堿（DPPC），1～3mg二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000（DSPE-PEG2000）及18～22mg的膽固醇，置于100mL茄形燒瓶中，加入乙醚使完全溶解，再加入5mL?PBS溶液，超聲乳化40min，形成穩(wěn)定的O/W型乳劑，在45℃減壓旋轉(zhuǎn)下除去乙醚，探超（200W，2min），于透析袋中透析48h后，得隱形熱敏脂質(zhì)體；所述的PBS溶液為10mg葉酸靶向的碳納米管-賴氨酸和6mg鹽酸阿霉素溶于5mL?PBS(pH7.4)形成的溶液。

也可由以下步驟實(shí)現(xiàn)：