[發(fā)明專利]一種敲除染色體的方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201310476293.6 | 申請日： | 2013-10-10 |
| 公開（公告）號： | CN103540609A | 公開（公告）日： | 2014-01-29 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 李興林;李夢麗;別振宇 | 申請（專利權(quán)）人： | 天津科技大學(xué) |
| 主分類號： | C12N15/84 | 分類號： | C12N15/84;C12N5/10 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 300457 天津市濱海*** | 國省代碼： | 天津;12 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 染色體 方法 | ||
【權(quán)利要求書】：
1.將胞嘧啶脫氨酶基因(CD)插入到細(xì)胞的特定染色體上，通過單倍體培養(yǎng)和抗生素等試劑的正向選擇獲得轉(zhuǎn)CD的單倍體。
2.振蕩培養(yǎng)含CD的單倍體制備細(xì)胞懸浮系，接著在含0.0001-10％的5-氟胞嘧啶培養(yǎng)基中振蕩培養(yǎng)含CD的懸浮細(xì)胞，進(jìn)行負(fù)向選擇，培養(yǎng)時(shí)間為0.1-100小時(shí)。
3.在覆蓋于旺盛愈傷組織的濾紙上接種經(jīng)過負(fù)向選擇且已稀釋的懸浮細(xì)胞，進(jìn)行10-600小時(shí)的看護(hù)培養(yǎng)，然后挑選出單細(xì)胞團(tuán)，經(jīng)鑒定后獲得CD插入染色體的缺失細(xì)胞。
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