[發(fā)明專(zhuān)利]小麥麩皮活性多糖的提取純化方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310472002.6
• 申請(qǐng)日: 2013-10-11
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103497258A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-01-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 曹榮安;賈建;李良玉;張建強(qiáng);鹿保鑫;劉妍妍;張麗萍;楊楠;郭希娟
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C08B37/00
• 分類(lèi)號(hào): C08B37/00;A61P37/02
• 代理公司: 大慶市遠(yuǎn)東專(zhuān)利商標(biāo)事務(wù)所 23202
• 代理人: 馬洪發(fā)

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于小麥麩皮深加工技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種小麥麩皮活性多糖的提取純化方法。

背景技術(shù)

小麥麩皮是小麥制面粉過(guò)程中提取小麥粉和胚芽后的殘留部分，是小麥面粉廠(chǎng)的主要加工副產(chǎn)品，以皮層為主(包括果皮、種皮、珠心層和糊粉層)，混入少量的胚芽和未剝刮干凈的胚乳，通常占小麥重量的14%～19%，它含有非淀粉多糖、淀粉、脂肪、木質(zhì)素、蛋白質(zhì)、維生素、酚酸類(lèi)化合物等多種成分。目前小麥麩皮除少許用于麥麩面筋、麥麩膳食纖維、木糖醇和阿魏酸提取外，主要用作飼料，經(jīng)濟(jì)效益不高，而小麥麩皮中非淀粉多糖含量約為46%，所以很有必要對(duì)從小麥麩皮中提取純化多糖的方法進(jìn)行研究，提高其經(jīng)濟(jì)利用價(jià)值。

經(jīng)對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的文獻(xiàn)檢索發(fā)現(xiàn)，中國(guó)專(zhuān)利CN200910237352.8公開(kāi)了一種具有抗腫瘤與免疫調(diào)節(jié)活性的小麥麩皮多糖及其提取方法，它是以木聚糖酶酶解小麥麩皮，得到阿拉伯木聚糖(或稱(chēng)戊聚糖)為主的多糖產(chǎn)品，但利用酶提取成本高，不適合大規(guī)模生產(chǎn)應(yīng)用，而且多糖沒(méi)有經(jīng)過(guò)純化，粗品生物活性低。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明旨在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供了一種利用水提醇沉法制得小麥麩皮粗多糖，之后去除雜質(zhì)，利用瓊脂糖凝膠柱純化得到具有免疫調(diào)節(jié)活性的小麥麩皮活性多糖的方法，提取方法簡(jiǎn)單，運(yùn)行成本低，純化得到的多糖生物活性高。

小麥麩皮活性多糖的提取純化方法，步驟如下：

a、預(yù)處理：將小麥麩皮去除雜質(zhì)后，55～65℃烘干，研磨至30～60目；

b、脫脂：

（1）乙醇脫脂：

將經(jīng)a步驟處理的小麥麩皮粉浸入為其重量5～15倍、純度為85%的乙醇中，在60～80℃加熱回流攪拌1.5～3h，冷卻至室溫繼續(xù)攪拌10～18h，去除液體，二次加入其重量5～15倍、純度為85%的乙醇，室溫?cái)嚢?～7h，去除液體；

（2）丙酮脫脂：

將乙醇脫脂后的小麥麩皮中加入其重量2～8倍、純度為99%的丙酮溶液，攪拌30min后去除液體，在室溫自然揮發(fā)干燥12h，得到脫脂麩皮；

c、多糖提?。?/p>

將b步驟制得的脫脂麩皮加入其重量22～30倍的水，在70℃～90℃下加熱回流攪拌2～6h，取其液體，在加熱至50℃蒸發(fā)，至其濃縮為原體積的1/6～1/2止，再加入乙醇至乙醇濃度不低于75%，降溫至3～6℃靜置10～18h，后去除液體，在室溫自然揮發(fā)干燥10～18h，制得小麥麩皮粗多糖；

d、小麥麩皮粗多糖精制：

（1）去蛋白：

將c步驟所得的小麥麩皮粗糖加入其重量8～20倍的水，再加入其體積份數(shù)為1/6～1/2的Sevage試劑，攪拌20min，去除下層液體及絮狀沉淀物，在上層液體中加入乙醇至乙醇溶液濃度不小于75%，降溫至3～6℃靜置10～18h，去除液體，再分別用其重量25～45倍的無(wú)水乙醇、25～45倍的無(wú)水丙酮和25～45倍的無(wú)水乙醚逐次洗滌，再用0.45μm的濾膜過(guò)濾，將其沉淀物在自然揮發(fā)干燥10～18h，制得小麥麩皮去蛋白多糖；

（2）去低分子量雜質(zhì)：

將（1）步驟所得的小麥麩皮去蛋白多糖溶于其重量8～20倍的水中，用3500Da透析膜透析3天，取其分子量大于3500Da的透析液，凍干制得除雜質(zhì)小麥麩皮粗多糖；

（3）吸附純化：

將（2）步驟得到的除雜質(zhì)小麥麩皮粗多糖加入其重量為0.01～0.06倍的水、加熱至60℃溶解，注入DEAE-瓊脂糖凝膠柱中色譜分離，首先用蒸餾水控制流速1.5mL/min沖洗5h，再用0.5M?NaCL以同樣流速繼續(xù)沖洗3h、同時(shí)開(kāi)始收集解析液，2h后更換1.0M?NaCL作為解析劑以同樣的流速洗滌1小時(shí)以上，后停止收集，所得的收集液即為小麥麩皮活性多糖溶液；

（4）去鹽：

將（3）步驟所得的小麥麩皮活性多糖溶液，用3500Da透析膜透析3天，取其分子量大于3500Da的透析液，凍干制得小麥麩皮活性多糖；

其中：Sevage是由氯仿和正丁醇按4～6∶1的體積比混合制成；

進(jìn)一步優(yōu)化小麥麩皮活性多糖的提取純化方法，其步驟如下：

a、預(yù)處理：將小麥麩皮去除雜質(zhì)后，60℃～65℃烘干，研磨至40～50目；

b、脫脂：?

（1）乙醇脫脂：

將經(jīng)a步驟處理的小麥麩皮粉浸入為其重量6～10倍、純度為85%的乙醇中，在65℃～75℃加熱回流攪拌2～2.5h，冷卻至室溫繼續(xù)攪拌12～16h，去除液體，二次加入其重量10～13倍、純度為85%的乙醇，室溫?cái)嚢?～6h，去除液體；