[發明專利]一種應用靜息細胞轉化1,3-丙二醇為3-羥基丙酸的方法

有效

• 申請號: 201310468917.X
• 申請日: 2013-10-10
• 公開（公告）號: CN103525727A
• 公開（公告）日: 2014-01-22
• 發明（設計）人: 諸葛斌;吳金鑫;宗紅;陸信曜;宋健;方慧英;諸葛健
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P7/42;C12R1/02
• 代理公司: 北京愛普納杰專利代理事務所(特殊普通合伙) 11419
• 代理人: 何自剛;王玉松

1.一株具有高轉化1,3-丙二醇生產3-羥基丙酸能力的醋桿菌（Acetobacter?sp.）JDB-71，于2013年9月9日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，北京市朝陽區北辰西路1號院，保藏編號為CGMCC?NO.8142。

2.一種利用權利要求1所述醋桿菌轉化1,3-丙二醇生產3-羥基丙酸的方法，其特征在于，培養好的微生物經離心洗滌獲得菌體后制成菌懸液，在水相緩沖液體系中，以1,3-丙二醇為底物進行催化反應生產3-羥基丙酸。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，具體步驟如下：

（1）醋桿菌的培養：將醋桿菌種子培養液接種到發酵培養基，20-40℃培養時間1-2天；

（2）靜息細胞催化反應：將發酵培養24-48h的菌體離心后洗滌兩次，用緩沖液重新懸浮制成一定菌體濃度的菌懸液，加入1,3-丙二醇，在20-40℃和100-300rpm搖床轉速下進行催化反應1-72h，轉化反應完成后轉化液經離心去除菌體，取上清液經0.22μm水相濾膜過濾后進行HPLC檢測。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述發酵培養基的碳源至少為葡萄糖、蔗糖、果糖、山梨糖醇、甘露醇、甘油中的一種；所述發酵培養基碳源的濃度為10-100g/L，酵母膏1-10g/L，蛋白胨1-10g/L，pH3-10。

5.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述的緩沖液可以是檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液、磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉緩沖液、Tris-鹽酸緩沖液、磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液；所用緩沖液體系濃度為0.05-0.5mol/L；pH范圍在3-10。

6.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述菌懸液濃度為2-50g/L。

7.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述底物1,3-丙二醇終濃度為1-100g/L。