[發明專利]山杏α-葡萄糖苷酶抑制肽及其制備方法和用途

有效

• 申請號: 201310454296.X
• 申請日: 2013-09-29
• 公開（公告）號: CN103539831A
• 公開（公告）日: 2014-01-29
• 發明（設計）人: 王建中;顧欣;王豐俊;崔潔;黃昆;王文江
• 申請（專利權）人: 北京林業大學
• 主分類號: C07K5/062
• 分類號: C07K5/062;C07K5/078;C12P21/06;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/20;C07K1/16;C07K1/30;A61K38/05;A61P3/10;A23L1/29
• 代理公司: 北京清亦華知識產權代理事務所(普通合伙) 11201
• 代理人: 李志東

技術領域

本發明涉及保健性功能食品及藥品制備領域。具體地，本發明涉及山杏α-葡萄糖苷酶抑制肽及其制備方法和用途。

背景技術

糖尿病已經被列為第三大致死性疾病，嚴重威脅著人類的健康。如何治療糖尿病已經成為世界范圍內的重點研究課題。目前糖尿病患者主要以Ⅱ型糖尿病居多，治療Ⅱ型糖尿病的藥物也有很多種，其中主要有胰島素促泌劑，雙胍類，胰島素分泌模式調節劑以及α-葡萄糖苷酶抑制劑等。其中，阿卡波糖這類人工合成的α-葡萄糖苷酶抑制劑在臨床上會伴隨一些副作用的發生，因此開發更多天然的、安全的α-葡萄糖苷酶抑制劑對Ⅱ型糖尿病的治療有著重大的意義。

然而，目前制備天然的α-葡萄糖苷酶抑制劑的方法仍有待改進。

發明內容

本發明是基于發明人的下列發現而完成的：

山杏Armaniaca?sibirica在我國黑龍江、吉林、遼寧、內蒙古、甘肅、河北、山西等省區均有分布。山杏仁營養豐富，富含蛋白質、脂肪、礦物質和維生素，其蛋白質、氨基酸總量、必需氨基酸含量均較高，有很高的經濟價值和藥用價值。而山杏仁蛋白質還具有抗腫瘤、降血壓、降血糖、降膽固醇等功效。發明人發現，利用山杏仁粕粉篩選高活性的α-葡萄糖苷酶抑制肽既可以良好利用山杏仁加工的剩余產物，又可以得到高活性的α-葡萄糖苷酶抑制肽。

本發明旨在至少解決現有技術中存在的技術問題之一。為此，本發明的一個目的在于提出一種制備天然、高活性的山杏α-葡萄糖苷酶抑制肽的方法及其產品。

根據本發明的一個方面，本發明提供了一種山杏α-葡萄糖苷酶抑制肽。根據本發明的實施例，該α-葡萄糖苷酶抑制肽具有SEQ?ID?NO：1所示的氨基酸序列。根據本發明的具體示例，本發明的山杏α-葡萄糖苷酶抑制肽的序列為（C端—N端）：蘇氨酸-色氨酸（Thr–Trp，TW）。發明人驚奇地發現，本發明的山杏α-葡萄糖苷酶抑制肽，其α-葡萄糖苷酶抑制活性非常高，能夠有效地抑制α-葡萄糖苷酶的活性，進而能夠有效地用于降血糖，以及治療高血糖、糖尿病藥物的制備，并且該山杏α-葡萄糖苷酶抑制肽的生產成本低，具有巨大的實用價值和經濟效益。

根據本發明的另一方面，本發明還提供了一種制備上述山杏α-葡萄糖苷酶抑制肽的方法。根據本發明的實施例，該方法包括：利用等電點沉淀法從脫脂山杏仁粕粉中提取蛋白質；利用堿性蛋白酶對所述蛋白質進行水解，以便獲得水解產物；以及對所述水解產物依次進行超濾處理、凝膠色譜處理、第一反相高效液相色譜處理和第二反相高效液相色譜處理，以便獲得所述山杏α-葡萄糖苷酶抑制肽。發明人驚奇地發現，利用該方法能夠有效地制備具有SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的山杏α-葡萄糖苷酶抑制肽，并且該山杏α-葡萄糖苷酶抑制肽純度高，能夠有效地抑制α-葡萄糖苷酶的活性，進一步通過抑制α-葡萄糖苷酶的活性能夠控制血壓，從而能夠有效地應用于治療高血壓藥物的制備。

根據本發明的又一方面，本發明還提供了前面所述的具有SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列的山杏α-葡萄糖苷酶抑制肽在制備藥物或功能食品中的用途，所述藥物或功能食品用于降血糖。

此外，需要說明的是，本發明的山杏α-葡萄糖苷酶抑制肽及其制備方法，現階段尚未見報道，其是本申請的發明人經過艱苦的創造性勞動和優化的工作，從山杏仁粕粉中提取獲得的新的、天然、安全的山杏α-葡萄糖苷酶抑制肽，這為更安全、有效的降血糖藥物的制備提供了新希望。而本領域的技術人員可以理解的是，還可以根據本發明提供的山杏α-葡萄糖苷酶抑制肽的氨基酸序列，即SEQ?ID?NO：1所示的：蘇氨酸-色氨酸（Thr–Trp，TW），利用肽自動合成儀通過合成方法人工合成該山杏α-葡萄糖苷酶抑制肽。

本發明的附加方面和優點將在下面的描述中部分給出，部分將從下面的描述中變得明顯，或通過本發明的實踐了解到。

附圖說明

本發明的上述和/或附加的方面和優點從結合下面附圖對實施例的描述中將變得明顯和容易理解，其中：

圖1顯示了根據本發明一個實施例，制備山杏α-葡萄糖苷酶抑制肽過程中的Sephadex?G25Medium柱層析色譜圖；

圖2顯示了根據本發明一個實施例，制備山杏α-葡萄糖苷酶抑制肽過程中的第一反相高效液相色譜圖；

圖3顯示了根據本發明一個實施例，制備山杏α-葡萄糖苷酶抑制肽過程中的第二反相高效液相色譜處理的色譜圖，其中，

圖3A顯示了經過第一反相高效液相色譜處理的高α-葡萄糖苷酶抑制活性組分P3的第二反相高效液相色譜圖，