[發(fā)明專利]一種從鮮活大青葉中提取菘藍(lán)苷的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310452374.2
• 申請(qǐng)日: 2013-09-29
• 公開（公告）號(hào): CN103497222A
• 公開（公告）日: 2014-01-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊大堅(jiān);陳新滋;卞兆祥;呂愛平;徐宏喜;陳士林;陳國(guó)慶;張毅
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 重慶市中藥研究院;香港浸會(huì)大學(xué);中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所;上海中醫(yī)藥大學(xué)
• 主分類號(hào): C07H7/033
• 分類號(hào): C07H7/033;C07H1/08
• 代理公司: 重慶輝騰律師事務(wù)所 50215
• 代理人: 武小赟

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明提供了一種中藥材活性成分提取方法，更具體的說涉及一種從鮮活大青葉中提取菘藍(lán)苷的方法。

技術(shù)背景

大青葉是我國(guó)的傳統(tǒng)中藥，為十字花科植物菘藍(lán)Isatis?indigotica?Fortune的干燥葉，同時(shí)商品中也常采用蓼科植物蓼大青Polygonum?tinctirium?Lour；爵床科植物馬藍(lán)Baphicacanthus?cusia?fNees)Bremek.和馬鞭草科植物路邊青Clerodendron?cyrtophyllum?Turcz.作為大青葉的代用品。菘藍(lán)的根和葉，具有清熱解毒、涼血、消斑的功效，主治溫病發(fā)熱、發(fā)斑、發(fā)疹、風(fēng)熱感冒、咽喉腫痛、流行性腦脊髓膜炎、乙型腦炎、肝炎、腮腺炎、丹毒、痛腫等癥，是治療感冒常用的大宗藥材。大青葉(菘藍(lán)葉)中的主要成分有菘藍(lán)苷（isatan?B）、菘藍(lán)苷易水解為靛玉紅（indirubin）和靛藍(lán)（indigo），色胺酮（trptanthrin）、β-谷留醇、二十九烷、苯甲酸、臨位氨基苯甲酸、在大青葉的全株中還含有芥苷（glucobrassicin）、新芥苷（neoglucobrassicin）、1-磺基苷（1-sulpho-3-indolylmethyl?glucosinolate）、吲哚醇、1-硫氰酸-2-羥基-3丁烯（1-thiocy?a?no-2-hydroxy-3-butene）、腺苷（adenosine）、棕櫚酸、γ-谷甾醇等，天門冬氨酸、蘇氨酸、脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、蛋氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、組氨酸、賴氨酸及高含量的鐵和錳。據(jù)報(bào)道，在大青葉的四個(gè)品種中都含有靛藍(lán)、靛玉紅，其中，菘藍(lán)葉中菘藍(lán)苷(isatanB，有的也稱大黃素B和靛紅烷B)含量最高，據(jù)報(bào)道最高含量達(dá)到1%。所述菘藍(lán)苷的結(jié)構(gòu)式為：

發(fā)明內(nèi)容

研究發(fā)現(xiàn)，菘藍(lán)苷在各大青葉品種的鮮品中大量存在，尤其是菘藍(lán)中含量最高，但是在大青葉采收和干燥的過程中，由于大青葉自身酶的作用和氧化的原因，導(dǎo)致大青葉中菘藍(lán)苷損失，在儲(chǔ)藏超過半年的大青葉中，一般很難檢測(cè)出菘藍(lán)苷。為解決上述問題，本發(fā)明提供了一種從鮮活大青葉中提取菘藍(lán)苷的方法；具體內(nèi)容為：

一種從鮮活大青葉中提取菘藍(lán)苷的方法，其創(chuàng)新點(diǎn)為：在鮮活藥材采收后立即進(jìn)行進(jìn)行滅酶處理；

所述滅酶處理為：將采收后12h內(nèi)的鮮活大青葉用藥材與溶媒重量比1:1-5的比例添加35-70%的乙醇或甲醇中任意一種溶劑，混合粉碎，調(diào)pH值小于6。

上述從鮮活大青葉中提取菘藍(lán)苷的方法，包括以下步驟：

1）將采收后12h內(nèi)的鮮活大青葉用藥材與溶媒重量比1:1-5的比例添加30-70%的乙醇，混合粉碎得到提取原漿；

2）過濾提取原漿，除去固體雜質(zhì)，回收為密度大于1.1的浸膏；

3）用熱的氯仿、一氯甲烷、二氯甲烷、四氯甲烷中的一種或幾種的混合物作為溶媒，除去浸膏中的雜質(zhì)，得到菘藍(lán)苷粗產(chǎn)品。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的從鮮活大青葉中提取菘藍(lán)苷的方法，其特征在于：步驟2）所述的除去固體雜質(zhì)為用高速離心除雜或用超微過濾方法除去原漿中的固體雜質(zhì)。

根據(jù)步驟3）所述的除去浸膏中的雜質(zhì)為將用溶媒對(duì)浸膏進(jìn)行回流提取或索氏提取，直至溶媒無色；在這里需要說明的是，由于回流提取和索氏提取的的原理類似，但是索氏提取適合實(shí)驗(yàn)室操作，而回流提取適合工業(yè)化生產(chǎn)；本領(lǐng)域技術(shù)人員可以根據(jù)生產(chǎn)量和生產(chǎn)條件自行選擇方法）。

所述步驟3）操作后，還對(duì)菘藍(lán)苷粗產(chǎn)品進(jìn)行了進(jìn)一步的純化；

所述純化工藝是用甲醇溶解，加熱濃縮，降溫析出菘藍(lán)苷純品。

本發(fā)明的有益技術(shù)效果是：本發(fā)明提供的一種菘藍(lán)苷的提取方法，有效的避免了菘藍(lán)苷的水解和氧化，并且方法簡(jiǎn)單，適合工業(yè)化生產(chǎn)。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1不同處理方法對(duì)原藥材中菘藍(lán)苷含量的影響考察

種植次年7-10月采收大青葉（菘藍(lán)）鮮品，5-25℃，避光，存儲(chǔ)備用；在采收后12h內(nèi)，分別取樣5組，每組大青葉鮮品1kg；分別給名為60℃干燥組、120℃干燥組、回流制樣組、冷浸制樣組；陰干組；采購市售大青葉作為市售組。

其中，60℃干燥組和120℃干燥組分別為在60℃和120℃鼓風(fēng)烘干干燥制備得到干品；回流制樣組為用藥材重量5倍的水回流提取樣品；陰干組為在常溫條件下，通風(fēng)干燥，干燥時(shí)間約1周；冷浸制樣組為將鮮活大青葉用藥材重量3倍的甲醇混合粉碎，調(diào)pH值至4-6，制備得到樣品。