[發明專利]通過使用單鏈多肽融合蛋白進行疼痛的治療

有效

• 申請號: 201310439850.7
• 申請日: 2007-06-01
• 公開（公告）號: CN103602650B
• 公開（公告）日: 2018-03-27
• 發明（設計）人: K·福斯特;J·查多克;P·馬科斯;P·斯坦庫姆;K·R·奧基;J·弗朗西斯;L·斯圖爾德
• 申請（專利權）人: 益普生生物創新有限公司;愛力根公司
• 主分類號: C12N9/52
• 分類號: C12N9/52;C12N15/62;C12N15/70;A61K38/48;A61P25/04;A61P29/00
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所11247
• 代理人: 張莉,黃革生

1.單鏈的多肽融合蛋白，其從N-末端至C-末端包含：

a).非細胞毒性蛋白酶，所述蛋白酶能夠剪切疼痛感應傳入器的胞吐融合器的蛋白；其中所述非細胞毒性蛋白酶是梭菌神經毒素L-鏈蛋白酶或IgA蛋白酶；

b).蛋白酶剪切位點，在該位點所述融合蛋白可被蛋白酶剪切；

c).能夠結合所述疼痛感應傳入器上之結合位點的阿片樣物質靶向部分，所述結合位點能夠進行細胞內吞作用，以被并入疼痛感應傳入器中的內涵體內；其中所述靶向部分選自：傷害感受肽、β-內啡肽、內啡素-1、內啡素-2、強啡肽、met-腦啡肽、leu-腦啡肽、甘丙肽、和PAR-2肽；和

d).轉運區域，其能夠將所述蛋白酶從內涵體中跨內涵體膜轉運，并進入所述疼痛感應傳入器的細胞溶膠中；其中所述轉運區域是梭菌神經毒素的HN區域、或選自如下的轉運區域：白喉毒素、假單胞菌外毒素A的結構域II、炭疽病毒素、源自流感病毒血凝素的融合和/或兩親肽、塞姆利基森林病毒融合蛋白、水泡性口炎病毒糖蛋白G、SER病毒F蛋白、泡沫病毒包膜糖蛋白；

其中所述靶向部分和所述蛋白酶剪切位點由最多10個氨基酸殘基分隔，

并且其中所述靶向部分和所述蛋白酶剪切位點不由0個氨基酸殘基分隔。

2.單鏈的多肽融合蛋白，其從N-末端至C-末端包含：

a).非細胞毒性蛋白酶，所述蛋白酶能夠剪切疼痛感應傳入器的胞吐融合器的蛋白；其中所述非細胞毒性蛋白酶是梭菌神經毒素L-鏈蛋白酶或IgA蛋白酶；

b).蛋白酶剪切位點，在該位點所述融合蛋白可被蛋白酶剪切；

c).能夠結合所述疼痛感應傳入器上之結合位點的阿片樣物質靶向部分，所述結合位點能夠進行細胞內吞作用，以被并入所述疼痛感應傳入器中的內涵體內；其中所述靶向部分選自：傷害感受肽、β-內啡肽、內啡素-1、內啡素-2、強啡肽、met-腦啡肽、leu-腦啡肽、甘丙肽、和PAR-2肽；和

d).轉運區域，其能夠將所述蛋白酶從內涵體中跨內涵體膜轉運，并進入所述疼痛感應傳入器的細胞溶膠中；其中所述轉運區域是梭菌神經毒素的HN區域、或選自如下的轉運區域：白喉毒素、假單胞菌外毒素A的結構域II、炭疽病毒素、源自流感病毒血凝素的融合和/或兩親肽、塞姆利基森林病毒融合蛋白、水泡性口炎病毒糖蛋白G、SER病毒F蛋白、泡沫病毒包膜糖蛋白；

其中所述蛋白酶和所述靶向部分彼此由最多100個氨基酸殘基隔開，

其中所述蛋白酶和所述靶向部分不由0個氨基酸殘基分隔。

3.單鏈的多肽融合蛋白，其從N-末端至C-末端包含：

a).非細胞毒性蛋白酶，所述蛋白酶能夠剪切疼痛感應傳入器的胞吐融合器的蛋白；其中所述非細胞毒性蛋白酶是梭菌神經毒素L-鏈蛋白酶或IgA蛋白酶；

b).蛋白酶剪切位點，在該位點所述融合蛋白可被蛋白酶剪切，

c).能夠結合所述疼痛感應傳入器上之結合位點的阿片樣物質靶向部分，所述結合位點能夠進行細胞內吞作用，以被并入所述疼痛感應傳入器中的內涵體內；其中所述靶向部分選自：傷害感受肽、β-內啡肽、內啡素-1、內啡素-2、強啡肽、met-腦啡肽、leu-腦啡肽、甘丙肽、和PAR-2肽；和

d).轉運區域，其能夠將所述蛋白酶從內涵體中跨內涵體膜轉運，并進入所述疼痛感應傳入器的細胞溶膠中；其中所述轉運區域是梭菌神經毒素的HN區域、或選自如下的轉運區域：白喉毒素、假單胞菌外毒素A的結構域II、炭疽病毒素、源自流感病毒血凝素的融合和/或兩親肽、塞姆利基森林病毒融合蛋白、水泡性口炎病毒糖蛋白G、SER病毒F蛋白、泡沫病毒包膜糖蛋白；

并且其中

(i)所述非細胞毒性蛋白酶組分與所述融合蛋白的轉運組分形成二硫鍵，其中形成二硫鍵的所述蛋白酶組分的氨基酸殘基位于所述蛋白酶組分的最后20個C-末端氨基酸殘基之內，并且形成二硫鍵的所述轉運組分內的氨基酸殘基位于所述轉運組分的前20個N-末端氨基酸殘基之內；或

(ii)所述非細胞毒性蛋白酶組分與所述融合蛋白的靶向部分組分形成二硫鍵，其中形成二硫鍵的所述蛋白酶組分的氨基酸殘基位于所述蛋白酶組分的最后20個C-末端氨基酸殘基之內，并且形成二硫鍵的在所述靶向部分組分中的氨基酸殘基位于所述靶向部分組分的最后20個C-末端氨基酸殘基之內。

4.根據權利要求1的融合蛋白，其中所述阿片樣物質靶向部分和所述蛋白酶剪切位點由最多5個氨基酸殘基分隔。