[發明專利]一次性發酵制備高純度賴氨酸硫酸鹽的方法有效
| 申請號： | 201310438355.4 | 申請日： | 2012-11-07 |
| 公開（公告）號： | CN103805627B | 公開（公告）日： | 2017-09-26 |
| 發明（設計）人： | 馬吉銀;陳崇安;孟剛 | 申請（專利權）人： | 寧夏伊品生物科技股份有限公司 |
| 主分類號： | C12N15/70 | 分類號： | C12N15/70;C12P13/08;A23K20/142;C12R1/19 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 750100 寧夏回族自治區銀川市*** | 國省代碼： | 寧夏;64 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一次性 發酵 制備 純度 賴氨酸 硫酸鹽 方法 | ||
1.發酵制備含L-賴氨酸硫酸鹽的產品的方法，其包括：
（1）將編碼氨基酸序列如SEQ ID No：1所示的蛋白的多核苷酸克隆入pET-20b(+)質粒，然后將該重組質粒導入大腸桿菌菌株W3110(tryA)/pCABD2中，獲得產L-賴氨酸的菌株W3110(tryA)/pCABD2-sigma；
（2）在發酵條件下液體培養步驟（1）獲得的菌，收集培養的上清液，所述發酵條件為：將所述菌接入液體LB培養基中振蕩培養至OD500達到0.35，以5％的接種量接入賴氨酸發酵培養基中以36℃、250rpm振蕩培養72小時，其中，每升培養基配方為：100g葡萄糖，60g(NH4)2SO4，50g CaCO3，35mL蛋白胨-B，1g KH2PO4，400mgMgSO4·7H2O，200mg L-甲硫氨酸，10mg FeSO4·7H2O，8.1mg MnSO4·4H2O，300μg生物素和200μg維生素B1，用Tris-HCl調節至pH7；
并讓該上清液通過截留分子量為1000Da的濾膜，保留濾液，所述濾液中包含如下重量配比的氨基酸：
賴氨酸55.7份；
天冬氨酸1.61份；
蘇氨酸1份；
絲氨酸0.6份；
谷氨酸2.56份；
甘氨酸0.96份；
丙氨酸1.5份；
纈氨酸0.99份；
甲硫氨酸0.44份；
異亮氨酸0.63份；
亮氨酸1.36份；
酪氨酸0.72份；
苯丙氨酸0.67份；
組氨酸1.02份；和，
精氨酸1.18份；
（3）向步驟（2）獲得的濾液，加入硫酸并濃縮干燥至含水率小于3%w/w。
2.權利要求1所述的方法，其中賴氨酸與硫酸的摩爾比為1~3：0.5~1.5。
3.權利要求2所述的方法，其中賴氨酸與硫酸的摩爾比為1.5~2.5：0.75~1.25。
4.權利要求3所述的方法，其中賴氨酸與硫酸的摩爾比為2：1。
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