[發(fā)明專利]一種羊胎盤轉(zhuǎn)移因子溶液的制備方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201310434286.X | 申請日: | 2013-09-23 |
| 公開(公告)號: | CN103463131A | 公開(公告)日: | 2013-12-25 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 楊春輝;李靈娟;柴保國;呂鳳霞;張軍強(qiáng) | 申請(專利權(quán))人: | 河南牧翔動物藥業(yè)有限公司 |
| 主分類號: | A61K35/50 | 分類號: | A61K35/50;A61P37/02 |
| 代理公司: | 鄭州聯(lián)科專利事務(wù)所(普通合伙) 41104 | 代理人: | 田小伍 |
| 地址: | 451162 *** | 國省代碼: | 河南;41 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 種羊 胎盤 轉(zhuǎn)移因子 溶液 制備 方法 | ||
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明屬于生物工程技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一種羊胎盤轉(zhuǎn)移因子溶液的制備方法。
背景技術(shù)
隨著現(xiàn)代化養(yǎng)殖規(guī)模的不斷擴(kuò)大,目前病毒性疾病已成為困擾養(yǎng)殖戶的一大難題,同時(shí),由于各種原因,有時(shí)免疫往往會失敗,爆發(fā)非典型性傳染病,給診斷和治療帶來一定困難,依賴抗生素治療會造成的耐藥菌株的增加和交叉感染的產(chǎn)生,以及藥物殘留的嚴(yán)重爆發(fā)。轉(zhuǎn)移因子作為免疫調(diào)節(jié)劑,在防治疾病方面發(fā)揮重要作用,提高免疫后的免疫效果,有效提高機(jī)體的抗病能力,是未來獸類免疫藥物的發(fā)展方向。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種羊胎盤轉(zhuǎn)移因子溶液的制備方法。
為實(shí)現(xiàn)上述目的,本發(fā)明采用如下技術(shù)方案:
一種羊胎盤轉(zhuǎn)移因子溶液的制備方法,包括以下步驟:
(1)將處理過的羊胎盤與pH為2.5-3.5的純化水按照質(zhì)量比為1∶(1-3)的比例進(jìn)行混合,置于縫隙為8-9μm的膠體磨中研磨得勻漿液,用鹽酸調(diào)節(jié)勻漿液pH為2.5-3.5,再進(jìn)行研磨,得羊胎盤勻漿;
(2)加熱羊胎盤勻漿至78-82℃,保溫時(shí)間不小于10min,冷卻后用NaOH調(diào)節(jié)羊胎盤勻漿pH為6.5-6.8,然后在4000-6000r/min下離心30-45min,取上清液;
(3)用6000道爾頓的超濾膜對上清液進(jìn)行超濾,得羊胎盤轉(zhuǎn)移因子溶液。
上述方法中,步驟(1)所述羊胎盤處理方法為:將冷凍健康的新鮮羊胎盤置于純化水中融化,水溫≤40℃,再用純化水沖洗至無明顯血色,控干水分,剝離脂肪、筋膜及結(jié)締組織后,用純化水漂洗,控干水分。
較好的,步驟(1)中純化水的pH用鹽酸進(jìn)行調(diào)節(jié);羊胎盤和純化水的質(zhì)量比為1∶1。
上述方法步驟(2)中所述NaOH為10wt%的NaOH水溶液,所述加熱在水浴罐中進(jìn)行,冷卻為水浴冷卻,冷卻溫度至25℃。
本發(fā)明方法簡單便捷,可直接從羊胎盤中提取大量的轉(zhuǎn)移因子,并且能夠在常溫下保存,給使用和運(yùn)輸節(jié)約大量的時(shí)間和金錢。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的說明,但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不僅限于此。
實(shí)施例1
(1)取5kg冷凍的新鮮羊胎盤置于40℃純化水中融化,再用純化水沖洗至無明顯血色,控干水分,剝離脂肪、筋膜及結(jié)締組織后,用純化水漂洗3次,控干水分;
(2)將處理過的羊胎盤與pH為3.5的純化水按照質(zhì)量比為1∶3的比例進(jìn)行混合,置于縫隙為9μm的膠體磨中研磨得勻漿液,用30%鹽酸(v/v)調(diào)節(jié)勻漿液pH為3.5,再進(jìn)行研磨一次,得羊胎盤勻漿;
(3)在水浴罐中加熱羊胎盤勻漿至82℃,保溫時(shí)間10min,冷卻后用質(zhì)量濃度為10%的NaOH水溶液調(diào)節(jié)羊胎盤勻漿pH為6.8,然后在6000r/min下離心30min,棄去沉淀,取上清液;
(4)用6000道爾頓的超濾膜對上清液進(jìn)行超濾,得羊胎盤溶液。所得羊胎盤溶液的濃度為18mg/ml。
實(shí)施例2
(1)取10kg冷凍的新鮮羊胎盤置于30℃純化水中融化,再用純化水沖洗至無明顯血色,控干水分,剝離脂肪、筋膜及結(jié)締組織后,用純化水漂洗4次,控干水分;
????????(2)將處理過的羊胎盤與pH為2.5的純化水按照質(zhì)量比為1∶1的比例進(jìn)行混合,置于縫隙為8μm的膠體磨中研磨得勻漿液,用20%鹽酸(v/v)調(diào)節(jié)勻漿液pH為2.5,再進(jìn)行研磨一次,得羊胎盤勻漿;
(3)在水浴罐中加熱羊胎盤勻漿至78℃,保溫時(shí)間20min,冷卻后用質(zhì)量濃度為10%的NaOH水溶液調(diào)節(jié)羊胎盤勻漿pH為6.5,然后在4000r/min下離心45min,棄去沉淀,取上清液;
(4)用6000道爾頓的超濾膜對上清液進(jìn)行超濾,得羊胎盤溶液,該溶液濃度為25mg/ml。
實(shí)施例3
(1)取8kg冷凍的新鮮羊胎盤置于35℃純化水中融化,再用純化水沖洗至無明顯血色,控干水分,剝離脂肪、筋膜及結(jié)締組織后,用純化水漂洗3次,控干水分;
????????(2)將處理過的羊胎盤與pH為3.0的純化水按照質(zhì)量比為1∶2的比例進(jìn)行混合,置于縫隙為8.5μm的膠體磨中研磨得勻漿液,用25%鹽酸(v/v)調(diào)節(jié)勻漿液pH為3.0,再進(jìn)行研磨一次,得羊胎盤勻漿;
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