[發明專利]一種腫瘤壞死因子相關凋亡配體融合蛋白及其制法和用途

有效

• 申請號: 201310432137.X
• 申請日: 2013-09-22
• 公開（公告）號: CN104177500B
• 公開（公告）日: 2018-05-25
• 發明（設計）人: 華子春;邱樊;胡敏進
• 申請（專利權）人: 江蘇靶標生物醫藥研究所有限公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;C12N15/63;C12N1/21;C12P21/02;A61K47/62;A61K38/17;A61P35/00;C12R1/19
• 代理公司: 常州佰業騰飛專利代理事務所(普通合伙) 32231
• 代理人: 金輝

本發明屬生物技術領域，具體公開了一種腫瘤壞死因子家族細胞凋亡蛋白融合蛋白及其制法和用途。該融合蛋白是由膜聯蛋白、連接肽、腫瘤壞死因子家族細胞凋亡蛋白組成的，通過克隆構建該融合蛋白的編碼基因。該腫瘤壞死因子家族細胞凋亡蛋白融合蛋白具有顯著增強的誘導細胞凋亡的效果，能夠使得誘導對細胞凋亡不敏感的腫瘤細胞凋亡，能夠降低獲得治療效果所需要的蛋白給藥劑量。

技術領域

本發明屬生物技術領域，涉及一種腫瘤壞死因子相關凋亡配體融合蛋白及其制法和用途。

背景技術

癌癥是世界上導致死亡的第二大因素。目前治療癌癥的方法除手術外，主要是化療和放療，但這兩種方法缺乏特異性，具有明顯的細胞毒性。理想的抗腫瘤藥物是能選擇性地殺死腫瘤細胞而不傷害正常細胞。許多化療藥物是通過誘導凋亡來殺死腫瘤細胞的，腫瘤細胞也會通過產生抑制凋亡的機制而導致化療的失敗。因此，凋亡通路成為研制抗腫瘤藥物的最具吸引力的靶點。

自從Aggarwal等人1984年分離并鑒定出首個腫瘤壞死因子（TNF）至今，這個蛋白家族已有19名成員。腫瘤壞死因子家族成員通過與其受體家族--腫瘤壞死因子受體家族相互作用，發揮重要生理作用。腫瘤壞死因子及其受體家族系統在自身免疫性疾病、細菌和病毒感染、腫瘤、糖尿病、骨質疏松等多種疾病的發生與發展中起關鍵作用。因此，大部分腫瘤壞死因子及其受體家族成員被作為多種疾病的藥物靶點進行廣泛開發。美國食品藥品管理局（FDA）已批準5種TNF阻斷劑藥物上市銷售，主要用于關節炎、牛皮癬、克羅恩病等炎癥和自身免疫疾病治療，其中有三種藥物的銷售額已躋身于美國“重磅炸彈”（年銷售額過10億美元）行列，成為最成功的生物技術類藥物之一。2010年11月FDA批準腫瘤壞死因子家族成員之一-RANKL的人源化抗體（Xgeva）用于防治腫瘤轉移相關的骨破壞病癥；近期，FDA又批準另外一種腫瘤壞死因子家族成員BAFF的中和抗體（Benlysta）用于系統性紅斑狼瘡（SLE）治療。另外，還有多種腫瘤壞死因子及其受體家族成員相關藥物正處于不同的臨床試驗階段。腫瘤壞死因子及其受體家族成為藥物開發中的明星家族，相信不久的將來會有更大的發展。腫瘤壞死因子及其受體家族成員中，大部分腫瘤壞死因子家族成員均可以表達為Ⅱ型跨膜蛋白，包括氨基端的胞內區、跨膜區、羧基端的胞外區三部分。腫瘤壞死因子家族成員的胞外區結構比較類似，都是由多條反向平行的β折疊片層組成典型的β蛋卷結構，在與受體結合的幾個區域，氨基酸序列比較保守。大部分跨膜型TNF家族成員胞外區可以被特定的酶水解產生可溶性蛋白；可溶性與膜結合型TNF家族成員與受體結合能力相似，但是可以激活不同的信號途徑，介導不同的生理與病理作用。

到目前為止，大約有19種腫瘤壞死因子超家族的成員被克隆出來，有部分已經作為藥物使用如TNFα，TNFβ，大部分還處于臨床階段，如FasL、TRAIL、TWEAK、RANKL等。其中，大部分腫瘤壞死因子家族成員（例如，FasL、TNF、TRAIL等）都是通過誘導細胞凋亡發揮其生物學及其治療功能。以下僅以腫瘤壞死因子相關凋亡配體為例，說明腫瘤壞死因子家族成員誘導細胞凋亡的作用、應用及其面臨的問題。