[發(fā)明專利]豆蚜特異性SS-COI引物、含有該引物的試劑盒及其檢測(cè)方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310429628.9
• 申請(qǐng)日: 2013-09-18
• 公開（公告）號(hào): CN103468677A
• 公開（公告）日: 2013-12-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王倩;楊帆;陸宴輝;楊益眾
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所
• 主分類號(hào): C12N15/11
• 分類號(hào): C12N15/11;C12Q1/68
• 代理公司: 北京路浩知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君

1.豆蚜特異性SS-COI引物，其特征在于，其包括：

正向引物L(fēng)FAcF：5'-CAAACAATATTGCTCATAATAAC-3’

反向引物L(fēng)FAcR：5’-AAAATTAATAATATAGCTGTAATTAGG-3’。

2.含有權(quán)利要求1所述引物的用于檢測(cè)豆蚜的試劑盒。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括dNTPs、Taq?DNA聚合酶、Mg²⁺、PCR反應(yīng)緩沖液中的至少一種。

4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括標(biāo)準(zhǔn)陽性模板。

5.權(quán)利要求1所述引物或權(quán)利要求2-4任一項(xiàng)所述試劑盒在檢測(cè)豆蚜中的應(yīng)用。

6.豆蚜的特異性PCR檢測(cè)方法，其特征在于，包括以下步驟：

1）提取樣品DNA；

2）以步驟1）提取的DNA為模板，利用權(quán)利要求1所述的引物L(fēng)FAcF和LFAcR進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)；

3）分析PCR產(chǎn)物。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，PCR反應(yīng)體系以20μl計(jì)為：

8.根據(jù)權(quán)利要求6或7所述的方法，其特征在于，PCR反應(yīng)條件為：94℃4分鐘；94℃30秒，54℃30秒，72℃30秒，共45個(gè)循環(huán)；72℃1秒。