[發明專利]鉑類配合物、由該鉑類化合物制得的蛋白質復合物及其制備方法

有效

• 申請號: 201310428915.8
• 申請日: 2013-09-18
• 公開（公告）號: CN103554187A
• 公開（公告）日: 2014-02-05
• 發明（設計）人: 王震;劉揚中;師紅東;程芹芹;張文星
• 申請（專利權）人: 中國科學技術大學
• 主分類號: C07F15/00
• 分類號: C07F15/00;A61K47/48;A61K31/555;A61P35/00
• 代理公司: 北京維澳專利代理有限公司 11252
• 代理人: 吉海蓮;王立民

技術領域

本發明屬于蛋白藥物制劑領域，具體涉及蛋白藥物及其制備方法，具體涉及天青蛋白和一類四價鉑類配合物，所述的天青蛋白在其銅結合位點上有一個組氨酸被突變，所用的鉑配合物含有一個咪唑基團，二者通過配位結合構建成為蛋白復合物。?

背景技術

癌癥歷來是不治之癥的代名詞。21世紀以來，隨著工業化的發展，人類的生存環境在不斷的惡化，而癌癥患者的數量也逐年遞增。2010年國際抗癌聯盟在第21屆世界抗癌大會上發布的數據表明，2008年，全世界有1270萬人患癌癥，而且死亡人數高達760萬，占當年全世界死亡人數的13%。在我國，每年約新增220萬癌癥患者，而有130萬人死于癌癥。癌癥以代替心血管疾病成為我國奪取人民生命的第一殺手。?

鉑類化合物是目前臨床治療癌癥的主要藥物，目前主要用于臨床治療的是二價鉑類配合物，如順鉑、卡鉑、奧沙利鉑等，但其對機體的毒副作用和耐藥性等問題仍有待解決。而四價鉑類化合物也因為對機體的毒副作用小、脂溶性增加被廣泛關注。順式-二氯-反式-二乙酰基-氨-甲胺合鉑（Ⅳ）（JM216），及JP-A61-33192，JP-A-61-7283，JP-A-1-294684中提到的四價鉑都具有優秀的水溶性和低腎毒性，然而其抗腫瘤效果并不是很令人滿意，所以需要尋找新的途徑。?

細菌蛋白作為潛在的抗癌藥物如今也漸漸變熱，天青蛋白是其中的熱點之一。繼2002年，美國伊利諾斯大學Yamada等發現其對于腫瘤細胞生長的抑制以來，引起了科學界的廣泛關注。目前已經發現了其對于多種腫瘤細胞（MCF-7、J774、U2OS?cells等）具有抑制細胞生長的作用，而對于相應的正常細胞沒有類似作用。而本專利描述的就是細菌蛋白天青蛋白的一個突變體與?一類配基含有咪唑環的四價鉑類配合物通過配位結合形成的一類藥物。?

發明內容

為了解決上述問題，本發明的目的是通過細菌蛋白天青蛋白的一類突變體與一類配基含有咪唑環的四價鉑類配合物通過配位結合形成的一類復合物，使之具有二者共同的優點，希望該復合物在增加了天青蛋白的腫瘤細胞殺傷能力同時，又減少四價鉑類配合物對正常細胞的毒副作用。?

為了實現本發明的目的，首先，本發明提供了一種鉑類配合物，其結構式如下：?

其中，兩個R₁配體可以相同也可以不同，其通過氮原子與Pt原子配位，所述R₁為氨（NH₃）或者取代胺；兩個L配體可以相同也可以不同，其選自鹵素、羧酸根或者取代羧酸根；所述R₂為含有咪唑基團的取代基。?

其中，所述取代胺為一乙基胺、二乙基胺、一正丙基胺、二正丙基胺、一異丙基胺、二異丙基胺、一正丁基胺、二正丁基胺、一異丁基胺、二異丁基胺、一正戊基胺、二正戊基胺、一異戊基胺、二異戊基胺或環己二胺；所述鹵素選自Cl、Br或I；所述羧酸根為乙酸根、丙酸根、正丁酸根、丁二酸根、苯甲酸根、苯乙酸根或對甲基苯甲酸根；所述取代羧酸根為一氯乙酸根、二氯乙酸根或三氯乙酸根；所述取代基包括C(O)NHCH(COOH)CH₂-Im或(CH₂)_n-Im，其中n=1-6，Im為咪唑基團。?

進一步地，本發明提供了一種蛋白復合物，其用天青蛋白突變體作為藥物載體，將含有咪唑環的鉑類配合物的配體與該天青蛋白突變體配位結合得到；其中，所述天青蛋白突變體具有如SEQ?ID?NO:1所示的氨基酸序列，或其具有等同生物學活性的片段或其保守性變體或衍生物。?

進一步地，本發明還提供了一種天青蛋白突變體，其具有如SEQ?ID?NO:1所示的氨基酸序列，或其具有等同生物學活性的片段或其保守性變體或衍生物。?

所述天青蛋白突變體是將其銅結合位點的一個組氨酸突變為甘氨酸或丙?氨酸。此處所用的術語“具有等同生物學活性的片段”或其“保守性變體”是指所述片段分別不同于SEQ?ID?NO：1所述的氨基酸序列，但保留了所述氨基酸的基本特性，如基本的生物特性、結構特性、調節特性或生化特性。通常，所述氨基酸水平上的差異是有限的，以使參考多肽之序列與其保守性變體總體上非常相似，并且在許多區域是相同的。保守性變體與參考多肽氨基酸序列上的差異可以是ー個或多個性質相同或相似的氨基酸的保守性替換、插入和刪除。替換或插入的氨基酸殘基可由遺傳密碼編碼，也可不由遺傳密碼編碼。多核苷酸或多肽的變體可以自然產生（如等位基因變體），或者它可以是非自然產生的變體。多核苷酸和多肽之非自然產生的變體可通過誘變技術或直接合成而產生。?