[發明專利]液-質聯用快速檢測瘦肉精含量的方法及樣品前處理方法

有效

• 申請號: 201310412191.8
• 申請日: 2013-09-11
• 公開（公告）號: CN103472160A
• 公開（公告）日: 2013-12-25
• 發明（設計）人: 嚴華;張朝暉;劉鑫;李建輝;云環;崔鳳云
• 申請（專利權）人: 北京出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術中心
• 主分類號: G01N30/08
• 分類號: G01N30/08;G01N30/14;G01N30/02
• 代理公司: 北京三聚陽光知識產權代理有限公司 11250
• 代理人: 彭秀麗

1.一種液-質聯用快速檢測瘦肉精含量的樣品前處理方法，其特征在于，包括下列步驟：

（1）取待檢測樣品，順序加入足量或過量水和有機提取液對所述待測樣品含有的β-受體激動劑進行提取；

（2）向提取后的混合液中加入除水劑和鹽析劑并混合均勻，離心分層后，收集上層有機提取液得第一上清液；

（3）在所述第一上清液中加入吸附劑進行凈化，離心得第二上清液；

（4）將所述第二上清液經濃縮、復溶、過濾步驟，得到所需的待測樣液。

2.根據權利要求1所述的液-質聯用快速檢測瘦肉精含量的樣品前處理方法，其特征在于，所述步驟（1）中，所述有機提取液為乙腈或酸化乙腈。

3.根據權利要求1或2所述的所述的液-質聯用快速檢測瘦肉精含量的樣品前處理方法，其特征在于，所述步驟（2）中，所述除水劑包括無水MgSO₄和/或無水Na₂SO₄，所述鹽析劑包括NaCl、NaAc、KCl中的一種或其任意混合。

4.根據權利要求1-3任一所述的液-質聯用快速檢測瘦肉精含量的樣品前處理方法，其特征在于，所述除水劑的添加量與所述動物源食品樣品的質量比為1:3-2:1。

5.根據權利要求1-4任一所述的液-質聯用快速檢測瘦肉精含量的樣品前處理方法，其特征在于，所述鹽析劑的添加量與所述動物源食品樣品的質量比為1:6-1:1。

6.根據權利要求1-5任一所述的液-質聯用快速檢測瘦肉精含量的樣品前處理方法，其特征在于，所述步驟（3）中，所述吸附劑為粒徑40-60μm的C18吸附劑；所述吸附劑的添加量與所述動物源食品樣品的質量比為0.05:1-0.2:1。

7.根據權利要求1-6任一所述的液-質聯用快速檢測瘦肉精含量的樣品前處理方法，其特征在于，所述復溶步驟是采用乙腈和0.1%的甲酸水溶液的混合液進行的，所述乙腈與所述甲酸溶液的體積比為1:9-3:7。

8.根據權利要求1-7任一所述的液-質聯用快速檢測瘦肉精含量的樣品前處理方法，其特征在于，所述β-受體激動劑包括溴布特羅、克倫潘特、班布特羅、克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇、賽布特羅、西馬特羅、苯氧丙酚胺、馬賁特羅、氯丙那林、馬布特羅、特布他林、妥布特羅、非諾特羅中的一種或幾種的混合物。

9.一種液-質聯用快速檢測瘦肉精含量的方法，其特征在于，包括如下步驟：

（a）按照權利要求1-8任一所述的方法對所述動物源食品樣品進行前處理，得到所需的待測樣液；

（b）采用超高效液相色譜-三重四級桿質譜聯用儀對所述待測樣液進行β-受體激動劑檢測；

所述高效液相色譜的檢測條件為：

色譜柱：Waters?ACQUITY?UPLC?HSS?T3?2.1×150mm，1.8μm；

柱溫：30℃；

流動相A：0.1%的甲酸水溶液，流動相B：乙腈；

流速：0.25mL/min；

進樣量：10μL；

洗脫方式：梯度洗脫；

所述三重四級桿質譜的檢測條件為：

質量分析器：三重四級桿；

離子源：ESI⁺；

毛細管電壓：4kV；

錐孔電壓：25V；

離子源溫度：150℃；

脫溶劑溫度：400℃；

中心氣體流速：50L/Hr；

脫溶劑氣體流速：800L/Hr；

碰撞氣流速：0.15mL/min。

10.根據權利要求9所述的液-質聯用快速檢測瘦肉精含量的方法，其特征在于，所述高效液相色譜的梯度洗脫程序為：