[發明專利]6聾病易感基因位點分型/突變比例檢測試劑盒

有效

• 申請號: 201310410781.7
• 申請日: 2013-09-11
• 公開（公告）號: CN103436625A
• 公開（公告）日: 2013-12-11
• 發明（設計）人: 步迅;夏子芳;劉艷艷;張全芳
• 申請（專利權）人: 步迅;夏子芳
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;G01N21/64
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.6聾病易感基因位點分型／突變比例檢測試劑盒，其特征在于包括擴增試劑和一系列標準品；所述擴增試劑包括：PCR緩沖液、MgCl₂和dNTPs的反應混合物，Taq酶，超純水，高特異性擴增GJB2：235delC、299delAT，SLC26A4：2168A>G、IVS7-2A>G，線粒體12SrDNA：1494C>T、1555A>G的引物混合物，對上述位點進行特異性檢測的探針混合物，對人基因組DNA進行檢測的通用探針混合物；所述一系列標準品包括：235delC分型標準品、299delAT分型標準品、2168A>G分型標準品、IVS7-2A>G分型標準品、1494C>T突變比例標準品、1555A>G突變比例標準品。

2.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于：

用于GJB2：235delC、299delAT，SLC26A4：2168A>G、IVS7-2A>G，線粒體12SrDNA：1494C>T、1555A>G檢測的引物為：

SEQ?NO.1：5’-GTAAGTTGGGTGCTTTGTGTTAAG-3’

SEQ?NO.2：5’-GCCCTGAAGCGCGTACA-3’；

SEQ?NO.3：5’-TGGGATGGATTTAACAATGCC-3’

SEQ?NO.4：5’-GTTAGAAAGTTCAGCATTATTTGGTTG-3’；

SEQ?NO.5：5’-AATGGAACCTTGACCCTCTTGA-3’

SEQ?NO.6：5’-TGTGAIAGAAAAGCTGGAGCAATG-3’；

SEQ?NO.7：5’-ACGTGTGCTACGATCACTACTTCC-3’

SEQ?NO.8：5’-CTCCTCGATGTCCTTAAATTCACTC-3’；

用于線粒體12SrDNA1555A>G突變檢測的探針為：

SEQ?NO.9：5’-AGTACACTTACCATGTTACGACTTGCCTCCTC-3’

用于線粒體12SrDNA1494C>T突變檢測的探針為：

SEQ?NO.10：5’-GTGAAGTAIACTTGAGGAGaGTGACGGGAC-3’；

用于GJB2：235delC、299delAT，SLC26A4：2168A>G、IVS7-2A>G突變檢測的探針為：

SEQ?NO.11：5’-AAATGGCAGTAGCAATTATCGTCCGAA-3’

SEQ?NO.12：5’-CTTGGTTCTGTAGAIAGAGTATAGCATCACGGAC-3’；

SEQ?NO.13：5’-ACATCCGGCTATGGGCCTGC-3’

SEQ?NO.14：5’-CCTTGATGAACTTCCTCTTCTTCTCGTCTC-3’；

用于對人基因組DNA進行檢測的通用探針為：

SEQ?NO.15：5’-GAATGTGTCCTTTCTAATGTTGTCGTC-3’；

其中LNA核苷以黑體字表示。

3.根據權利要求1或2所述的試劑盒，其特征在于：所述的用于GJB2：235delC、299delAT，SLC26A4；2168A>G、IVS7-2A>G，線粒體12SrDNA：1494C>T、1555A>G突變檢測的探針，每條探針的5’端和3’端均進行熒光染料標記，5’端為發光基團和3’端為淬滅基團。

4.根據權利要求1或2所述的試劑盒，其特征在于：所述用于對GJB2：235delC、299delAT，SLC26A4：2168A>G、IVS7-2A>G，線粒體12SrDNA：1494C>T、1555A>G突變進行特異性檢測的探針，對人基因組DNA進行檢測的通用探針被分為四組，分別采用四種不同的發光基團對各組探針的5’端進行標記，3’端的淬滅基團可以為相同或不同的熒光染料。