[發明專利]一種基于氨基酸的煙草代謝組學中新鮮煙葉樣品質量的判別方法

有效

• 申請號: 201310401114.2
• 申請日: 2013-09-05
• 公開（公告）號: CN104422741A
• 公開（公告）日: 2015-03-18
• 發明（設計）人: 許國旺;張俊杰;路鑫;趙春霞;常玉瑋;趙燕妮;沈丹紅
• 申請（專利權）人: 中國科學院大連化學物理研究所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 沈陽科苑專利商標代理有限公司 21002
• 代理人: 劉陽

1.一種對代謝組學研究中的煙草鮮葉樣本質量進行判別的方法，其特征在于：通過檢測煙草鮮葉中谷氨酸與谷氨酰胺含量，計算其比值，對代謝組學研究中的煙草鮮葉樣本質量進行判別。

2.根據權利要求1所述判別方法，其特征在于：其具體方法為：將煙草鮮葉中加入含內標的提取溶劑，提取后離心過濾，采用6-氨基喹啉-N-琥珀酰亞胺甲酯(AQC)衍生后，利用超高效液相色譜-單四級桿質譜（UPLC-SQDMS）進行分析，通過標準曲線計算得出谷氨酰胺和谷氨酸的含量。

3.根據權利要求2所述判別方法，其特征在于：所述內標為降纈氨酸，其含量為5mg/L，所述提取溶劑為含乙醇70%的水溶液；所述煙草鮮葉與含內標的提取溶劑按質量/體積比加入量為=35:1-3。

4.根據權利要求1所述判別方法，其特征在于：超高效液相色譜-單四級桿質譜（UPLC-SQDMS）的條件為：色譜柱Waters?UPLC?C18column；流動相A：20mM甲酸銨，0.5%甲酸，1%乙腈，98.5%水，流動相B：1.6%甲酸，98.4%乙腈（v/v）；流速：0.35mL/min；柱溫：55℃；進樣體積：1μL；進樣器溫度：15℃；洗脫梯度為：0-1.08min，0.1%-0.1%B；1.08-11.48min，0.1%-9.1%B；11.48-16.3min，9.1%-21.2%B；16.3-16.9min，21.2%-59.6%B；16.9-18.1min，59.6%-59.6%B；18.1-18.28min，59.6%-0.1%B，18.28-20min，0.1%-0.1%B；質譜方法：ESI正離子模式下，分段SIR掃描，毛細管電壓：3KV，錐孔電壓：30V，脫溶劑氣溫度：300℃，錐孔溫度：120℃，脫溶劑氣流量：650L/h，錐孔氣流量：50L/h。

5.根據權利要求1所述判別方法，其特征在于：所述煙草鮮葉是經-196℃液氮罐保存運輸，液氮冷凍研磨，凍干，-80℃冰箱保存待用。

6.根據權利要求1所述判別方法，其特征在于：以谷氨酸與谷氨酰胺含量的比值為指標，建立區分代謝組學正常樣本、部分褐化及褐化樣本的標準，即待測樣本中谷氨酸與谷氨酰胺比值在0.67以上的為合格樣本，用于煙草代謝組學分析；谷氨酸與谷氨酰胺比值在0.12以下的為變質的不合格樣本，谷氨酸與谷氨酰胺比值介于0.12與0.67之間為部分質變的不合格樣本。