[發明專利]一種用于鑒別泡菜生花病害菌的微生物純化方法

無效

• 申請號: 201310395801.8
• 申請日: 2013-08-30
• 公開（公告）號: CN104419655A
• 公開（公告）日: 2015-03-18
• 發明（設計）人: 張政
• 申請（專利權）人: 張政
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及食品病害微生物鑒別技術領域，具體是提供一種簡單且準確的用于鑒別泡菜生花病害茵的微生物純化方法。

背景技術

泡菜，是指經過發酵的蔬菜，古稱葅。我國泡菜歷史悠久，流傳廣泛，我國最早的詩集《詩經》中有“中田有廬，疆場有瓜是剝是菹，獻之皇祖”的詩句。廬和瓜是蔬菜，“剝”和“菹”是腌漬加工的意思。據漢許慎《說文解字》解釋“菹菜者，酸菜也”。說明至遲在3100多年前的商代武丁時期，我國勞動人民就能用鹽來漬梅烹飪用。由此可見，我國的鹽漬菜應早于《詩經》，應起源于3100年前的商周時期。

一般來說，只要是纖維豐富的蔬菜或水果，都可以被制成泡菜，是一種既營養又衛生的蔬菜加工品。因為泡菜的主要原料是各種蔬菜，維生素及鈣、鐵、磷等礦物質含量豐富，其中豆類還含有豐富的全價蛋白質。在泡制過程中，蔬菜的溫度一直保持在常溫下，蔬菜中的維生素C和B族維生素不會受到破壞，因此，泡菜比起炒菜來營養價值更高。泡菜富含乳酸，一般為0.4％～0.8％，可刺激消化腺分泌消化液，幫助食物的消化吸收。同時，發酵生成的左旋乳酸易被人體利用。泡菜中的乳酸菌群可抑制多種病原菌的生長繁殖，如痢疾桿菌在泡菜中經3～6小時、霍亂菌經1～2小時、傷寒菌經2～9小時均能被殺滅。新鮮蔬菜上所沾附的蛔蟲卵，在密封的泡菜壇內也會因缺氧窒息死亡。因此，常吃泡菜可以增加腸胃中的有益菌，抑制腸道中的致病菌，降低患胃腸道疾病的幾率，增加身體抵抗力。此外，蔬菜中含有一定量的蛋白質，在加工泡菜過程中，蛋白質由于受到微生物和蛋白質水解酶的作用，逐漸被分解為小分子多肽物質直至氨基酸。這是一種重要的生物化學變化，使腌制品不僅產生一定的光澤、香氣和風味，還促進了營養物質的吸收，增加了食物的營養價值。因而泡菜既能為人體提供充足的營養，又能預防動脈硬化等疾病。

泡菜以其獨特的風味以及豐富的營養價值，受到世界各地越來越多人們的喜愛。但由于各種原因，我國泡菜出口總額還比較低，其中影響最大的是泡菜生產的工業化改造技術還不夠成熟，工業化生產出來的泡菜質量不及傳統法生產出來的泡菜，而工業化生產泡菜過程中“生花”的侵害最大，給泡菜質量和產量帶來的損失也是最大。

在泡菜生產過程中常常易出現“生花”病害也叫產膜，俗稱“臭風”，會散發一種令人不愉悅的氣味，而且會產生澀味，使受侵害泡菜口感和營養價值比正常發酵泡菜差很多。常出現在啤酒、醬油、果汁、葡萄酒及泡菜的生產過程中。主要是由氧化性酵母(包括假絲酵母和畢氏酵母等)所引起的，同時還附帶產生不愉快氣味。目前，國內外還沒有學者對泡菜“生花”現象進行比較系統的研究。在工業化生產中，鑒別生花泡菜的方法只能單純依靠工人的經驗人工進行粗略的鑒定和分離。如何在鑒別泡菜是否受到生花病害菌污染的過程中對待鑒定的生花病害疑似菌準確地提取出來并在較大程度上剔除影響鑒定的雜菌，將疑似菌進行純化用于進一步鑒定是加工技術的一個重要待解決問題。

因此提供一種簡單且準確的用于鑒別泡菜生花病害菌的微生物純化方法，幫助工人避免“生花”病原菌對泡菜生產帶來的不利影響，也為其它農產品深加工中類似問題提供參考。

發明內容

針對現有生產存在的技術問題，本發明的目的是提供一種操作簡單、安全可靠、成本低廉的用于鑒別泡菜生花病害菌的微生物純化方法。

本發明采用傳統微生物鑒定方法對泡菜“生花”病害微生物進行挑取，并進一步對挑取得到的產物進行培養純化。具體技術方案為一種用于鑒別泡菜生花病害菌的微生物純化方法，其特征在于包括步驟：

1)取樣接種：取出現“生花”現象的泡菜液液面上層白色物質作為樣品，接種于培養基上，置于31～35℃恒溫培養箱中恒溫培養6～7d，觀察菌落生長狀況；

2)分選純化：將培養后的疑似菌單菌落接種培養于新的培養基上，重復5～6次進行純化；

3)取菌：挑取病害菌純培養物，以備用于進一步鑒定。

本發明通過對疑似生花病害微生物接種培養，利用不同種類的微生物不同的生長特性和菌落特征得以將目標病害疑似菌挑取出來，并多次重復純化過程從而達到將雜菌剔除，獲得待鑒定目標病害疑似菌的純培養物。本發明方法具有實驗簡單、成本低廉、易操作實施、重復性好等優點。

附圖說明

圖1是本發明用于鑒別泡菜生花病害菌的微生物純化方法步驟示意圖；

具體實施方式

以下將結合具體實施例和說明書附圖對本發明做進一步詳細說明。

實施例1

試驗原料和試劑

1)泡菜疑似菌：出現“生花”現象的泡菜液中取液面上層白色物質；