[發明專利]25羥-維生素D3定量免疫層析檢測試劑卡及其制備方法

無效

• 申請號: 201310394860.3
• 申請日: 2013-09-03
• 公開（公告）號: CN103439519A
• 公開（公告）日: 2013-12-11
• 發明（設計）人: 葉濤
• 申請（專利權）人: 天津朗賽生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/82
• 分類號: G01N33/82;G01N33/531;G01N33/532
• 代理公司: 天津市宗欣專利商標代理有限公司 12103
• 代理人: 董光仁

技術領域

本發明涉及維生素免疫化學試驗物質的制備，具體是一種25羥維生素D3定量免疫層析檢測試劑卡及其制備方法。

背景技術

維生素D是環戊烷多氫菲類化合物，可由維生素D原經紫外線270~300nm激活形成。動物皮下7-脫氫膽固醇，酵母細胞中的麥角固醇都是維生素D原，經紫外線激活分別轉化為維生素D3及維生素D2。維生素D的最大吸收峰為265nm，從食物中得來的維生素D，與脂肪一起吸收，吸收部位主要在空腸與回腸。膽汁幫助其吸收。脂肪吸收受干擾時，如慢性胰腺炎、脂肪痢及膽道阻塞都會影響吸收。吸收的維生素D與乳糜微粒相結合，由淋巴系統運輸。當維生素D運到肝臟中，在微粒體中經單氧酶系統作用，將其25位羥基化形成25（OH）維生素D3，肝外的其他組織也可吸取維生素D及25（OH）D3，因此組織中維生素D及25（OH）D3及其總量比維生素D血漿中多，如果靶組織需要，可將其釋放出來，他們在脂肪組織中最多，釋放速度最慢，當體重減輕，脂肪減少時，他們也可釋放出來。25-羥基維生素D3在腎線粒體單氧酶作用下（酶系統包括細胞色素p450、鐵硫蛋白及黃素蛋白），經羧基化，轉變為1，25（OH）-D3，這是維生素D的生物作用形式，現將其作為激素看待，其作用方式與其他固醇類激素相似。

維生素D缺乏會導致少兒佝僂病和成年人的軟骨病。癥狀包括骨頭和關節疼痛，肌肉萎縮，失眠，緊張以及痢疾腹瀉。維生素D主要用于組成和維持骨骼的強壯。它被用來防治兒童的佝僂病和成人的軟骨癥，關節痛等等?；加泄琴|疏松癥的人通過添加合適的維生素D和鎂可以有效的提高鈣離子的吸收度。除此以外，維生素D還被用于降低結腸癌、乳腺癌和前列腺癌的機率，對免疫系統也有增強作用。

測定血液中25-羥基維生素D3能反應機體的維生素D狀況，以為利于后續的干預治療。由于維生素D是小分子物質，采用免疫學方法檢測最佳的方法為競爭抑制法。目前，市場上已有采用化學發光等方法檢測25-羥基維生素D3的試劑卡出現，然而，運用膠體金免疫層析技術定量檢測25-羥基維生素D3的試劑尚為空白。

發明內容

本發明是為了解決應用免疫層析膠體金法檢測人血液中25-羥基維生素D3的技術問題，而提供一種25-羥基維生素D3定量免疫層析檢測試劑卡及其制備方法。???

實現本發明的原理如下：利用膠體金標記抗體，在檢測試紙條的NC膜上包被配對抗原。檢測時當樣品中含相應的抗原時，膠體金標記的抗體和樣品中相應抗原相結合形成復合物，然后在NC膜上層析，再遇到包被抗原時，不會和包被的抗原結合或僅部分結合，不形成肉眼可見的或僅形成強度減弱的T線，在一定的條件下，T線的強弱和樣品中的濃度呈負相關。采用專用的免疫層析結果判讀記錄儀可以實現定量檢測。

本發明是按照以下技術方案實現的。

一種25-羥基維生素D3定量免疫層析檢測試劑卡，包括依次形成有稀釋液孔、加樣孔和觀察窗的盒蓋，盒體內底部形成的檢測試紙條架一端形成有端護欄，另一端形成有側護欄，盒蓋底面形成的插突起與盒體的插孔柱插接結合；以及沿檢測試紙條架長度方向平鋪的檢測試紙條，檢測試紙條的塑料基板兩端分別設置的樣品墊和吸樣墊，而樣品墊和吸樣墊之間依次設置有膠體金標記25-羥基維生素D3抗體的膠體金墊，分別包被有25-羥基維生素D3-偶聯蛋白的T線和抗鼠IgG的C線的NC膜。

一種25-羥基維生素D3定量免疫層析檢測試劑卡的制備方法，包括依次形成有稀釋液孔、加樣孔和觀察窗的盒蓋，盒體內底部形成的檢測試紙條架一端形成有端護欄，另一端形成有側護欄，盒蓋底面形成的插突起與盒體的插孔柱插接結合；以及沿檢測試紙條架長度方向平鋪的檢測試紙條，檢測試紙條的塑料基板兩端分別設置有樣品墊和吸樣墊，而樣品墊和吸樣墊之間依次設置有含有膠體金標記的25-羥基維生素D3抗體的膠體金墊，分別包被有25-羥基維生素D3-偶聯蛋白的T線和抗鼠IgG的C線的NC膜；

所述樣品墊和吸樣墊之間依次設置有含有膠體金標記的25-羥基維生素D3抗體的膠體金墊，分別包被有25-羥基維生素D3-偶聯蛋白的T線和抗鼠IgG的C線的NC膜，其中：