[發(fā)明專利]應用于小麥成熟胚培養(yǎng)的干胚游離方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201310364141.7 | 申請日： | 2013-08-19 |
| 公開（公告）號： | CN103436484A | 公開（公告）日： | 2013-12-11 |
| 發(fā)明（設計）人： | 解超杰;孫其信;倪中福;梁榮奇;李映輝;沈紅霞;彭福祥;宋娜;耿妙苗 | 申請（專利權）人： | 中國農業(yè)大學 |
| 主分類號： | C12N5/04 | 分類號： | C12N5/04;A01H4/00;A01H5/00 |
| 代理公司： | 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245 | 代理人： | 關暢 |
| 地址： | 100193 *** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 應用于 小麥 成熟 培養(yǎng) 游離 方法 | ||
1.一種禾本科植物的取胚方法，包括如下步驟：將禾本科植物的籽粒打碎，先過9目網篩去除大顆粒，再過30目網篩去除小顆粒，從粒度介于9目篩和30目篩之間的顆粒中挑取1-2mm的胚組織。
2.如權利要求1所述的方法，其特征在于：所述禾本科植物為小麥。
3.權利要求1所述方法在制備禾本科植物的愈傷組織中的應用。
4.如權利要求3所述的應用，其特征在于：所述禾本科植物為小麥。
5.一種制備禾本科植物的愈傷組織的方法，包括如下步驟：
（1）將禾本科植物的籽粒打碎，先過9目網篩去除大顆粒，再過30目網篩去除小顆粒，從粒度介于9目篩和30目篩之間的顆粒中挑取胚組織；
（2）將步驟（1）得到的胚組織用水洗滌，然后用2.5g/100ml次氯酸鈉水溶液消毒1分鐘，然后用水洗滌；
（3）將權利要求（2）得到的胚組織接種至誘導培養(yǎng)基并進行暗培養(yǎng)，得到愈傷組織。
6.如權利要求5所述的方法，其特征在于：所述禾本科植物為小麥。
7.權利要求1所述方法在禾本科植物的遺傳轉化中的應用。
8.如權利要求7所述的應用，其特征在于：所述禾本科植物為小麥。
9.一種制備轉基因禾本科植物的方法，包括如下步驟：
（1）將禾本科植物的籽粒打碎，先過9目網篩去除大顆粒，再過30目網篩去除小顆粒，從粒度介于9目篩和30目篩之間的顆粒中挑取胚組織；
（2）將步驟（1）得到的胚組織用水洗滌，然后用2.5g/100ml次氯酸鈉水溶液消毒1分鐘，然后用水洗滌；
（3）將權利要求（2）得到的胚組織進行愈傷誘導培養(yǎng)，得到愈傷組織；
（4）將步驟（3）得到的愈傷組織進行高滲培養(yǎng)，然后用基因槍轟擊攜帶目的基因的重組表達載體，然后進行恢復培養(yǎng)；
（5）取完成步驟（4）的愈傷組織，采用0.75mg/L草甘膦進行篩選培養(yǎng)，然后在0.75mg/L草甘膦濃度下進行分化培養(yǎng)；
（6）取步驟（5）得到的再生苗，在0.75mg/L草甘膦濃度下進行生根壯苗培養(yǎng)。
10.如權利要求9所述的方法，其特征在于：所述禾本科植物為小麥。
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