[發明專利]一株Ming氏人浸潤型胃癌細胞系及其應用

有效

• 申請號: 201310349108.7
• 申請日: 2013-08-12
• 公開（公告）號: CN103396994A
• 公開（公告）日: 2013-11-20
• 發明（設計）人: 蔡建春;彭積貴;徐浩;駱啟聰
• 申請（專利權）人: 廈門大學附屬中山醫院
• 主分類號: C12N5/09
• 分類號: C12N5/09;C12Q1/02;A01K67/027
• 代理公司: 廈門南強之路專利事務所(普通合伙) 35200
• 代理人: 馬應森

技術領域

本發明涉及微生物動物細胞系，尤其是涉及一種Ming氏人浸潤型胃癌細胞系及其應用。

背景技術

胃癌是最常見的惡性腫瘤之一，在全世界范圍內，胃癌的發病率居所有惡性腫瘤第四位，死亡率居第二位。在中國，胃癌是最常見的消化道腫瘤，占惡性腫瘤死亡率的第一位，全國平均年死亡率為16/10萬人口，高發地達60/l0萬人口。雖然胃癌的診斷及治療已經取得了長足的進步，但近10年來其5年生存率并沒有明顯的提高，術后復發和轉移是其死亡的重要原因，居高不下的發病率和死亡率已經使胃癌的研究與治療成為亟待解決的重大課題。目前的資料表明，胃癌的發生、發展是一個多因素、多階段的發展過程，其惡變過程包括了細胞增生、DNA復制過度、細胞周期功能紊亂、細胞永生化、逃逸凋亡、血管新生（Angiogenesis）及浸潤轉移等一系列的過程，地域環境及生活飲食、幽門螺桿菌感染（Helicobacter?pylori，HP）、癌前病變以及遺傳和基因等因素均與胃癌的發生、發展密切相關。分子生物學的研究顯示，胃癌的癌變涉及癌基因、抑癌基因、凋亡相關基因與轉移相關基因等的改變，而基因改變的形式也是多種多樣的，這些基因受一系列復雜機制調控，但是其確切的調控機制并不完全明了。

1977年美國學者閔錫鈞根據顯微鏡下胃癌生長方式的不同將其分為膨脹型和浸潤型兩型（Ming氏分型），并且指出二者的生物學行為和臨床預后截然不同。該分類方法很好地反映了胃癌的生物學行為，且與預后密切相關，受到國內外臨床專家和學者們的公認。膨脹型胃癌癌組織呈膨脹性生長，集聚成團塊狀，周圍纖維結締組織增生（Desmoplasia），邊界較為清楚。浸潤型胃癌癌組織呈浸潤性生長，不形成團塊狀，與周圍組織無明顯的界限，多為低分化腺癌或印戒細胞癌。膨脹型術后5年存活率為27.4%,而浸潤型僅為9.1%。迄今為止，國內外對于這方面的研究鮮有報道，兩型胃癌（Ming氏膨脹型和浸潤型）的發病機制和形成的分子基礎更不清楚。

目前世界范圍內報道的胃癌細胞系已經不少：中國的BGC-823、SGC-7901、MGC-803；美國的AGS、HS764T、SNU-1；歐洲的AGS、KATO-III、HGC-27；日本的MKN-1、MKN-28、MKN-45、MKN-74、NMG?C-3、NMG?C-4、AZ-521；韓國的SNU-1、SNU-5、SNU-16等。其中大部分來源于轉移的淋巴結、腹水或晚期、低分化的腫瘤組織，用這些細胞系做胃癌研究缺乏很好的代表性和科學性；另一方面很多細胞系應用至今已經有幾十年的時間，在長期、反復的傳代培養過程中，細胞特性會發生很大變化，不同實驗室在用同種細胞的不同代次得到的數據相差會很大，結果缺乏可比性和重復性。基于以上原因，胃癌原代細胞培養并建立細胞系在現階段仍有很大的價值。

另有研究發現，雖然各個細胞系在體外保持了許多起源細胞的形態與功能特征，但是由于周圍環境的變化，這些細胞系與供體的起源細胞會存在程度不一的差異，這種差異在培養開始就存在，只是程度相對較小，以后隨著不斷的傳代培養及變異的發生，這種差異會越來越大，甚至會產生起源細胞本不具備的特征。由于這些因素的存在，不同細胞系的建立工作更顯得意義重大。

迄今世界上關于胃癌的臨床和基礎研究已有很多的報道，但從Ming氏分型角度去研究胃癌發生機制的報道卻不多，Ming氏胃癌細胞系也未見報道。

中國專利CN101993854A公開一種來源于肝轉移灶的大腸癌細胞系CJF及其構建方法，所述細胞系由如下方法獲得：取大腸癌肝轉移灶的組織，用膠原酶/透明質酸酶消化成單細胞后，MACS分選出CD133+細胞接種于NOD/SCID鼠皮下，成瘤后取出腫瘤組織，經體外培養獲得可穩定傳代的富含大腸癌干細胞的大腸癌細胞系CJF。該發明CJF細胞是從結腸癌人肝轉移灶取材的，對大腸癌肝轉移的研究有其他大腸癌細胞系無法比擬的優點；該發明CJF細胞穩定表達CD133+的細胞亞群約為10％，這株細胞系在大腸癌肝轉移過程及腫瘤干細胞在轉移機制中的作用研究具有廣泛的應用前景。

發明內容

本發明的目的是提供一株Ming氏人浸潤型胃癌細胞系及其應用。

本發明所述Ming氏人浸潤型胃癌細胞系為Ming氏人浸潤型胃癌細胞株XGC-1，已于2013年6月6日保藏于中國典型培養物保藏中心，地址：中國，武漢，武漢大學，保藏編號：CCTCC?NO：C201385。