[發明專利]一種山梔子苷B的制備方法

無效

• 申請號: 201310344413.7
• 申請日: 2013-08-09
• 公開（公告）號: CN103435664A
• 公開（公告）日: 2013-12-11
• 發明（設計）人: 張金芳;萬冬梅
• 申請（專利權）人: 南京標科生物科技有限公司
• 主分類號: C07H17/04
• 分類號: C07H17/04;C07H1/08
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于生物技術領域，特別涉及一種山梔子苷B的制備方法。

背景技術

山梔子苷B屬于環烯醚萜糖苷類物質，CAS號24512-62-7，分子式C17H24O11，分子量404.37，分子結構式：

?山梔子又叫黃梔子、山梔、白蟾，是茜草科植物梔子的果實，含黃酮類梔子素、果膠、鞣質、藏紅花素、藏紅花酸、D-甘露醇、廿九烷、β-谷甾醇，梔子苷、去羥梔子苷泊素-1-葡萄糖苷及山梔苷B等成分，具有瀉火除煩、清熱利濕、涼血解毒的功效，用于治療心腦血管、肝膽等疾病。

通過文獻檢索，現有山梔子苷B的制備方法，多采用大孔樹脂和硅膠柱分離。此類方法存在操作復雜，收率低的技術缺陷。

發明內容

本發明的目的是解決現有技術不足和缺陷，提供一種操作簡便的山梔子苷B的制備方法。

本發明的目的是這樣來實現的：一種山梔子苷B的制備方法，其特征在于在于以下步驟：

1）將鮮山梔子原料打漿，加入3-10倍量95%乙醇充分攪拌，沉淀，抽濾上清液，濾渣再加入95%乙醇溶液充分攪拌，合并兩次提取液回收乙醇，濃縮液加入適量水稀釋后加入超濾膜超濾，透過液再加入納濾膜納濾，收集濃縮液；

???2）上述濃縮液加入乙酸乙酯萃取，棄乙酸乙酯層，母液繼續濃縮成浸膏采用高速逆流色譜分離，根據圖譜收集流分，流分減壓干燥即得。

????所述步驟1）中的超濾膜可選截留分子量3000-6000的中空纖維素膜，納濾膜為截留分子量為300的中空纖維素膜。

所述步驟2）高速逆流色譜分離條件為：溶劑系統選乙酸乙酯、正丁醇、水，混合比例2-5:1-3:3-7，取上相做固定相，下相做流動相，主機轉速700-1000rpm，流速1-3ml/min。

采用本發明制備山梔子苷B，生產工藝簡單，產品純度高，生產成本低，易于實現工業化生產。

具體實施方式：

下面將結合具體實施方式進一步說明本發明，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。

實施例1：

取10kg鮮山梔子原料打漿，加入10倍量95%乙醇充分攪拌，沉淀，抽濾上清液，濾渣再加入3倍量95%乙醇溶液充分攪拌，合并兩次提取液回收乙醇，濃縮液加入10kg水稀釋后加入截留分子量3000的中空纖維素膜超濾，透過液再加入截留分子量為300的中空纖維素膜納濾，收集濃縮液加入3L乙酸乙酯萃取，棄乙酸乙酯層，母液繼續濃縮成浸膏。取乙酸乙酯、正丁醇、水，按比例2:1:3混合，取上相注入色譜管做固定相，主機轉速700rpm，取下相做流動相，流速2ml/min，根據圖譜收集流分，流分減壓干燥得白色山梔子苷B2.3g，經HPLC檢測，含量98.5%。

實施例2：

取10kg鮮山梔子原料打漿，加入9倍量95%乙醇充分攪拌，沉淀，抽濾上清液，濾渣再加入5倍量95%乙醇溶液充分攪拌，合并兩次提取液回收乙醇，濃縮液加入20kg水稀釋后加入截留分子量6000的中空纖維素膜超濾，透過液再加入截留分子量為300的中空纖維素膜納濾，收集濃縮液加入4L乙酸乙酯萃取，棄乙酸乙酯層，母液繼續濃縮成浸膏。取乙酸乙酯、正丁醇、水，按比例4:3:7混合，取上相注入色譜管做固定相，主機轉速800rpm，取下相做流動相，流速3ml/min，根據圖譜收集流分，流分減壓干燥得白色山梔子苷B2.5g，經HPLC檢測，含量95.1%。

實施例3：

取10kg鮮山梔子原料打漿，加入8倍量95%乙醇充分攪拌，沉淀，抽濾上清液，濾渣再加入6倍量95%乙醇溶液充分攪拌，合并兩次提取液回收乙醇，濃縮液加入15kg水稀釋后加入截留分子量4000的中空纖維素膜超濾，透過液再加入截留分子量為300的中空纖維素膜納濾，收集濃縮液加入2L乙酸乙酯萃取，棄乙酸乙酯層，母液繼續濃縮成浸膏。取乙酸乙酯、正丁醇、水，按比例5:2:5混合，取上相注入色譜管做固定相，主機轉速900rpm，取下相做流動相，流速1ml/min，根據圖譜收集流分，流分減壓干燥得白色山梔子苷B2.5g，經HPLC檢測，含量98.2%。

實施例4：

取10kg鮮山梔子原料打漿，加入8倍量95%乙醇充分攪拌，沉淀，抽濾上清液，濾渣再加入7倍量95%乙醇溶液充分攪拌，合并兩次提取液回收乙醇，濃縮液加入10kg水稀釋后加入截留分子量3000的中空纖維素膜超濾，透過液再加入截留分子量為300的中空纖維素膜納濾，收集濃縮液加入4L乙酸乙酯萃取，棄乙酸乙酯層，母液繼續濃縮成浸膏。取乙酸乙酯、正丁醇、水，按比例4:1:7混合，取上相注入色譜管做固定相，主機轉速850rpm，取下相做流動相，流速2ml/min，根據圖譜收集流分，流分減壓干燥得白色山梔子苷B2.2g，經HPLC檢測，含量97.5%。