[發明專利]提高酶聯免疫斑點技術的特異性膜封閉方法

有效

• 申請號: 201310343750.4
• 申請日: 2013-08-08
• 公開（公告）號: CN104345151A
• 公開（公告）日: 2015-02-11
• 發明（設計）人: 孫正剛
• 申請（專利權）人: 北京和杰創新生物醫學科技有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 天津三元專利商標代理有限責任公司 12203
• 代理人: 胡婉明

1.一種提高酶聯免疫斑點技術的特異性膜封閉方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）用基礎緩沖液配制含有非蛋白質封閉組分的第一種封閉液；（2）用與步驟（1）相同的基礎緩沖液配制含有蛋白質和氨基酸的第二種封閉液；（3）用前述第一種封閉液在溫度37℃條件下對包被有抗原的硝酸纖維素膜進行第一次封閉；（4）棄去第一種封閉液；（5）用前述第二種封閉液在溫度37℃條件下對前述完成第一次封閉的硝酸纖維素膜進行第二次封閉；（6）棄去第二種封閉液，完成封閉過程。

2.根據權利要求1所述的提高酶聯免疫斑點技術的特異性膜封閉方法，其特征在于，所述配制第一種封閉液使用的基礎緩沖液為磷酸鹽緩沖液或者Tris-Hcl緩沖液；所述非蛋白質封閉組分為聚乙烯醇或聚乙二醇，該非蛋白質封閉組分的加入濃度為2±0.5%。

3.根據權利要求1所述的提高酶聯免疫斑點技術的特異性膜封閉方法，其特征在于，所述配制第二種封閉液使用的基礎緩沖液為磷酸鹽緩沖液或者Tris-Hcl緩沖液；所述蛋白質為低分子量蛋白質，該低分子量蛋白質為酪蛋白或者牛血清白蛋白，且低分子量蛋白質的加入濃度為1±0.5%；所述氨基酸為酪氨酸，該氨基酸的加入濃度為1±0.5%。

4.根據權利要求1所述的提高酶聯免疫斑點技術的特異性膜封閉方法，其特征在于，所述硝酸纖維素膜的包被抗原優選U1-nRNP或者SS-A。

5.根據權利要求1所述的提高酶聯免疫斑點技術的特異性膜封閉方法，其特征在于，所述第一次封閉的時間為2至3小時；所述第二次封閉的時間為1至2小時。

6.權利要求1所述提高酶聯免疫斑點技術的特異性膜封閉方法在酶聯免疫斑點技術中的應用。