[發明專利]一株德沃斯氏菌及其降解嘔吐毒素的應用

有效

• 申請號: 201310339333.2
• 申請日: 2013-08-06
• 公開（公告）號: CN103387950A
• 公開（公告）日: 2013-11-13
• 發明（設計）人: 汪洋
• 申請（專利權）人: 國家糧食局科學研究院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A23K1/00;A23L1/015;A23L1/105;C12R1/01
• 代理公司: 北京正理專利代理有限公司 11257
• 代理人: 趙曉丹

技術領域

本發明涉及一株德沃斯氏菌及其在降解嘔吐毒素中的應用。

背景技術

脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（deoxynivalnol，DON），化學名稱為3α,7α,15-三羥基-12,13-環氧單端孢霉-9-烯-8-酮，它主要是由禾谷鐮刀菌（Fusarium?graminearum）、黃色鐮刀菌（Fusarium?culmorum）感染小麥、大麥、燕麥、玉米等谷物產生的單端孢霉烯族毒素，因為該物質可以引起動物的嘔吐癥狀，故又名嘔吐毒素（vomitoxin）。在全世界范圍內，DON是糧食、飼料、食品的主要污染霉菌毒素之一，嚴重影響人和牲畜的健康。人畜攝入了被嘔吐毒素污染的食物后,會導致厭食、嘔吐、腹瀉、發燒、站立不穩、反應遲鈍等急性中毒癥狀，嚴重時損害造血系統造成死亡，其嚴重危害性已經引起了各國的普遍重視。

嘔吐毒素對我國谷物類原料的污染相當普遍，其檢出率和檢出量都是霉菌毒素中最高的一種，據甄陽光等人調查顯示，中國飼料和原料嘔吐毒素的超標比例接近70%，玉米中嘔吐毒素的超標率為57.1%，毒素平均含量為1.01mg/kg，其最高含量為2.13mg/kg。由于嘔吐毒素在谷物、飼料中的普遍存在性、高含量特性和急慢性毒性，降低或者去除其毒性顯得尤為重要與迫切。目前，國內外嘔吐毒素脫毒方法主要有物理法、化學處理和生物方法三大類。雖然物理、化學方法脫毒已經取得一定程度的成功,但仍然存在脫毒效果有限、可能造成重要營養物質的丟失、成本較高等缺點。生物方法具有可以在溫和的條件下使毒素的毒力降低，而且對原料的感官性狀、適口性等影響極小等優點，而被認為是最佳脫毒方法。由于微生物種類多，來源廣泛，幾乎所有的有機污染物都可以被微生物分解，并且具有降解徹底，無二次污染的優點，所以嘔吐毒素的微生物脫毒是一種行之有效的脫毒方法。隨著物理、化學脫毒手段的弊端不斷出現和對迅猛發展的生物技術優點的認識增加，國內外利用微生物進行毒素脫毒的研究正在逐步展開，雖然有關用微生物脫毒的研究成果還不多，但現有成果均表現了良好的開發和應用前景。2011年Yoko等人在土壤中篩選到一株諾卡氏屬菌株，該菌株能在好氧條件下利用嘔吐毒素為唯一碳源和能源生長，其降解毒素濃度范圍為10–1000μg/mL（Nocardioides?sp.strain?WSN05-2,isolated?from?a?wheat?field,degrades?deoxynivalenol,producing?the?novel?intermediate?3-epideoxynivalenol,Ikunaga?Y,Sato?I,Grond?S,et?al.(2011)，Appl?Microbiol?Biotechnol89:419–427）。

綜上所述，為解決飼料、飼料原料中毒素污染問題，有必要從自然資源中分離篩選高效、安全降解嘔吐毒素的微生物菌株，進一步研究其生物特性，毒素降解特性及降解機理，研發適用于飼料行業的霉菌毒素微生物脫毒劑，提高糧食利用率，保證畜牧業的安全生產，提高畜牧業經濟效益。

發明內容

本發明要解決的技術問題是提供一株能降解嘔吐毒素的德沃斯氏菌及其應用。

為解決上述技術問題，本發明采用如下技術方案：

本發明提供一株德沃斯氏菌（Devosia?sp.），命名為DDB001，屬于德沃斯氏屬中的新種，是從南陽地區種植小麥的土壤中分離得到的，已于2013年1月22日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心（簡稱CGMCC，地址為：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所，郵編100101），其保藏編號為CGMCC?No.7185。與其它生物的情況一樣，本發明具有降解嘔吐毒素的菌株DDB001仍然易發生變異。因此，可以利用本領域已知的物理和化學方法得到該菌株的突變株。例如，可以通過用化學藥劑如N-甲基-N'-硝基-N-亞硝基胍處理得到其突變株，這些誘變突變株，只要保留了嘔吐毒素降解能力這樣一個特征，也屬于本發明的一部分。

本發明還提供一種菌劑，它的活性成分為德沃斯氏菌（Devosia?sp.）DDB001，其保藏編號為CGMCC?No.7185。該菌劑可以是液體型菌劑也可以是固體型菌劑，并通過現有技術中已公開的制備方法來制備。具體地，本發明提供一種上述菌劑的制備方法，該方法包括：

（1）將保藏編號為CGMCC?No.7185的德沃斯氏菌（Devosia?sp.）DDB001在固體培養基上活化；

（2）將活化后的菌種接種于種子培養基中培養至對數生長期，制得種子液；