[發明專利]一種過氧乙酸殘留的快速測定方法

有效

• 申請號: 201310336589.8
• 申請日: 2013-08-05
• 公開（公告）號: CN103439322A
• 公開（公告）日: 2013-12-11
• 發明（設計）人: 鄧金花;秦惠;黃報亮;吳清平
• 申請（專利權）人: 廣東環凱微生物科技有限公司
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 譚英強

技術領域

本發明屬于生物技術酶法分析領域，特別涉及一種過氧乙酸殘留的快速測定方法。

背景技術

過氧乙酸作為一種新型高效低毒的殺菌消毒劑主要應用于食品加工器具，醫療器械和用品等的消毒。隨著環境的惡化，全球的腎病患者越來越多，據不完全統計，2008年我國的血透析患者已超過10萬人，所以過氧乙酸應用在血透析方面的消毒顯得尤為重要。血透析機一般1-3個月內需進行一次消毒，可采用0.2%的過氧乙酸循環20分鐘，浸泡30分鐘消毒；儲水罐和管道一般15天需要進行一次消毒，可采用0.2%的過氧乙酸浸泡30分鐘消毒，每次消毒后均需用反滲水反復沖洗并進行殘留的測試，確保無過氧乙酸殘留。

過氧乙酸殘留檢測目前尚缺乏被廣泛認可的方法，因此開發出一種便捷、靈敏度高、可靠性強的過氧乙酸殘留測試產品迫在眉睫。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術的不足，提供一種過氧乙酸殘留的快速測定方法。

本發明所采取的技術方案是：

一種過氧乙酸殘留的快速測定方法，包括以下步驟：將過氧乙酸殘留快速測定試紙浸入待測樣品制成的試液中，2秒后取出，甩去試紙上多余的溶液，顯色完全后，將試紙所顯的顏色與標準比色卡相比較，讀出過氧乙酸殘留的濃度數據；

其中，過氧乙酸殘留快速測定試紙由以下方法制備：用純水將辣根過氧化物酶、顯色劑、pH調節劑、蛋白酶保護劑配制成混合液，將濾紙在混合液中浸泡5～30min后取出，烘干成形，裁切至設定尺寸，粘貼在底板上，制得用于測定過氧乙酸殘留的試紙；所述混合液中，辣根過氧化物酶的濃度為0.01～0.10g/L，顯色劑的濃度為1.0～2.0g/L。

優選的，所述顯色劑為四甲基聯苯胺鹽酸鹽、四甲基聯苯胺硫酸鹽、四甲基聯苯胺丙磺酸鹽或2,2-聯氮基雙(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二銨鹽。

優選的，所述蛋白酶保護劑為糖、氨基酸、蛋白質和聚合物的混合物。

優選的，所述蛋白酶保護劑中，糖為蔗糖、海藻糖中的至少一種；氨基酸為甘氨酸、谷氨酸、精氨酸中的至少一種；蛋白質為牛血清蛋白、人血清白蛋白中的至少一種；聚合物為聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮中的至少一種。

優選的，所述蛋白酶保護劑中，糖為海藻糖，氨基酸為甘氨酸，蛋白質為人血清白蛋白，聚合物為聚乙二醇。

優選的，所述混合液中，糖的濃度為4～20g/L，氨基酸的濃度為2～10g/L，蛋白質的濃度為1～5g/L，聚合物的濃度為4～20g/L。

優選的，所述pH調節劑為檸檬酸與磷酸氫二鈉的混合物，混合液中，檸檬酸的濃度為0.028～0.044mol/L，磷酸氫二鈉的濃度為0.11～0.14?mol/L。

所述標準比色卡，由以下方法制備：?

1)????????用純水配制濃度為0.5mg/L的過氧乙酸標準溶液，將過氧乙酸殘留快速測定試紙浸入標準溶液中，2秒后取出，甩去多余的溶液，待試紙所呈現的顏色穩定后，在潘通色卡上找出對應的標準色；

2)????????同步驟1）所述方法，分別獲得檢測濃度為1mg/L、2mg/L、4mg/L、10mg/L、20mg/L、40mg/L的過氧乙酸標準溶液時試紙所呈現的標準色；

3)????????根據各標準色的色值制備得到標準比色卡。

本發明的有益效果是：

本發明提供了一種靈敏度高、穩定性好、操作簡便、經濟實用的能現場快速檢測樣品中殘留過氧乙酸含量的方法，該方法響應時間快，不超過15秒，試紙檢測靈敏度高，最低可檢測過氧乙酸的含量為0.5mg/L。

本發明方法所用試紙中的pH調節劑即可保持辣根過氧化物酶的活性也可緩沖試樣的pH，保證了測試結果的準確性；試紙中的酶保護劑保證了酶試紙的穩定性，在室溫的條件下，避光密閉保存，保質期至少可達到12個月；試紙的面積小，單次測試試劑用量只有普通實驗室方法的幾百分之一，且測試過程簡單，無需其它儀器和配件，可大大節約測試成本；試紙的可持式底板可防止拿取的過程中受人手的污染，十分安全可靠。

附圖說明

圖1為標準比色卡1#的視圖。

具體實施方式

一種過氧乙酸殘留的快速測定方法，包括以下步驟：將過氧乙酸殘留快速測定試紙浸入待測樣品制成的試液中，2秒后取出，甩去試紙上多余的溶液，顯色完全后，將試紙所顯的顏色與標準比色卡相比較，讀出過氧乙酸殘留的濃度數據；