[發(fā)明專利]一株大菱鲆爛邊病拮抗菌及其應用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310335550.4
• 申請日: 2013-08-04
• 公開（公告）號: CN103387949A
• 公開（公告）日: 2013-11-13
• 發(fā)明（設計）人: 鄭風榮;林學政;劉洪展;王波;張白羽
• 申請（專利權）人: 國家海洋局第一海洋研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A61K35/74;A61P31/04;C12R1/01
• 代理公司: 青島海昊知識產權事務所有限公司 37201
• 代理人: 曾慶國

技術領域

本發(fā)明屬于海洋微生物和生物防治技術領域，具體涉及一種大菱鲆拮抗菌及其應用。

背景技術

大菱鲆(Scophthalmas?maximus)?是歐洲名貴海水魚種，是當前歐洲的重要海水養(yǎng)殖魚類之一，自1992年被引種到我國進行人工繁殖,?現(xiàn)已達到一定的規(guī)模，逐漸成為我國北方優(yōu)秀的水產養(yǎng)殖品種和工廠化養(yǎng)殖的主要對象,?年創(chuàng)產值超過15億元。然而伴隨著養(yǎng)殖范圍的擴大和養(yǎng)殖密度的增加,以及品種的退化,大菱鲆的病害問題也日漸突出，各種細菌性疾病、寄生蟲病、病毒性疾病時有發(fā)生，且有愈演愈烈之勢。其中細菌性疾病是大菱鲆養(yǎng)殖中危害最為嚴重的一種疾病。2009年以來山東威海養(yǎng)殖區(qū)大菱鲆爆發(fā)流行性疾病，癥狀首先表現(xiàn)為側鰭、尾鰭顏色變淺，出現(xiàn)出血點，鰭條及鰭基部充血發(fā)紅，各內臟器官有不同程度的發(fā)紅和病變，患病大菱鲆未見潰爛便死亡，該病多發(fā)生于苗期和養(yǎng)成初期，傳染性極強、流行范圍廣，死亡率極高，一旦發(fā)病，完全治愈非常困難，病魚從鰭出現(xiàn)出血點至死亡僅需3～4天，屬急性死亡，給養(yǎng)殖業(yè)主造成很大的經濟損失。研究表明鰻弧菌（Vibrio?anguillarum）和副溶血弧菌（Vibrio?parahaemolyticus）可引起大菱鲆鰭部充血死亡等的流行性病害的發(fā)生。由于傳統(tǒng)的抗生素等化學藥物防治容易引起細菌產生抗藥性，導致防治效果逐年下降，同時化學藥物的使用容易導致藥物殘留、污染環(huán)境，并最終影響人類健康。為減少抗生素或一些化學水質凈化劑的使用，使水產養(yǎng)殖業(yè)走上無公害養(yǎng)殖的可持續(xù)發(fā)展之路，一些國家開始利用生態(tài)防治方法來控制水產養(yǎng)殖病害，其原理是根據(jù)同一生態(tài)系統(tǒng)中的不同微生物之間的相互作用，如一些細菌和其他微生物可在環(huán)境中分泌抗生素，能很快殺死其它微生物，有的細菌則產生細菌素，殺死與其親緣關系相近的種。益生菌是近年來國內外許多學者研究生物防治和生態(tài)防治的方法，它是一類具有巨大實用價值的生物工程產品，它是由從宿主體內分離出的正常菌群成分制成的活菌制劑，再通過適當途徑作用于養(yǎng)殖魚類，可以抑制病原菌的生長，提高苗種的成活率和魚類的生長速度。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的是提供一種大菱鲆拮抗菌及其應用，可有效防治大菱鲆鰭部出血和死亡流行性疾病的發(fā)生，為大菱鲆鰭部出血和死亡流行性疾病的預防和治療提供產品和使用方法。

本發(fā)明所提供的生物拮抗菌，為假交替單胞菌（Pseudoalteromonas?sp.），該菌株已于2013年7月3日保藏于北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院的中國科學院微生物研究所的中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號：CGMCC?NO.?7870。

本發(fā)明的假交替單胞菌用于制備菌液制劑，所制得的菌液制劑可以預防大菱鲆鰭部出血和死亡流行性疾病的發(fā)生。

菌液制劑中假交替單胞菌的數(shù)量為10⁷?～10¹⁰?CFU/ml。

本發(fā)明篩選到的假交替單胞用于提取胞外產物，預防大菱鲆鰭部出血和死亡流行性疾病的發(fā)生。

本發(fā)明篩選的具有拮抗大菱鲆鰭部出血和死亡疾病的細菌，拮抗活性強，利用鹽析法制備的拮抗菌胞外產物的產量穩(wěn)定，成本低，可具有較高的拮抗活性。使用該拮抗菌或拮抗產物對大菱鲆的免疫保護率達50-60%，該拮抗菌產物為純生物制劑，且具有安全、環(huán)保的特點，不會產生藥物殘留和環(huán)境造成污染，并且該方法可遏制大菱鲆鰭部出血死亡流行性疾病的發(fā)生和流行。

具體實施方式

下面對本發(fā)明進行詳細的描述。上述拮抗菌的篩選方法如下：首先以大菱鲆鰭部出血的病原菌鰻弧菌（Vibrio?anguillarum）為指示菌，利用分離自南極冰海水和大菱鲆養(yǎng)殖池水的100余株細菌，篩選其拮抗菌。提取拮抗菌的胞外產物，用于大菱鲆鰭部出血死亡流行性疾病的預防。具體技術方案如下：