[發明專利]檢測乳腺癌G1/S期調控相關的四色基因探針試劑盒有效
| 申請號: | 201310335444.6 | 申請日: | 2013-08-02 |
| 公開(公告)號: | CN103555820A | 公開(公告)日: | 2014-02-05 |
| 發明(設計)人: | 張瑾;白敬超;胡林萍;程濤 | 申請(專利權)人: | 中國醫學科學院血液病醫院(血液學研究所);天津醫科大學附屬腫瘤醫院 |
| 主分類號: | C12Q1/68 | 分類號: | C12Q1/68 |
| 代理公司: | 天津濱海科緯知識產權代理有限公司 12211 | 代理人: | 韓敏 |
| 地址: | 300020 *** | 國省代碼: | 天津;12 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 檢測 乳腺癌 g1 調控 相關 基因 探針 試劑盒 | ||
1.一種用于輔助檢測參與G1/S調控作用的相關基因的即用型雜交液,其特征在于:包括CCND1基因探針、RB1基因探針、C-myc基因探針和CHEK2基因探針。
2.權利要求1所述一種用于輔助檢測參與G1/S調控作用的相關基因的即用型雜交液的制備方法,其特征在于:包括如下步驟:
1)、探針制作:在常用的數據庫如NCBI?Clone?Registry、Ensembl?Genome?Browser和UCSC?Genome?Bioinformatics上定位檢索分別含檢測CCND1、RB1、C-myc、CHEK2基因的BAC克隆,獲得目的基因的克隆后,大量提取DNA,再采用缺口平移的方法將熒光素染料標記的dUTP連接到酶切好的DNA上,對標記好的目的DNA進行組合沉淀,用含有50%去離子甲酰胺的雜交緩沖液溶解沉淀,制得即用型雜交液;
2)、探針驗證:采用正常人二倍體成纖維細胞的細胞爬片進行探針驗證。
3.根據權利要求2所述的方法,其特征在于:含CCND1基因的克隆,編號為:RP11-825J6(UCSC?genome?browser),RP11-156B3(UCSC?genome?browser)或RP11-643C9(UCSC?genome?browser)中的一種或兩種或三種。
4.根據權利要求2-3任一項所述的方法,其特征在于:含RB1基因的克隆,編號為:RP11-951P4(UCSC?genome?browser),RP11-305D15(UCSC?genome?browser)或RP11-102I4(UCSC?genome?browser)一種或兩種或三種。
5.根據權利要求2-4任一項所述的方法,其特征在于:含C-myc基因的克隆,編號為:RP11-944J14(UCSC?genome?browser),RP11-367L7(UCSC?genome?browser)或RP11-440N18(UCSC?genome?browser)一種或兩種或三種。
6.根據權利要求2-5任一項所述的方法,其特征在于:含CHEK2基因的克隆,編號為:RP11-1001I5(UCSC?genome?browser),RP11-872I24(UCSC?genome?browser)或RP11-694G9(UCSC?genome?browser)一種或兩種或三種。
7.一種用于輔助檢測參與G1/S調控作用的相關基因的檢測試劑盒,其特征在于:包括權利要求1所述即用型雜交液。
8.根據權利要求7所述的檢測試劑盒,其特征在于:所述即用型雜交液的組分及濃度為:CCND1基因探針、RB1基因探針、C-myc基因探針和CHEK2基因探針的濃度均為0.04μg/μl。
9.根據權利要求7或8所述的檢測試劑盒,其特征在于:該檢測試劑盒還包括:DAPI復染劑。
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